La cécité ou la très grande malvoyance peut résulter de différentes pathologies comme les dystrophies rétiniennes héréditaires (DRH) caractérisées par la perte des photorécepteurs. Une des approches pour traiter les DRH est la thérapie génique spécifique, c’est à dire le remplacement du gène défectueux par un gène sain. Des études chez des modèles animaux de DRH ont démontré l’efficacité de la thérapie géniques spécifique, et conduit au lancement d’essais cliniques.Malgré des résultats encourageants, la thérapie génique spécifique n’est pas toujours applicable, en particulier quand la dégénérescence est trop avancée ou si le gène muté est inconnu. Pour traiter tous les cas de DRH, un nouvel axe de thérapie génique est envisagé : le transfert d’optogène.Cette stratégie consiste à réactiver la rétine devenue aveugle par l’expression de protéines photosensibles dans la rétine. Notre objectif est d'évaluer l'efficacité du transfert d'optogène chez un modèle canin naturellement déficient pour le gène Rpe65, provoquant une forme sévère de DRH proche de celles retrouvées chez l’homme. La stratégie thérapeutique retenue est : L'injection intravitréenne, après vitrectomie, d'un vecteur recombinant dérivé du virus adéno-associé de sérotype2 (rAAV2/2), portant le transgène optogénétique sous contrôle d'un promoteur fort et spécifique des tissus neuronaux : hSyn. Le but de ce projet est de transduire efficacement les cellules ganglionnaires rétiniennes d'un modèle canin déficient pour le gène Rpe65 et d'évaluer la photosensibilité des cellules transduites. / Inherited retinal diseases (IRD) affect about 2 million people worldwide, leading to severe visual impairment.Specific gene addition therapy is one of the most promising strategies to treat these patients. Howevermany of them are not eligible for specific gene therapy,such as.1) Patients with unknown deficient genes.2) Patients beyond the therapeutic window.3) Patients whose the deficient gene is too large forAAV encapsidation.4) Patients undergoing a dominant form of IRD.Therefore, the aim of this project is to develop analternative strategy, independent of the mutation and the retinal degeneration kinetic: the optogene transfer. In context of IRD, it will consist to convert survivingretinal ganglion cells into sensitive light cells followingthe transfer of ChR2 or Opn4 optogene. Several rodentmodels of IRD have been successfully treated usingthese optogenes. Nevertheless, this approach hasnever been evaluated in large animal models. The objective of our study will be to define the feasibility ofoptogene transfer to restore vision in blind patients by evaluating the safety and the efficacy of AAV-mediated gene transfer of ChR2, eNpHR or Opn4, after vitrectomy, in ganglion cells of a canine model of IRD, the Rpe65-deficient dog.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:theses.fr/2016NANT1001 |
| Date | 08 September 2016 |
| Creators | Ameline, Baptiste |
| Contributors | Nantes, Rolling, Fabienne |
| Source Sets | Dépôt national des thèses électroniques françaises |
| Language | French, English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation, Text |
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