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Previous issue date: 2015-02-23 / CNPq / A esquistossomose é uma doença endêmica distribuída em regiões tropicais e subtropicais, que pode ser controlada através do molusco Biomphalaria glabrata. O objetivo desde trabalho foi avaliar as atividades embriotóxicas, moluscicida e artemicida do extrato etéreo, da atranorina e do ácido praesorediósico, ambos purificados de Parmotrema praesorediosum. A partir do extrato obtido de P. praesorediosum com éter dietílico foram realizados isolamento e purificação do ácido praesorediósico e da atranorina. O extrato etéreo e as substâncias purificadas foram analisadas através de CCD, CLAE, RMN-H1 e RMN-C13. Para a realização dos bioensaios, todas as substâncias analisadas foram dissolvidas em DMSO (0,25%) e expostas por 24 h a 25˚C e foram utilizados grupos controle negativos (água e DMSO a 0,25%) e positivos (niclosamida 20 μg/mL e carbonato cúprico 50 μg/mL). Para os ensaios de embriotoxicidade com B. glabrata utilizou-se as seguintes concentrações para o extrato etéreo 1000, 500, 300, 250, 150, 100, 50 e 25 μg/mL, a atranorina 1000, 500 e 250 μg/mL e o ácido praesorediósico 500, 250 e 125 μg/mL. Após a exposição, os embriões foram observados por 8 dias consecutivos e classificados como inviáveis (embriões mortos e malformados) e viáveis (embriões eclodidos). Os experimentos foram realizados em triplicata com 100 embriões por grupo. Para os testes moluscicidas foram selecionados 150 animais, que foram colocados em recipientes individuais com água filtrada para verificar a maturidade sexual e, em seguida foram separados 120 animais sexualmente maduros. Os moluscos (n=5) foram separados e submetidos ao extrato etéreo 200, 150, 100, 50 e 25 μg/mL e a atranorina purificada 500, 250 e 125 μg/mL, e os testes foram realizados em triplicata para cada concentração e avaliados durante 8 dias. Para o ensaio de toxidade ambiental com A. salina utilizou-se o extrato etéreo 1000, 500, 250, 100, 50 e 25 μg/mL, a atranorina purificada 1000, 500, 250, 125 e 62,5 μg/mL e o ácido praesorediósico purificado 200, 125, 62,5 μg/mL incubados em água do mar. Os testes foram realizados em quadruplicata com 5mL da solução com dez larvas por tubo de ensaio. Os grupos foram analisados quanto à frequência de letalidade e sobrevivência. Os testes estatísticos utilizados foram o ANOVA e o pós-teste Newman- keuls com p < 0,05. A embriotoxicidade do extrato etéreo e do ácido praesorediósico purificado foram comprovados, pois as substâncias apresentaram valores de CL50 de 363,07 μg/mL e 213,79 μg/mL, respectivamente. A CL50 estimada para os moluscos tratados com o extrato etéreo foi de 102,32 μg/mL demonstrando ser bastante eficiente no combate ao hospedeiro intermediário. A atranorina purificada não apresentou toxicidade sobre embriões e moluscos. Os ensaios demonstraram que o extrato etéreo, a atranorina e o ácido praesorediósico, ambos purificados, apresentaram baixa toxicidade ao microcrustáceo, indicando que estas substâncias oferecem baixo risco ao meio ambiente. A toxicidade do extrato etéreo e do ácido praesorediósico purificado do líquen P. praesorediosum nas diferentes concentrações testadas causou significativa letalidade sobre embriões e moluscos de B. glabrata, demonstrando ser bastante promissor visto que pode ser considerado como potente agente moluscicida. / Schistosomiasis is endemic distributed in tropical and subtropical regions, which can be controlled by the snails Biomphalaria glabrata. The purpose since work was to evaluate the embryotoxic activities, molluscicide and artemicida ether extract, the atranorin and praesorediosic acid, both of purified Parmotrema praesorediosum. From the extract obtained from P. praesorediosum with diethyl ether was carried out isolation and purification of praesorediosic acid and atranorin. The ether extract and the purified compounds were analyzed by CCD, HPLC, RMN-H1 and RMN-C13. To achieve the bioassays, all analyzed substances were dissolved in DMSO (0.25%) and exposed for 24 hours at 25˚C and used negative control (water and DMSO 0,25%) and positive (niclosamide 20 μg/mL cupric carbonate and 50 μg/mL). For embryotoxicity tests with B. glabrata was used for the following concentrations ether extract 1000, 500, 300, 250, 150, 100, 50 and 25 μg/mL, the atranorin 1000, 500 and 250 μg/mL and acid praesorediosic 500, 250 and 125 μg/mL. After exposure, the embryos were observed for 8 consecutive days and are classified as non-viable (dead embryos and malformed) and viable (hatched embryos). The experiments were performed in triplicate with 100 embryos per group. To test molluscicides 150 animals were selected, which were placed in individual containers with filtered water to check sexual maturity, and then were separated 120 sexually mature animals. The snails (n= 5) were separated and subjected to ether extract 200, 150, 100, 50 and 25 μg/mL and atranorin purified 500, 250 and 125 μg/mL, and tests were performed in triplicate for each concentration and evaluated for 8 days. For environmental toxicity test with A. salina used the ether extract 1000, 500, 250, 100, 50 and 25 μg/mL, the purified atranorin 1000, 500, 250, 125 and 62.5 μg/mL and purified acid praesorediosic 200, 125, 62.5 μg/mL incubated in sea water. The tests were performed in quadruplicate with 5mL of the solution with ten larvae per test tube. The groups were analyzed for frequency and lethality survival. Statistical analyzes were performed using ANOVA and the Newman-Keuls post-test with p<0.05. Embryotoxicity ether extract and the purified acid praesorediosic been proven, as the substances showed CL50 values of 363.07 μg/mL to 213.79 μg/mL, respectively. The CL50 estimated for snails treated with ether extract was 102.32 μg/mL demonstrating to be quite efficient in combating intermediate host. The atranorin purified showed no toxicity to embryos and snails. The tests showed that the ether extract, the atranorin and praesorediosic acid, both purified, showed low toxicity microcrustacean, indicating that these substances offer low risk to the environment. The toxicity of ether extract and the purified acid praesorediosic lichen P. praesorediosum in different concentrations tested caused significant mortality of embryos and snails B. glabrata, proving to be very promising as it can be considered as potent molluscicidal agent.
Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/16901 |
Date | 23 February 2015 |
Creators | CARVALHO, Alexsandra Nascimento de |
Contributors | http://lattes.cnpq.br/2305034465864774, SILVA, Nicácio Henrique da, MARTINS, Mônica Cristina Barroso |
Publisher | Universidade Federal de Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Bioquimica e Fisiologia, UFPE, Brasil |
Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
Language | Breton |
Detected Language | Portuguese |
Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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