Return to search

Efeitos da infecção pelo Trypanosoma cruzi sobre os componentes linfóide e microambiental do timorelação com interação timócito-epitélio tímico e morte celular

Made available in DSpace on 2016-04-07T13:20:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2
desio_oliveira_ioc_dout_2011.pdf: 1175865 bytes, checksum: f838717ed871f60759465b1b71ebee3c (MD5)
license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5)
Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A infecção pelo Trypanosoma cruzi promove alterações em órgãos linfóides. O timo apresenta-se atrofiado com depleção de células CD4+CD8+ (DP) na fase aguda. Em órgãos linfóides periféricos, os linfonodos subcutâneos (LSC) e o baço apresentam-se hipertrofiados com aumento de células T e B, enquanto os linfonodos mesentéricos (LM) apresentam-se atrofiados devido à morte dessas células. Nesse trabalho estudamos os efeitos da infecção pelo T. cruzi sobre células epiteliais tímicas (TEC) e timócitos, bem como o papel do timo no comportamento de órgãos linfóides periféricos. Em experimentos de infecção in vitro, avaliamos TEC, abordando a expressão de ligantes e receptores da matriz extracelular (ECM), e ainda, as possíveis conseqüências desse aumento de ECM sobre a interação de TEC/timócitos ou TEC/parasita. Nossos resultados demonstram que a infecção promove diminuição do número de TEC, alterações morfológicas e aumento de ECM em culturas infectadas. Observamos também que componentes da ECM são requeridos na interação entre TEC/parasita. Curiosamente, o menor crescimento de TEC em culturas infectadas está associada com a inibição do ciclo celular e não com apoptose
No que se refere à interação TEC/timócitos, observamos que a adesão foi maior nas culturas infectadas, especialmente sobre TEC parasitadas. Esse aumento de adesão entre TEC/timócitos corrobora a hipótese descrita anteriormente pelo nosso grupo que a infecção favorece a migração de timócitos para periferia. Estendendo nossa análise ao compartimento linfóide do timo, investigamos a apoptose de timócitos na infecção. Observamos que a celularidade do timo diminui viii durante a infecção, juntamente com aumento de apoptose de timócitos CD4-CD8- (DN), DP, CD4 e CD8. Procurando entender a via envolvida na apoptose desses timócitos, demonstramos que a atividade de caspases total, caspase 8, caspase 9 e caspase 3 estão aumentadas na infecção. Observamos que ambas caspases iniciadoras caspase 8 (via extrínseca, Fas, TNF, TRAIL) e caspase 9 (via intrínseca, privação de fatores) parecem estar envolvidas na depleção desses timócitos
Esse dado foi confirmado nos experimentos de bloqueio de morte com inibidores de caspases, onde observamos que o tratamento in vivo (injeção intratímica) e in vitro com zVAD (inibidor geral de caspases) em timócitos de animais infectados foi mais eficaz no bloqueio da morte do que os inibidores de caspase-8 (zIETD) ou caspase-9 (zLEHD). Além disso, animais infectados e tratados com zVAD apresentaram a celularidade do timo parcialmente recuperada, mais especificamente em timócitos DN e DP. Finalmente, procurando entender o papel do timo na resposta imune regional de órgãos linfóides periféricos na infecção, camundongos foram timectomizados antes da infecção para avaliação da celularidade dos LSC, LM e baço. Nossos dados demonstram que, mesmo com a ausência do timo, a hipertrofia dos LSC e a atrofia dos LM permaneciam inalterados, entretanto, encontramos significativo acúmulo de linfócitos T e B no baço de animais infectados. Em conjunto, nossos resultados demonstram que as alterações observadas no componente epitelial do microambiente tímico, assim como em timócitos de animais infectados favorecem a migração e morte destes timócitos e a atrofia desse tecido. Além disso, demonstramos que células do timo possuem papel imunoregulatório no baço durante a infecção / Trypanosoma cruzi
