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Etudes des activités anti-adhérentielles et anti-bactériennes de la canneberge (Vaccinium macrocarpon) et de la propolis / Study of the anti-adherential and anti-bacterial effect of cranberryand propolis

L’infection urinaire (IU) est un problème majeur de Santé publique. La cystite aiguë touchant principalement les femmes est la plus fréquente des IU. La bactérie la plus fréquemment isolée au cours de ces IU est Escherichia coli. Une des particularités de la cystite est sa propension à récidiver. Le traitement préconisé pour ces infections est la prise d’antibiotiques, qui peut être fréquente en cas de cystites récidivantes. C’est dans ce contexte que de nouvelles stratégies doivent être développées afin de prévenir et traiter les IU récidivantes. Parmi ces différentes stratégies, l’utilisation de produits naturels tels que la canneberge (Vaccinium macrocarpon) apparaît comme prometteuse. En effet, des études précédentes ont montré que la canneberge a un effet négatif sur l’adhésion des bactéries aux cellules superficielles de l’épithélium vésical facilitant l’élimination des bactéries par le flux urinaire. Cette activité est portée par la proanthocyanidine de type A (PAC-A). D’autre part, une étude menée par notre équipe a montré que l’effet de la canneberge sur l’adhésion et la virulence de souches d’E. coli uropathogènes pouvait être potentialisé par l’ajout d’un autre composé naturel : la propolis. Depuis l’Antiquité ses propriétés anti-bactériennes sont reconnues et des études plus récentes ont démontré son impact sur des bactéries à Gram positif mais également sur deux bactéries à Gram négatif : E. coli et Pseudomonas aeruginosa. Ce travail de thèse a permis : i) de décrire l’impact de la canneberge, de la propolis et de leur association sur le transcriptome d’une souche clinique d’E. coli uropathogène (G50). Cette analyse transcriptomique a montré que la canneberge entrainait une sous-expression de gènes liés à l’adhésion, mais également de gènes liés à la mobilité et à la formation de biofilm. En revanche, la canneberge augmentait l’expression des gènes liés au métabolisme du fer ainsi qu’à la réponse au stress. Ces effets étaient potentialisés par l’ajout de la propolis. En parallèle, des tests phénotypiques menés sur une collection de souches d’E. coli uropathogènes sur la mobilité et la formation de biofilm ont confirmé les résultats précédents ; ii) de développer un test, basé sur les précédents travaux de transcriptomique, permettant une évaluation standardisée de l’effet de la PAC-A sur E. coli, indépendamment de sa concentration car il n’existe pas de techniques standardisées pour doser cette molécule. C’est ainsi que 4 gènes (tsr, ftnA, fecB, feoB) ont été sélectionnés, le suivi de leur expression permettant une mesure de l’activité anti-bactérienne de la canneberge; iii) de mesurer l’effet potentialisateur de la propolis sur l’activité des antibiotiques utilisés dans le traitement des IU. C’est ainsi qu’il a été montré que l’ajout de la propolis permettait d’augmenter l’activité bactéricide des antibiotiques testés et de diminuer les concentrations minimales inhibitrices de ces antibiotiques. / Urinary Tract Infection (UTI) is a major problem of public health. Acute cystitis which touches mostly women is the most common form of UTI. The bacteria which is mostly isolated in an UTI is Escherichia coli. A particularity of cystitis is to come back. In this context news strategies have to be developed to prevent and cure recurrent UTI. One of these strategies is the utilization of natural products like the cranberry (Vaccinium macrocarpon) which is promising. Indeed, previous studies showed the negative impact of cranberry on the adhesion of bacteria on the superficial cells of bladder which help the elimination of bacteria by the urinary flux. This activity is carried by the type A proanthocyanidin (PAC-A). Moreover, a study lead by our team has demonstrated an improvement of the activity of cranberry on the adhesion and the virulence of uropathogenic E. coli (UPEC) by another natural product: the propolis. Since Antiquity its antibacterial activities have been recognize and more recent studies have demonstrated its impact of Gram positive bacteria and also on two Gram negative bacteria: E. coli and Pseudomonas aeruginosa. This thesis has allowed for: i) the description of the impact of cranberry, propolis and its association on the transcriptome of a clinical strain of UPEC (G50). This transcriptomic analyze have shown that the cranberry down regulated genes linked to the adhesion and also genes linked to the motility and biofilm formation. However the cranberry up regulated genes linked to the iron metabolism and the stress response. These effects are improve by the addition of propolis. Concurrently phenotypics tests have been conducted on a collection of UPEC on the motility and the biofilm formation and they confirmed the previous results; ii) the development of a test, based on our transcriptomic results, enable to performed a standardized evaluation of the impact of PAC-A on E. coli, independently of its concentration. Indeed, this molecule cannot be measure in a standard way. Four genes have been selected (tsr, ftnA, fecB, feoB), the monitoring of their expression allow us to measure the anti-bacterial efficiency of the cranberry; iii) the measurement of the potential effect of the propolis of the antibiotic’s activities used to treat UTIs. Thus it have been observed that the addition of propolis improve the bactericide activity of the antibiotics tested and reduces the minimal inhibitory concentration of these antibiotics.

Identiferoai:union.ndltd.org:theses.fr/2017MONTT122
Date08 November 2017
CreatorsRanfaing, Jérémy
ContributorsMontpellier, Sotto, Albert
Source SetsDépôt national des thèses électroniques françaises
LanguageFrench, English
Detected LanguageFrench
TypeElectronic Thesis or Dissertation, Text

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