Orientador: Helio Amante Miot / Resumo: FUNDAMENTOS: Melasma é hipermelanose crônica, focal, adquirida decorrente de patogênese não totalmente compreendida, resultado da alteração funcional e arquitetural dos melanócitos. A predisposição genética, aspectos hormonais e exposição à radiação solar são os elementos mais associados ao desenvolvimento da doença e essenciais para entendimento da fisiopatologia. É bem estabelecida a relação entre a exposição à radiação solar e a piora do quadro, entretanto, o efeito independente do UVB, UVA, assim como a atuação da luz visível (LV) são pouco estudados. OBJETIVOS: Padronização de um modelo de cultura organoide cutâneo primário para estudo da melanogênese da pele com melasma e pele normal adjacente, à irradiação com diferentes comprimentos de onda (UVB, UVA, LV). MÉTODOS: Etapa 1: Amostras de pele da região retroauricular (punch 3mm), de 10 voluntários foram seccionados longitudinalmente, e cultivados em meio DMEM segundo protocolo estabelecido por Ayres, para padronização de viabilidade e dosimetria das radiações induzindo melanogênese. Um dos fragmentos foi irradiado e o outro mantido ao abrigo da luz por 72h. Foram avaliados aspectos morfológicos e arquiteturais da histologia (H&E e Fontana-Masson) e por rt-PCR para comparação da expressão quantitativa de gene constitucional (GAPDH) entre as peles recém-coletadas e as cultivadas. Foram padronizadas as doses de radiação e tempo de cultura que promovessem viabilidade da amostra e aumento de 10% na intensidade de pigmentação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: FUNDAMENTALS: Melasma is chronic hypermelanosis, focal, acquired due to pathogenesis not fully understood, resulting from the functional and architectural alteration of melanocytes. Genetic predisposition, hormonal aspects and exposure to solar radiation are the elements most associated with the development of the disease and essential for understanding the pathophysiology. The relationship between exposure to solar radiation and worsening of the condition is well established, however, the independent effect of UVB, UVA, as well as the action of visible light (VL) are poorly studied. OBJECTIVES: Standardization of a primary cutaneous organoid culture model to study melanogenesis of skin with melasma and adjacent normal skin to irradiation with different wavelengths (UVB, UVA, VL). METHODS: Step 1: Skin samples from the retroauricular region (punch 3mm) from 10 volunteers were longitudinally sectioned and cultured in DMEM medium according to the protocol established by Ayres, for viability standardization and radiation dosimetry inducing melanogenesis. One of the fragments was irradiated and the other kept in the dark for 72h. Morphological and architectural aspects of histology (H&E and Fontana-Masson) and rt-PCR were evaluated for comparison of quantitative constitutional gene expression (GAPDH) between newly collected and cultured skins. Radiation doses and culture time that promoted sample viability and a 10% increase in basal layer pigmentation intensity were standardized... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UNESP/oai:www.athena.biblioteca.unesp.br:UEP01-000926061 |
| Date | January 2019 |
| Creators | Alcantara, Giovana Piteri |
| Contributors | Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Faculdade de Medicina. |
| Publisher | Botucatu, |
| Source Sets | Universidade Estadual Paulista |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | computer file |
| Relation | Sistema requerido: Adobe Acrobat Reader |
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