Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Este trabalho descreve: 1) sÃntese quimioenzimÃtica de Ãsteres do cloranfenicol (1) e tianfenicol (2), utilizando lipases como fonte biocatalÃtica; 2) avaliaÃÃo do potencial atitumoral de fungos marinhos isolados da ascÃdia Eudistoma vannamei. Na primeira parte, realizou-se a sÃntese enzimÃtica de dois derivados monoacilados do cloranfenicol (1), atravÃs de reaÃÃes de hidrÃlise de derivados diacilados, e oito derivados monoacilados do tianfenicol (2), pela acilaÃÃo e hidrÃlise enzimÃtica do tianfenicol e derivados diacilados, respectivamente. Os seguintes parÃmetros foram variados: enzima, solvente, temperatura, pH e proporÃÃo entre solvente e agente hidrolÃtico e, na hidrÃlise enzimÃtica dos derivados de cloranfenicol diacilados, os melhores resultados foram com a mistura de CH3CN:tampÃo fosfato (pH 7) na proporÃÃo de 20:80, CAL-B como biocatalisador, temperatura de 20 ÂC, agitaÃÃo de 250 rpm e tempo reacional de 24 h. A reaÃÃo de acilaÃÃo enzimÃtica do tianfenicol (2), utilizando CAL-B como biocatalisador e Ãsteres vinÃlicos como doadores de grupos acila, se mostrou bastante eficiente, com altos Ãndices de conversÃo e seletividade. Os processos forneceram unicamente os produtos de acilaÃÃo da hidroxila menos impedida (3â-OH). A eficiÃncia da enzima CAL-B reciclada na reaÃÃo de acilaÃÃo do tianfenicol (2) foi investigada, sendo possÃvel concluir que esta se mantÃm ativa durante os cinco processos reacionais testados. A hidrÃlise enzimÃtica dos derivados diacilados do tianfenicol forneceu, majoritariamente, os produtos de hidrÃlise na posiÃÃo 3. Na segunda parte do trabalho, foram isoladas 11 cepas fÃngicas (EV1 a EV11) da ascÃdia E. vannamei, as quais foram cultivadas em meio lÃquido BD (batata-dextrose) com objetivo de realizar um estudo bioguiado atravÃs da avaliaÃÃo da atividade citotÃxica de seus extratos e fraÃÃes. Foram ensaiados os extratos acetoetÃlico do meio lÃquido e metanÃlico do micÃlio, previamente separados. Os extratos mais ativos foram os oriundos de EV10 e EV11, os quais foram identificados como Aspergillus sp. por anÃlise molecular. O fungo EV10 foi cultivado em grande escala para fracionamento bioguiado e isolamento dos metabÃlitos secundÃrios bioativos. Foi possÃvel isolar quatro micotoxinas: meleÃna, cis-4-hidroximeleÃna, trans-4-hidroximeleÃna e Ãcido penicÃlico, dentre as quais, somente o Ãcido penicÃlico foi identificado como responsÃvel pela atividade do extrato. / This work describes: 1) chemoenzymatic synthesis of chloramphenicol (1) and thiamphenicol (2) esters, using lipases as biocatalyst source; 2) investigation
of the antitumor potential of fungi isolated from the marine ascidian Eudistoma vannamei. In the first part, it was carried out the enzymatic synthesis of two monoacyl derivatives of chloramphenicol (1), through the hydrolysis of the diacyl derivatives, and eight
monoacyl derivatives of thiamphenicol (2), by the enzymatic acylation and hydrolysis of thiamphenicol and diacyl derivatives, respectively. The following p
arameters were varied: enzyme, solvent, temperature, pH and proportion between solvent and agent
hydrolytic, and in enzymatic hydrolysis of the diacyl derivatives of chloramphenicol, the best results were reached when using a mixture of CH3CN: phosphate buffer (pH 7) in the proportion 20:80, CAL-B as biocatalyst, temperature of 20 Â C, 250 rpm
and reaction time of 24 h. The enzymatic acylation of thiamphenicol (2), using CAL-B as
biocatalyst and vinyl esters as acyl donor groups, was very efficient, with high conversion and selectivity. The processes provided only products of the ac
ylation of the less hindered hydroxyl group (3'-OH). The efficiency of the recycled CAL-B in the
acylation of thiamphenicol (2) was investigated, being possible to conclude that its activity was maintained during the five tested reactions. Enzymatic hydrolysis of diacylated derivatives of thiamphenicol, provided mostly the hydrolysis products in position 3. In the second part of this work, we isolated 11 fungal strains (EV1 to EV11) associated to the ascidian E. vannamei, which were cultivated in liquid BD (potato dextrose) in order to conduct a bioguided study by evaluating the cytotoxic activity of their extracts and fractions. The ethylacetate extracts of the liquid medium and methanol extracts from the mycelium, previously separate, were assayed and the most active extracts were those from EV10 and EV11, which were identified as Aspergillus sp. by molecular analysis. EV10 was grown on a larger scale allowing the bioguided fractionation and isolation of bioactive secondary metabolites. It was possible to isolate four mycotoxins: mellein, cis-4-hydroxymellein, trans-4-hydroxymellein and penicillic acid, among which only the later compound was identified as responsible for the activity of the extract.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:4740 |
| Date | 24 October 2011 |
| Creators | Tasso Gabriel Coelho Montenegro |
| Contributors | Maria da ConceiÃÃo Ferreira de Oliveira, OtÃlia DeusdÃnia Loiola Pessoa, Josà Nunes da Silva Junior, Leandro Helgueira de Andrade, Andrà Luiz Meleiro Porto |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em QuÃmica, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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