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Avaliação espermática do sêmen criopreservado de touros Curraleiro/Pé Duro em banco de germoplasma / Spermatic evaluation of cryopreserved semen from curraleiro/ pé duro bulls in germplasm bank

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Previous issue date: 2012-02-28 / This investigation aimed to evaluate the quality of cryopreserved semen from 21
Curraleiro/Pé Duro bulls in germplasm bank, categorizing the doses of the sires
according to spermatic parameters that search the oocitary fertilization, and
verifying in vitro the fecundant potential of the seminal dose. All the samples were
thawed and analyzed by the spermatic exams of morphology, kinetics, integrity of
plasmatic membrane and integrity of acrosome; however, only four of them also
were evaluated through the fertilization rates, due to the major number of stocked
straws, which allowed to test more than one in vitro essay. Approximately 200
spermatozoids were counted for each exam, the results were expressed in
percentages and submitted to simple descriptive statistics (mean and standard
deviation), using as comparative reference, the patterns suggested by the
Brazilian Animal Reproduction College for bovine thawed semen, as well as
values obtained in other investigations. The results of the four spermatic exams
were verified, and were searched the most important parameters that aim the
fertility, being in the morphology the rate of normal spermatozoids (NRM) and
major defects (DMA); in the kinetics, the progressive motility (MP) and rapid cells
(RPD); in the integrity of plasmatic membrane, the whole plasmatic membrane
(MPI); and in the integrity of acrosome, the live spermatozoid with whole acrosome
(EVAI). From the 21 analyzed doses, ten presented adverse values in the
mentioned spermatic parameters, and of these samples, seven showed
divergences, because they had negative results for fertilization in some exams and
favorable results in others, revealing the complex nature of the spermatozoid.
Were taken into account for Pearson correlations, Cluster analysis and a
dendrogram elaboration, the parameters NRM, DMA, MP, RPD, MPI and EVAI.
The Cluster created by spermatic similarity three groups (G1, G2 e G3), for
morphology, kinetics, integrity of plasmatic membrane and integrity of acrosome.
The results were evaluated through simple descriptive statistics, and the difference
of means by Duncan and Kruskal Wallis tests, at 5% significance level. It is worth
mentioning that in the dendrogram the DT10 and DT19 were discriminated from
the groups for having very distant values from the rest of seminal doses. In
fecundation rates evaluation, three replicates were made with the straws of the
four chosen bulls, passing previously through Percoll gradient (45:90%), for
eliminating the defective cells and improving the fertilizing capacity. This selection
allowed favorable results, with rates of fertilized oocytes superior to 60%. In the
evaluation of masculine chromatin 18 hours post in vitro insemination high
Pronucleus rates were observed. The statistical difference of these values was
estimated by Chi-square test. The results revealed the spermatic quality and in
vitro fecundant capacity of Curraleiro/Pé Duro analyzed semen, enabling to
delineate appropriate strategies, for the conservation of this local genetic resource
in extinction, owner of unique characteristics of adaptation and rusticity, that could
be included hereafter in the brazilian cattle herds. / Esta pesquisa objetivou avaliar a qualidade do sêmen criopreservado de 21
touros Curraleiro/Pé Duro em banco de germoplasma, categorizando as doses
dos reprodutores segundo parâmetros espermáticos que buscam a fertilização
oocitária, e verificando in vitro o potencial fecundante da dose seminal. Todas as
amostras foram descongeladas e analisadas pelos exames espermáticos de
morfologia, cinética, integridade da membrana plasmática e integridade do
acrossoma; no entanto, só quatro delas também foram avaliadas através das
taxas de fecundação, devido ao maior número de palhetas estocadas, as quais
permitiram testar mais de um ensaio in vitro. Contaram-se aproximadamente 200
espermatozóides para cada exame, os resultados foram expressos em
porcentagens e submetidos a estatística descritiva simples (média e desvio
padrão), utilizando como referência comparativa, os padrões sugeridos pelo
Colégio Brasileiro de Reprodução Animal para sêmen descongelado bovino,
assim como valores obtidos em outras pesquisas. Os resultados dos quatro
exames espermáticos foram verificados, e buscaram-se os parâmetros mais
importantes que visam a fertilidade, sendo na morfologia a taxa de
espermatozóides normais (NRM) e defeitos maiores (DMA); na cinética, a
motilidade progressiva (MP) e células rápidas (RPD); na integridade da
membrana plasmática, a membrana plasmática íntegra (MPI) e na integridade do
acrossoma, o espermatozóide vivo com acrossoma íntegro (EVAI). Das 21 doses
analisadas, dez apresentaram valores adversos nos parâmetros espermáticos
mencionados, e dessas amostras, sete mostraram divergências, porque tinham
resultados negativos para a fecundação em alguns exames e resultados
favoráveis em outros, revelando a complexa natureza do espermatozóide.
Tomaram-se em conta para as correlações de Pearson, análise de Cluster e
elaboração de um dendrograma, os parâmetros NRM, DMA, MP, RPD, MPI e
EVAI. O Cluster criou por similaridade espermática três grupos (G1, G2 e G3),
para morfologia, cinética, integridade da membrana plasmática e integridade do
acrossoma. Os resultados foram avaliados mediante estatística descritiva simples,
e a diferença das médias pelos testes de Duncan e Kruskal Wallis, ao nível de
significância de 5%. Vale salientar que no dendrograma a DT10 e DT19 foram
discriminadas dos grupos por ter valores muito distantes do resto das doses
seminais. Na avaliação das taxas de fecundação, foram feitas três réplicas com
as palhetas dos quatro touros escolhidos, passando previamente através do
gradiente Percoll (45:90%), para eliminar as células defeituosas e melhorar a
capacidade fecundante. Esta seleção permitiu resultados favoráveis, com taxas
de oócitos fertilizados superiores a 60%. Na avaliação da cromatina masculina 18
horas pós inseminação in vitro foram observadas altas taxas para Pronúcleo. A
diferença estatística destes valores foi estimada pelo teste Chi-quadrado. Os
resultados revelaram a qualidade espermática e capacidade fecundante in vitro do
sêmen Curraleiro/Pé Duro analisado, possibilitando delinear adequadas
estratégias, para a conservação deste recurso genético local em extinção,
possuidor de características únicas de adaptação e rusticidade, que poderiam ser
inseridas futuramente nos rebanhos bovinos brasileiros.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tde/903
Date28 February 2012
CreatorsMONTESINOS, Iván Salamanca
ContributorsSERENO, José Robson Bezerra, FRENEAU, Gustavo Eduardo, FIORAVANTI, Maria Clorinda Soares
PublisherUniversidade Federal de Goiás, Mestrado em Ciência Animal, UFG, BR, Ciências Agrárias - Veterinaria
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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