Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción. Existen múltiples razones por las que a lo largo de la vida de un
individuo diferentes cantidades de tejido óseo pueden perderse y generar un
defecto. Cuando este defecto es mayor a cierto tamaño, el organismo no es
capaz de regenerarlo y puede requerir asistencia externa. El tratamiento más
frecuente para los defectos óseos es el autoinjerto, que presenta desventajas y
limitaciones en su aplicación, al igual que otras alternativas de tratamiento. La
Ingeniería Tisular Ósea (ITO) tiene como objetivo la regeneración de tejidos
perdidos que conserven las condiciones morfológicas y fisiológicas del tejido
original. Los tres pilares de la ITO son células madre, partículas bioactivas y
andamios o scaffolds. En los últimos años, andamios de poliuretano (PU)
biodegradable y partículas cerámicas de vidrio bioactivo han mostrado
resultados promisorios de viabilidad y diferenciación osteogénica en búsqueda
de una combinación que pueda ser aplicada en regeneración ósea in vivo, con
células madre mesenquimales. En el último tiempo ha sido demostrado que el
manejo a nanoescala de estos materiales da mejores resultados que las
actuales alternativas en tamaño micrométrico, sin embargo, la evaluación de la
viabilidad, comportamiento de adhesión y diferenciación osteogénica de células
madre mesenquimales de pulpa dental en estos materiales no ha sido
estudiada. .
Objetivo. El objetivo de este trabajo es evaluar en forma preliminar la
citocompatibilidad de bionanocompósitos (BNC) de PU cargados con
nanopartículas de vidrio bioactivo (nBG), y de su capacidad de diferenciación
osteogénica de células madre de la pulpa dental (DPSCs).
Material y métodos. Se cultivaron DPSCs de terceros molares incluidos y
semi-incluidos, en andamios nanocompósitos de poliuretano (PU) cargados con
nanopartículas de nBG, y se evaluó su respuesta celular mediante ensayos de
viabilidad cuantitativo (MTS) y cualitativo (AO/PI), adhesión a través de
microscopía electrónica de barrido, y el grado de diferenciación osteogénica
mediante ensayo cuantitativo (ALP) y cualitativo (NBT/BCIP), que miden el
grado de actividad de la enzima fosfatasa alcalina (ALP).
Resultados. Andamios nanocompósitos de PU no disminuyeron la viabilidad
de DPSCs cultivadas en ellos, medida a diferentes tiempos por MTS. A través
del ensayo de AO/PI se observó que DPSCs cultivadas en PU nBG 5%
presentó una levemente mayor densidad de células que los otros andamios. Se
observó que el comportamiento de adhesión de DPSCs en andamios
nanocompósitos fue más íntimo que el de DPSCs en andamios sin
nanopartículas. Los ensayos de diferenciación muestran que la adición de
nanopartículas a andamios de PU acelera y aumenta el proceso de
diferenciación osteogénica de células madre de la pulpa dental.
Conclusiones: Andamios nanocompósitos de poliuretano cargados con
nanopartículas de vidrio bioactivo son citocompatibles, mejoran la adhesión
celular y presentan capacidad para acelerar la diferenciación osteogénica in
vitro de células madre de la pulpa dental. Estos materiales aparecen como una
alternativa promisoria para su futuro estudio como constructo bioactivo en ITO,
especialmente en la reducción de tiempos de tratamiento en regeneración
ósea. / Adscrito a Proyecto FONDECYT 1130342
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/147246 |
| Date | January 2016 |
| Creators | Morelli Becerra, Emmanuel Gregorio |
| Contributors | Covarrubias Gallardo, Cristián |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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