In this dissertation the investigation of potential applications of hamster polyomavirus (HaPyV) major capsid protein VP1 based chimeric virus-like particles (VLPs) harboring CTL epitopes for anticancer vaccine development is presented. The objective of this study was to investigate the potential of recombinant HaPyV VP1 based VLPs for anticancer vaccine generation in model systems, including investigation of VP1 applicability for heterologous CTL epitopes insertions, VLPs assembly and ability to induce insert specific immune response in vivo. HaPyV VP1 VLPs carrying CLT epitopes derived from different proteins were generated, most suitable positions for insertion into VP1 protein were selected, the ways to improve assembly and yield of the chimeric VLPs were determined and new VLPs purification procedure was created allowing to purify VLPs cheaper, faster and more efficiently. HaPyV VP1 based VLPs ability to induce CTL immune response in vivo was evaluated for the first time. It was demonstrated that model chimeric VLPs were able to stimulate antigen specific CTL cells in vitro and in vivo, induced insert specific humoral and CTL immune response in vivo and protected mice from insert specific virus infection and antigen-specific tumor growth. Presented data confirmed that HaPyV protein VP1 is universal carrier for CTL epitopes, capable to tolerate insertions, to form VLPs and to induce effective, long lasting immune response against inserted antigens in vivo. / Disertacijoje yra aprašomas perspektyvų panaudoti žiurkėno poliomos viruso (HaPyV) pagrindinio struktūrinio baltymo VP1 formuojamas į virusus panašias daleles priešvėžinių vakcinų kūrimui tyrimas. Pagrindinis disertacijos darbo tikslas buvo modelinėse sistemose parodyti rekombinantinių HaPyV VP1 baltymų formuojamų į virusus panašių dalelių panaudojimo priešvėžinių vakcinų kūrimui galimybes, įvertinant svetimų CTL epitopų įterpimo į VP1 baltymą toleravimą, VPD formavimosi efektyvumą bei sukeltą įterptam antigenui specifinį imuninį atsaką. Disertacijoje atlikta tyrimo srities literatūros apžvalga, smulkiai aprašomi darbe naudoti metodai, atlikti eksperimentai, pateikiami bei analizuojami gauti rezultatai. Darbe pirmą kartą buvo nuodugniai ištirtos HaPyV viruso VP1 baltymo formuojamų VPD savybės, parodytas jų tinkamumas būti CTL epitopų nešikliais, ištirtos įterpimui palankiausios VP1 baltymo vietos, išbandyti nauji VPD gavimo ir gryninimo būdai, pagerinantys chimerinių VPD formavimąsi bei išeigas. Panaudojant modelines chimerines VPD in vivo buvo ištirtas chimerinių HaPyV VP1 pagrindu sukonstruotų VPD sukeliamas humoralinis ir ląstelinis imuninis atsakas. Gauti rezultatai parodė, kad HaPyV VP1 baltymas yra vienas iš nedaugelio virusų struktūrinių baltymų, kurie ne tik formuoja VPD, bet pasižymi ir universaliomis baltymo – nešiklio savybėmis, o in vivo sukelia efektyvų, ilgalaikį, įterptam epitopui specifinį imuninį atsaką.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LABT_ETD/oai:elaba.lt:LT-eLABa-0001:E.02~2011~D_20110621_164205-79199 |
| Date | 21 June 2011 |
| Creators | Mažeikė, Eglė |
| Contributors | Kirvelienė, Vida, Lubys, Arvydas, Mauricas, Mykolas, Bakienė, Elena, Slibinskas, Rimantas, Jakubauskas, Artūras, Ražanskienė, Aušra, Vilnius University |
| Publisher | Lithuanian Academic Libraries Network (LABT), Vilnius University |
| Source Sets | Lithuanian ETD submission system |
| Language | English |
| Detected Language | Unknown |
| Type | Doctoral thesis |
| Format | application/pdf |
| Source | http://vddb.laba.lt/obj/LT-eLABa-0001:E.02~2011~D_20110621_164205-79199 |
| Rights | Unrestricted |
Page generated in 0.0027 seconds