Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Alternatives have been proposed to accelerate the tissue repair process, foremost among them
the use of stem cells (SC). For implantation of these cells are needed biodegradable carriers, which
allow better adhesion, provide a microenvironment suitable for adaptation and cell implantation site.
The Platelet Rich Plasma (PRP) is an autologous source and cost of growth factors (GFs), which
concentrates platelets and GFs released by them, accelerating bone formation and improving the
quality of newly formed bone. It may be a carrier suitable for implantation of SC, therefore, not induce
immune responses, and contains factors that induce osteoblastic differentiation. The goal of this work
was to evaluate by clinical, biochemical, radiological and histological findings, the use of PRP
associated with mononuclear stem cells (MoSC) in the cortical bone healing in dogs. Also proposed to
elaborate a PRP protocol efficient in dogs by means of a small volume of whole blood standardize the
use of two force plates simultaneously in orthostatic pattern, and comparing this kind with the use of a
platform. To evaluate the effectiveness of this association, was used 30 adult dogs, female, mixed
breed, weighing between 5 and 10 kg, separated by random draw in six treatments. Was made a failure
elliptical 1,0x0,4cm medial cortical diaphyseal tibia of each animal, being completed in accordance
with the proposed treatment: solution of sodium chloride 0,9% (G1), PRP (G2), the total fraction of
mononuclear cells TFMC originated of bone marrow (G3), stromal vascular fraction - SVF derived
of adipose tissue (G4), TFCM associated with PRP (G5) and SVF associated with PRP (G6). In the
preoperative period was collected blood for preparation laboratory protocol of PRP, bone marrow
collection and adipose tissue, and processing of fractions of MoSC. Were evaluated daily clinical
degrees of lameness, radiological, girth before, and biomechanics in the immediate postoperative
period, at 7, 14, 21, 30, 37 and 45 days, and biopsies at 15 and 45 days. In biopsy of 15 days, the
failure was enlarged to 1,5x0,4cm and treatment redone, which is currently regarded as the immediate
postoperative period in subsequent evaluations. The protocol of the PRP showed efficiency made,
focusing on average 7,29 ± 3,21 times the original number of platelets from whole blood, from 7,5 ml
of blood. The use of two force platforms simultaneously, was successful, without difference between
using one or two platforms. In the X-ray analysis and biomechanical G2, G3, G5 and G6 groups were
more effective in bone healing and support of the limb, followed by G4, and after G1. Histological
evaluation showed higher degree of advancement scar G5 and G6, G4 in sequence and finally G1.
Concluding that association MoSC and PRP is effective, being responsible for an early
neoangiogenesis, accelerated osteogenesis, with better quality of bone formation, osteoblast density
and intense. The groups G5 and G6 are the best adjuvant treatment of bone healing in dogs, followed
by G2, after G3, G4 then, and lastly G1. / Alternativas têm sido propostas para acelerar o processo reparativo tecidual, destacando-se entre
elas o uso das células-tronco (CT). Para o implante destas células são necessários carreadores
biodegradáveis, que permitem melhor adesão, fornecem um microambiente adequado, e favorecem a
adaptação celular no local de implantação. O Plasma rico em plaquetas (PRP) é uma fonte autógena e de
baixo custo de fatores de crescimento (FCs), que concentra as plaquetas e os FCs liberados por elas,
acelerando a formação óssea e melhorando a qualidade do osso neoformado. Pode ser um carreador
adequado para o implante das CT, pois, não induz resposta imune, além de conter fatores indutores da
diferenciação osteoblástica. O objetivo deste trabalho foi avaliar por estudos clínicos, biomecânicos,
radiográficos e histológicos, o uso do PRP associado às células-tronco mononucleares (CTMo) na
cicatrização óssea cortical em cães. Também se objetivou elaborar um protocolo de PRP eficiente em cães,
por meio de um pequeno volume de sangue total, padronizar o uso de duas plataformas de força,
simultaneamente, em padrão ortostático, nesta espécie e comparar com o uso de uma plataforma. Para
avaliar a efetividade dessa associação, foram utilizados 30 cães adultos, fêmeas, sem raça definida, pesando
entre 5 e 10kg, separados por sorteio aleatório em seis tratamentos. Foi confeccionada uma falha elíptica de
1,0x0,4cm na cortical medial diafisária da tíbia direita de cada animal, sendo preenchida de acordo com o
tratamento proposto: solução de cloreto de sódio a 0,9% (G1), PRP (G2), fração total das células
mononucleares - FTCM originadas da medula óssea (G3), fração vascular estromal - FVE derivada do
tecido adiposo (G4), FTCM associada ao PRP (G5) e FVE associada ao PRP (G6). No período préoperatório
foi realizada coleta de sangue, protocolo laboratorial para confecção do PRP, coleta de medula
óssea e tecido adiposo, e processamento das frações das CTMo. Realizou-se avaliação clínica diária, dos
graus de claudicação, radiográfica, perimetria da coxa antes, e biomecânica no pós-operatório imediato, aos
7, 14, 21, 30, 37 e 45 dias, e biópsias aos 15 e 45 dias. Na biópsia de 15 dias, a falha foi ampliada para
1,5x0,4cm e o tratamento refeito, sendo este momento considerado como o pós-operatório imediato nas
avaliações subsequentes. O protocolo de PRP confeccionado demonstrou eficiência, concentrando em
média, 7,29 ± 3,21 vezes o número inicial de plaquetas do sangue total, a partir de 7,5ml de sangue. O uso
de duas plataformas de força, simultaneamente, obteve sucesso, não havendo diferença entre usar uma ou
duas plataformas. Nas análises radiográficas e biomecânicas G2, G3, G5 e G6 foram os grupos mais
efetivos na cicatrização óssea e no apoio do membro operado, seguidos de G4, e após G1. Na avaliação
histológica e imuno-histoquímica observou-se maior grau de adiantamento cicatricial em G5 e G6, em
sequência G4 e por fim G1. Concluí-se que associação CTMo e PRP é eficiente, sendo responsável por
uma neoangiogênese precoce, osteogênese acelerada, com melhor qualidade do osso neoformado, e intensa
densidade osteoblástica. Os grupos G5 e G6 são os melhores tratamentos adjuvantes da cicatrização óssea
em cães, seguidos de G2, após G3, depois G4, e por último G1.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/4087 |
| Date | 15 May 2013 |
| Creators | Barbosa, Anna Laeticia da Trindade |
| Contributors | Schossler, Joao Eduardo Wallau, Raiser, Alceu Gaspar, Graça, Dominguita Luhers, Contesini, Emerson Antonio, Alievi, Marcelo Meller |
| Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, UFSM, BR, Medicina Veterinária |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 500500000007, 400, 300, 300, 300, 300, 300, 300, 5303a9a5-ca3e-4f3c-8118-8d300039b483, ed871f6f-58e3-4966-85b2-1ccdc25be6f8, d311a20a-b157-4f92-9073-f9b23bd9c8c2, 5b1f94f9-23f7-49df-a620-c35a152c9039, 89405996-c2ee-463e-9be7-963848707274, 4223358d-3ed4-4114-857e-8838253a92e8 |
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