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Previous issue date: 2013-05-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Accidents caused by freshwater stingrays are characterized by intense pain and pathological changes at the lesion site, which include edema, erythema and, in most cases, necrosis. In this study, mucus and tissue extracts from the dorsal region and sting of freshwater stingrays Potamotrygon motoro and Plesiotrygon iwamae were analyzed by electrophoresis on SDS-PAGE and zymography. The myotoxic activity (local and systemic) induced by extracts in murine model was evaluated by morphometric analysis and enzimatic activity of the phospholipase A2 (indirect hemolysis) in agarose gel. P. motorosting extract showed a diffuse band with 10 kDa, several between 58 and 27 kDa, and proteolytic components above 58 kDa, while the dorsal region extract showed a strong and diffuse band around 41 kDa and a proteolytic component with 6 kDa. P. iwamae showed, in all samples, a diffuse and intense band with 15 kDa and proteolytic components around 6 and 40 kDa. Doses of 140 μg of P. iwamae protein extracts (sting and dorsal region) induced indirect hemolysis after 24 and 48 hours, but the halo diameter was below 10 mm (minimum value set for the technical), showing a weak phospholipase A2activity. Coagulative necrosis of the muscle tissue, muscle fiber regeneration and inflammatory infiltrates, including neutrophils, macrophages and a reduced number of eosinophils and lymphocytes were observed 24 hours after injection of 400 μg of P. motoro and P. iwamae mucus extracts in mice gastrocnemius muscle. These results were also observed, in a lower proportion, in the gastrocnemius muscles of the contralateral legs, showing that extracts of both species were able to induce a systemic rhabdomyolysis when tested in BALB/c mice. / Acidentes por arraias de água doce são caracterizados por dor intensa e alterações patológicas no local da lesão, que incluem edema, eritema e, na maioria dos casos, necrose. Nesta pesquisa, os extratos de muco e tecido do dorso e do ferrão das arraias Plesiotrygon iwamae e Potamotrygon motoro foram analisados por eletroforese em SDS-PAGE e por zimografia. A atividade miotóxica (local e sistêmica) induzida pelos extratos, em modelo murino, foi avaliada por histopatologia e a atividade da enzima fosfolipase A2 (hemólise indireta), em gel de agarose. O extrato do ferrão de P. motoro apresentou uma banda difusa de 10 kDa, várias entre 58 e 27 kDa e componentes proteolíticos acima de 58 kDa, enquanto que o extrato do dorso apresentou uma banda forte difusa com cerca de 41 kDa e um componente proteolítico de 6 kDa. Em P. iwamae, todas as amostras apresentaram uma banda intensa e difusa de 15 kDa e componentes proteolíticos de 6 e 40 kDa. As doses de 140 μg de proteína dos extratos de P. iwamae induziram hemólise indireta nos intervalos de tempo de 24 e 48 horas, porém, não formaram o halo de 10 mm de diâmetro (valor mínimo definido para a técnica), demonstrando uma fraca atividade de fosfolipase A2. Necrose coagulativa do tecido muscular, regeneração das fibras musculares e presença de infiltrados inflamatórios, incluindo neutrófilos, macrófagos, e um número reduzido de eosinófilos e linfócitos foram observados 24 horas após a injeção da dose de 400 μg dos extratos de muco do dorso e do ferrão das arraias P. motoro e P. iwamae no músculo gastrocnêmio dos camundongos. Tais resultados também foram observados, em menor volume, nos músculos gastrocnêmios das patas contralaterais, demonstrando que os extratos das duas espécies foram capazes de induzir a uma rabdomiólise sistêmica quando testados em camundongos BALB/c.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:http://localhost:tede/2622 |
| Date | 24 May 2013 |
| Creators | Lameiras, Juliana Luiza Varjão |
| Contributors | Duncan, Wallice Luiz Paxiúba, Santos, Maria Cristina dos |
| Publisher | Universidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-graduação em Imunologia Básica e Aplicada, UFAM, BR, Instituto de Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM, instname:Universidade Federal do Amazonas, instacron:UFAM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 8851295382702565619, 600, 600, 1984485651082134923 |
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