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Anticoagulant Activity of Sulfated galactans from red seaweeds of the genus Halymenia C. Agardh (Gigartinales, Rhodophyta) and its Effect Immunostimulant in marine shrimp Litopenaeus vannamei (Boone, 1931). / Atividade Anticoagulante de Galactanas Sulfatadas de Algas Marinhas Vermelhas do GÃnero Halymenia C. Agardh (Gigartinales, Rhodophyta) e seu Efeito Imunoestimulante no CamarÃo Marinho Litopenaeus vannamei (Boone, 1931)

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / Many substances have been shown to possess anticoagulant and
immunostimulant activities, including sulfated polysaccharides (SP) of marine
algae. They also exhibit antithrombotic and antiviral activities. It is important to
describe new substances capable of preventing known adverse effects of
heparin such as hemorrhages and thrombocytopenia. Moreover, the use of
immunostimulants can also lessen cultivated aquatic organism stress. The aim
of this work was to evaluate both the anticoagulant activity of sulfated galactans
present in two species of red marine seaweed belonging to genus Halymenia
and their immunostimulant effects on white Pacific shrimp Litopenaeus
vannamei. SP were extracted from marine seaweed collected in Praia de
Fleixeiras-CE. Following the extraction, crude extracts were fractioned in DEAEcellulose
column and fractions were eluted with different concentrations of NaCl
solution. Fraction purification grade was evaluated by electrophoresis.
Anticoagulant activity was analyzed by aPTTâs test using rabbit plasma and the
clotting time was measured in a coagulometer. Three different amount of SP
(0.5 and 1.5 μg.L-1 and 1.0 mg.L-1) were used twice a day (9 and 17h) to
evaluate immunostimulant activity on L. vannamei through immersion baths,
after changing tank water and before feeding the animals. The control group
was maintained without SP addition. The experiment lasted 20 days. Shrimps
were treated by immersion in SP for the first 15 days, and in the last 5 days they
were submitted to stress when no water was renewed. There was no significant
difference on mortality among the treatments. After the stress, the mortality of
shrimps treated with 1.0 mg.L-1 was lower than the others (control group, 0.5
and 1.5 μg.L-1). Anticoagulant activity was detected in fractions obtained from H.
pseudofloresia, the highest being in that eluted with 1.25 M NaCl from the first
extraction procedure. Thus, it was possible to obtain SP from red marine
seaweed H. pseudofloresia which showed higher anticoagulant activity than
heparin and was capable of lowering mortality of L. vannamei under stress
conditions. / Muitos compostos tÃm sido descritos como anticoagulantese
imunoestimulantes, dentre essas os polissacarÃdeos sulfatados (PS) de algas
marinhas que tambÃm sÃo conhecidos por apresentar outras atividades
biolÃgicas, tais como antitrombÃtica e antiviral. A descoberta de novas drogas
anticoagulantes à importante para prevenir os efeitos adversos do uso da
heparina, como hemorragias e trombocitopenia. AlÃm disso, o uso de
imunoestimulantes tambÃm pode reduzir o impacto do estresse no cultivo
intensivo de organismos aquÃticos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a
atividade anticoagulante de galactanas sulfatadas de duas espÃcies de algas
marinhas vermelhas do gÃnero Halymenia e o seu efeito imunoestimulante no
camarÃo branco Litopenaeus vannamei. Os PS foram extraÃdos, atravÃs de
digestÃo enzimÃtica, a partir de algas marinhas coletadas na Praia de
Fleixeiras/CE. Em seguida, os extratos brutos foram fracionados em coluna de
DEAE-celulose, sendo as fraÃÃes eluÃdas com soluÃÃes de diferentes
concentraÃÃes de NaCl e o grau de purificaÃÃo analisado por eletroforese. A
atividade anticoagulante das fraÃÃes foi avaliada pelo teste do aPTT, utilizando
plasma de coelho citratado, sendo o tempo de coagulaÃÃo registrado em um
coagulÃmetro. Para avaliar efeito imunoestimulante, trÃs doses diferentes de
PS foram administradas, atravÃs de banhos de imersÃo, no camarÃo L.
vannamei. Os tratamentos, com trÃs repetiÃÃes cada, foram 0,5 μg.L-1; 1,5
μg.L-1 e 1,0 mg.L-1, e um controle, sem polissacarÃdeos. O experimento teve
duraÃÃo de 20 dias, dos quais 15 dias foram para a aplicaÃÃo das soluÃÃes de
PS e 5 dias de induÃÃo de estresse, atravÃs da ausÃncia de renovaÃÃo de
Ãgua do cultivo. A administraÃÃo das doses foi realizada, duas vezes por dia
(09:00 e 17:00 h), apÃs as trocas de Ãgua e antes da alimentaÃÃo doa animais.
Depois de 15 dias de imersÃo, nÃo houve diferenÃas significativas entre as
taxas de mortalidade dos tratamentos. Entretanto, depois do perÃodo do
estresse, o tratamento com 1,0 mg.L-1 apresentou uma mortalidade
significativamente menor do que as observadas nos tratamentos s/PS e 0,5
μg.L-1. Com relaÃÃo à atividadeanticoagulante, as fraÃÃes obtidas da espÃcie
H. pseudofloresia apresentaram uma maior atividade, sendo a mais ativa
aquela eluÃda com 1,25 Mde NaCl da coluna de troca iÃnica, obtida da 1Â
extraÃÃo. Assim, com a realizaÃÃo deste trabalho, foi possÃvel obter PS da alga
marinha vermelha H. pseudofloresia com atividade anticoagulante superior Ã
heparina e capaz de reduzir a mortalidade do camarÃo L. vannamei submetidos
à condiÃÃes de estresse.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:472
Date17 November 2006
CreatorsJosà AriÃvilo Gurgel Rodrigues
ContributorsWladimir Ronald Lobo Farias, Silvana Saker Sampaio, Paulo AntÃnio de Souza MourÃo
PublisherUniversidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Engenharia de Pesca, UFC, BR
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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