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Previous issue date: 2012-12-26 / O colesteatoma adquirido, mesmo com os conhecimentos acumulados desde sua
primeira descrição, ainda se mantém como um problema de saúde pública distante de ser
solucionado. O entendimento mais profundo da patogênese do colesteatoma é de extrema
importância visto que a natureza desta lesão é destrutiva e causadora de complicações
potencialmente graves. Apesar das teorias propostas e das várias proteínas terem sido
identificados no colesteatoma, a verdadeira etiopatogenia da doença ainda carece de
investigações. Objetivo: Identificar biomarcadores do colesteatoma adquirido utilizando a
plataforma proteômica. Casuística e Métodos: Foram coletadas amostras de colesteatoma e
também fragmento de pele da região retroauricular de 12 indivíduos submetidos a cirurgia
para remoção do colesteatoma. As amostras foram armazenadas em solução salina e
mantidas a -20ºC até pesagem tecidual e extração das proteínas. Eletroforese bidimensional
foi realizada, os géis foram corados com nitrato de prata e suas imagens digitalizadas. Todas
as análises foram realizadas em triplicatas. Os peptídeos extraídos após a digestão do spots
foram levados à espectrometria de massa e os espectros obtidos foram analisados usando o
algoritmo Mascot utilizando os bancos de dados de proteína do NCBI e SwissProt.
Resultados: Dos 393 spots identificados na análise do extrato proteico de colesteatoma
adquirido, apenas 10 estavam dentro dos parâmetros estatísticos aceitáveis pelo algoritmo
Mascot. As principais proteínas detectadas no colesteatoma adquirido foram a cadeia beta do
fibrinogênio, proteína da matriz extracelular 2, actina citoplasmática 1, heparan sulfato
glucosamina 3-O-sulfotransferase 3A1, fator de necrose tumoral alfa induzido proteína 8-like
1, Stanniocalcina-2, lisofosfolipase eosinofílica e OFUT1.Conclusão: Foram identificadas
proteínas envolvidas com a migração celular, regulação da apoptose, vias de sinalização,
hiperproliferação celular, cicatrização e processos inflamatórios. Pudemos, desta maneira,
traçar um perfil proteômico do colesteatoma adquirido. / The acquired cholesteatoma, even with all the knowledge accumulated since its
first description, still remains a public health problem, far from being solved. A deeper
understanding of its pathogenesis is extremely important since it is a destructive lesion that
might cause potentially serious complications. Several proteins have been identified in
cholesteatoma and a few theories were described, however the true etiology of the disease
still needs investigation. Objective: Identify acquired cholesteatoma biomarkers using
proteomics platform. Patients and methods: Cholesteatoma samples were collected and also
a skin fragment of the surgical incision of twelve patients undergoing surgery for
cholesteatoma removal. The samples were stored in saline solution and kept at -20 ° C until
weighing tissue and proteins extraction. Two-dimensional electrophoresis was conducted,
the gels were stained with silver nitrate and their images were digitized. All analyzes were
performed in triplicate. The peptides extracted after spots digestion were taken to mass
spectrometry and the spectra obtained were analyzed using the Mascot algorithm comparing
databases of the NCBI and SwissProt protein. Results: Of the 393 spots identified in the
analysis of protein extracts of acquired cholesteatoma, only 10 were within acceptable
statistical parameters by Mascot algorithm. The proteins detected in acquired cholesteatoma
were fibrinogen beta chain, extracellular matrix protein 2, actin cytoplasmic 1, heparan
sulfate glucosamine 3-O-sulfotransferase 3A1, tumor necrosis factor alpha 8 induced proteinlike
1, stanniocalcin-2, eosinophil lysophospholipase and OFUT1. Conclusion: Proteins
involved in cell migration, regulation of apoptosis, signaling pathways, cellular proliferation,
wound healing and inflammatory processes were identified. We were able to draw a
proteomic profile of acquired cholesteatoma.
Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/18385 |
Date | 26 December 2012 |
Creators | ARAÚJO, Juliana Gusmão De |
Contributors | http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/busca.do, NETO, Sílvio da Silva Caldas |
Publisher | Universidade Federal De Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Cirurgia, UFPE, Brasil |
Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
Language | Breton |
Detected Language | Portuguese |
Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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