Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / La odontología adhesiva se fundamenta en la infiltración de resinas
hidrofílicas en la matriz orgánica colágena intertubular para la formación de la
zona híbrida y de tags de resina; sin embargo, la interacción entre las Igs de los
túbulos dentinarios con los biomateriales de adhesión no había sido investigada.
Este estudio se diseñó para comprobar las hipótesis que existe asociación
morfológica de las inmunoglobulinas intratubulares con la formación de tags de resina durante el proceso de adhesión y para evaluar la interacción bioquímica de las Igs con los agentes promotores de adhesión.
Para probar la primera hipótesis se utilizaron 20 premolares y/o terceros molares permanentes humanos sanos, cuyos esmalte oclusal y cuspídeo y dentina del manto fueron eliminados. A la superficie dentinaria expuesta se le realizó una muesca vestíbulo-lingual para dividir los especímenes en dos mitades
equivalentes. En ambos segmentos se realizó una técnica adhesiva con grabado
total empleando sistemas adhesivos de “grabado y lavado”. En los segmentos
mesiales se utilizó el sistema Adper Singlebond (3M) y en los segmentos distales
Te-Econom (Ivoclar Vivadent,), según las especificaciones de los fabricantes.
Ambos adhesivos fueron marcados con TRITC. Las muestras se procesadron
para la obtención de cortes seriados de 6µm, sobre los cuales se realizó una técnica de inmunoperoxidasa y de inmunofluorescencia indirecta. En ambas
técnicas los cortes se incubadron en un anticuerpo policlonal anti-IgG humana
(DAKO), la reacción antígeno-anticuerpo se evidenció con el sistema biotinaestreptavidina-peroxidasa-diaminobenzidina
(Histostain-Zymed)
en la técnica
inmunoperoxida
y con un anticuerpo
secundario
especie específico
conjugado con
FITC en la técnica de inmunofluorescencia indirecta.
En ambas técnicas se detectó una distribución de las Igs en el interior de los túbulos dentinarios como estructuras tubulares y/o filamentosas. En los
segmentos hibridizados con el sistema Te-Econom las Igs se encontraron
incluidas en los tags de resina. Se observó un aumento de la intensidad de la
inmunorreacción en los túbulos dentinarios adyacentes a la zona híbrida en
comparación con la intensidad de la reacción de las Igs intratubulares de zonas más profundas. En los segmentos hibridizados con el sistema Singlebond las Igs
formaron una banda periférica alrededor de los tags y no presentan un aumento
de la inmunorreacción respecto a las de zonas más profundas.
Por otra parte, para probar la segunda hipótesis, se diluyó un concentrado
de inmunoglobulinas (Ig Vena, Kedrion SpA) hasta dejar la concentración
encontrada en el fluido dentinario. Se colocaron alícuotas de 1µl de la dilución
sobre papel de acetato de celulosa que fue incubado en solución acuosa de
HEMA (MERK) al 40%, para luego ser sumergidos en anticuerpo primario
policlonal anti IgG humana (DAKO.) La reacción antígeno-anticuerpo se evidenció
utilizando el sistema biotina-estreptavidina-peroxidasa-diaminobenzidina.
En los dot inmunoblots se detectó una inmunorreacción positiva en los filtrosde acetato de celulosa con alícuotas de IgG incubadas en HEMA.
Las observaciones de este estudio nos permiten sugerir que la asociación
morfológica de las Igs intratubulares con la formación de los tags de resina es diferente para los dos sistemas adhesivos, de igual estrategia de adhesión, pero
distinta composición.
La evidencia morfológica sugiere que sólo Te-Econom podría interactuar
bioquímicamente con las Igs intratubulares, procudiendo una precipitación de ellas
y su incorporación en los tags de resina. Por otro lado, el componente del
producto que podría provocar tal efecto no corresponde al HEMA, dado que
ambos productos lo utilizan como agente promotor de adhesión y las
características estructurales entre ambos productos es completamente distinta.
Este dato es sustentado por el hecho que en los dot inmunoblots se detectó la
ausencia de interacción entre el HEMA y las Igs.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/138871 |
| Date | January 2007 |
| Creators | Fernández Vega, Gabriela Monserrat |
| Contributors | Oyarzún Droguett, Alejandro, Facultad de Odontología, Departamento de Ciencias Físicas y Químicas |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
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