La ocratoxina A (OTA) es una micotoxina producida por algunas variedades de hongos
capaces de contaminar productos agroindustriales como granos, cereales, hortalizas y
especias. Este metabolito es altamente tóxico y su ingestión trae consigo efectos
adversos, representando una gran amenaza para animales y humanos. Las autoridades
internacionales han establecido límites máximos permitidos para el consumo de esta
micotoxina, y por esta razón es importante contar con métodos de detección rápidos,
efectivos y aplicables al control de calidad en la industria de alimentos.
Entre las técnicas tradicionales de detección de micotoxinas se encuentran los métodos
basados en cromatografía líquida acoplada a detectores de masas en tándem (LCMS/
MS); sin embargo, son métodos costosos y poco accesibles. Por otro lado, existen
métodos basados en inmunoensayos (ELISA) pero no son muy robustos y cuentan con
tiempos de vida cortos. Una de las alternativas en el desarrollo de nuevos métodos de
detección es el uso de sensores basados en nanoestructuras de metales nobles, las
cuales cuentan con excelentes propiedades ópticas debido a la resonancia del plasmón
superficial localizado (LSPR). Además, la gran área superficial que presentan estos
materiales permite modificarlas químicamente en la superficie con un gran número de
moléculas, p.ej. con aptámeros que actúen como agentes de reconocimiento selectivo
a analitos de interés.
En este trabajo se realizó un procedimiento de modificación de microplacas NUNC®
Immobilizer Amino con oligonucleótidos como un aptámero selectivo a OTA y la hebra
complementaria a dicho aptámero, a fin de desarrollar un sistema alternativo de
detección de OTA, basado en el análisis colorimétrico con nanosensores aptaméricos.
El procedimiento también contempló la síntesis de nanoesferas de oro (AuNEs), seguido
por la modificación superficial con oligonucleótidos tiolados y su caracterización por
espectroscopía UV-Vis y microscopía electrónica. Posteriormente, se evaluaron
diferentes parámetros en la optimización del proceso de modificación de microplacas,
así como en la hibridación entre los oligonucléotidos presentes en la microplaca y los
acoplados a las AuNEs. Con las condiciones óptimas encontradas se realizaron pruebas
de concepto para detectar la presencia o ausencia de OTA en solución. El diseño de
este método pretende ser la base para la elaboración de un kit que potencialmente
facilite el análisis rutinario de control de calidad de alimentos, de manera que se pueda
contar rápido y económico en la detección de micotoxinas en alimentos.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:PUCP/oai:tesis.pucp.edu.pe:20.500.12404/19647 |
| Date | 10 July 2021 |
| Creators | Saldaña Ramos, Angeline Stefany |
| Contributors | Galarreta Asian, Betty Cristina |
| Publisher | Pontificia Universidad Católica del Perú, PE |
| Source Sets | Pontificia Universidad Católica del Perú |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | Pontificia Universidad Católica del Perú, Repositorio de Tesis - PUCP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess, Atribución-NoComercial-CompartirIgual 2.5 Perú, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/ |
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