infection promotes lymphoid organ alterations. The thymus
is
atroph
ied
with CD4
+
CD8
+
(DP)
thymocyte depletion in the acute phase of
infection.
In p
eripheral lymphoid organs,
subcuta
neous lymph nodes
(LSC) and spleen
present
hypertrophy, with increase of
T and
B cells,
whereas mesenteric
lymph nodes
(LM)
are atrophied due to the death of these cells
.
In this work, we studied the effects of
T.
cruzi
infec
tion in thymic epithelial cells
(TEC) and thymocytes
,
as well as the role of
thymus in the behavior of peripheral lymphoid organs
.
In experiments of
in vitro
infection, we evaluated TEC, concerning the expression of extracellular matrix (ECM)
ligands and
receptor
s
, and also
the
possible
conseq
uences of
ECM
increase in
TEC
/thymocyte or
TEC/parasit
e
intera
ctions
. Our data
demonstrate
that
T. cruzi
infection promotes a decrease of TEC
number
, morphological alterations and ECM
increase in infected cultures
.
We observed that ECM components ar
e required in the
interaction between TEC and
parasit
es
. Curiously, the decrease in TE
C number in
infected cultures is
associated
to
cell cycle inhibition but not to
apoptos
is
.
Concerning
TEC/thymocyte interactions, we observed that adhesion was greater
in
infected
cultures, especially on parasitized TEC
.
This increase
in
TEC/thymocyte adhesion
corroborates the hypothesis
previously
described by our group
that the infection
favors migration
of
thymocyte
s
to the periphery
.
Extending our analysis to th
ymic
ly
mphoid compartment, we investigated
thymocyte
apoptosis following infection
.
We
observed that thymus cellulari
ty decreases
during infection, together with
the
increase of apopt
osis
in CD4
-
CD8
-
(DN), DP, CD4 and CD8
thymocyte
s.
Searching
to understand what
death pathway
is
involved in thymocyte apoptosis, we
demonstrated that the activity of total
cas
pases, caspase
-
8, caspase
-
9
and
caspase-3 (ef
f
e
c
tor
caspase
)
are increased in infection
.
We observ
ed that both initiator
ca
spase
-
8 (extrinsic pathway, Fas, TNF
, TRAIL)
and
caspase
-
9 (intrinsic pathway,
factor deprivation)
seem to be involved
in
thymocyte
deple
tion.
These data were
confirmed in
death
blocking experiments with caspase inhibitors
, in which w
e showed
that
in vivo
(intrat
hy
mic inje
ction
) and
in vitro
treatment
s
with
zVAD (
general caspase
in
hibitor
)
were more effective in blocking thymocyte death than the
in
hibitors of
caspase
-
8 (zIETD)
or
caspase
-
9 (zLEHD)
separately
.
Moreover
,
infected
animals
treated
with
zVAD showed
a
partial recovery
of
thymus cellularity
,
more
specifica
lly in
DN and DP
thymocytes
. Finally,
searching
to
understand
the role of the thymus in the
regional immune response of peripheral lymphoid organs
in infection
,
mice were
t
hy
mectomiz
e
d
prior to infection to evaluation of
LSC, LM
and spleen cellularity.
Our
data demonstrate
d
that, even in the absence of the thymus, LSC
hypertrophy
and LM
atrophy
were not altered
;
however
,
we found a significant accumulation of T and
B
lymphocytes in the spleen of infected animals. Conjointl
y
, our results show that the
alterations observed in the epithelial component of the thymus microenvironment, as
well as in
thymocyte
s of infected animals
favor
the migration
and death of
thymocyte
s and the atrophy of this tissue
.
Besides that
, we
demonstr
at
ed that thymic
cells
have an immunoregulatory role in the spleen during infection
.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/13620
Date January 2011
CreatorsOliveira, Désio Aurélio Farias de
ContributorsPons, Andréa Henriques, Lima, Célio Geraldo Freire de, Barcinsk, Marcello A., Nunes, Marise Pinheiro, Cruz, Daniella Arêas Mendes da, Meis, Juliana de, Villa-Verde, Déa Maria Serra
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

Page generated in 0.0037 seconds