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Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / As leishmanioses constituem um conjunto de doenças negligenciadas que afetam cerca
de 12 milhões de indivíduos em 98 países. Os medicamentos utilizados no controle da
infecção estão associados à baixa eficácia, alta toxicidade, dificuldade de administração,
altos custos e crescente resistência. A procura por novas alternativas de tratamento é,
portanto, uma prioridade. Este trabalho tem como objetivo avaliar a atividade
leishmanicida de novas hidroxietilpiperazinas sintéticas e de Momordica charantia
(Cucurbitaceae). Uma série de oito hidroxietilpiperazinas foi sintetizada e testada, a que
demonstrou ser mais ativa e com menor citotoxidade, PMIC4, foi selecionada.
Promastigotas de Leishmania amazonensis foram cultivadas em diferentes
concentrações da PMIC4, que inibiu acentuadamente a multiplicação do parasito, com
IC50 de 11,6 μM. Em amastigotas, os resultados mostraram que macrófagos tratados
com 20 μM de PMIC4 apresentaram uma redução de 82% nos níveis de infecção, com
IC50 de 1,8 μM. Uma vez que hidroxietilpiperazinas são utilizadas como precursores na
síntese dos inibidores de protease do HIV, foram realizados ensaios para detectar se a
PMIC4 seria capaz de inibir a atividade de aspártico proteases em promastigotas de L.
amazonensis. Concentrações de até 200 μM de PMIC4 não foram capazes de inibir esta
atividade enzimática. Para avaliar se houve diferença na composição dos esteróis de
membrana entre L. amazonensis tratadas com a PMIC4 e não tratadas, os lipídeos
neutros foram analisados por cromatografia de camada fina. Foi possível notar uma
diferença significativa entre os grupos tratados e o grupo controle. Para avaliar o efeito
desta hidroxietilpiperazina no controle da infecção por L. amazonensis em
camundongos BALB/c, os animais foram tratados com a PMIC4, que mostrou possuir
atividade leishmanicida in vivo por via oral. Paralelamente, também foi demonstrada a
atividade leishmanicida de frações de Momordica charantia em promastigotas e
amastigotas intracelulares de L. amazonensis. Ao longo do trabalho, foi realizado o
fracionamento do extrato bruto das partes aéreas da planta, guiado pela atividade
leishmanicida, até a obtenção de três frações semi-purificadas ativas. Em amastigotas
intracelulares, as frações ativas MSØAc e F7 apresentaram IC50 de 1,69 μg/mL e 1,08
μg/mL, respectivamente. Este é o primeiro relato tanto da atividade de uma
hidroxietilpiperazina quanto de Momordica charantia contra Leishmania amazonensis.
Os extratos, frações e substâncias aqui apresentados podem ser considerados candidatos
potenciais para o desenvolvimento de novos fitoterápicos e/ou quimioterápicos contra a
leishmaniose cutânea. / Leishmaniasis is a group of neglected diseases that affect approximately 12 million
people in 98 countries. The drugs used to control the disease are associated with low
efficacy, high toxicity, difficulties of administration, high costs and increasing
resistance. The search for new alternatives of treatment is a priority. This study aims to
evaluate the leishmanicidal activity of new synthetic hidroxyethylpiperazines and of
Momordica charantia (Cucurbitaceae). A series of eight hidroxyethylpiperazines was
synthesized and the PMIC4 showed to be more active and less cytotoxic. Leishmania
amazonensis promastigotes were cultivated in different concentrations of PMIC4, which
strongly inhibited the multiplication of the parasite, with IC50 of 11.6 μM. In
amastigotes, the results demonstrated that macrophages treated with 20 μM of PMIC4
presented 82% reduction in infection levels, with IC50 of 1.8 μM. Once
hidroxyethylpiperazines are used as precursors in the synthesis of protease inhibitors of
HIV, we tested whether the PMIC4 could inhibit the activity of aspartic proteases in
promastigotes of L. amazonensis. Concentrations up to 200 μM of PMIC4 were not able
to inhibit this enzyme activity. To determine differences in the composition of
membrane sterols between L. amazonensis treated with PMIC4 and untreated, the
neutral lipids were analyzed by thin layer chromatography. It was possible to observe a
significant difference between treated and control groups. To evaluate the effect of this
hidroxyethylpiperazine in controlling infection by L. amazonensis in BALB/c mice,
animals were treated with PMIC4, which showed in vivo leishmanicidal activity orally.
Moreover, we also demonstrated the leishmanicidal activity of fractions of Momordica
charantia in promastigotes and intracellular amastigotes of L. amazonensis. Throughout
the work, we performed the fractionation of crude extract of aerial parts of the plant,
guided by the leishmanicidal activity until we get three very active fractions. In
intracellular amastigotes, the active fractions MSØAc and F7 showed IC50 of 1,69
μg/mL and 1,08 μg/mL, respectively. This is the first report of the activity of
hidroxyethylpiperazines and Momordica charantia against Leishmania amazonensis.
The extracts, fractions and substances presented here can be considered potential
candidates for the development of new phytotherapy and/or chemotherapy against
cutaneous leishmaniasis.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/6941 |
| Date | January 2011 |
| Creators | Vasconcelos, Mariela Ferreira de |
| Contributors | Levy, Claudia Masini d'Ávila, Pinto, Eduardo Fonseca, Guedes, Herbert Leonel de Matos, Amaral, Elmo Eduardo de Almeida, Silva, Silvia Amaral Gonçalves da, Santos, Eduardo Caio Torres dos |
| Publisher | Instituto Oswaldo Cruz |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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