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An?lise in vitro da citotoxicidade e prolifera??o celular em equivalentes de pele humana

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Previous issue date: 2009-08-25 / Introdu??o: H? uma grande necessidade de suprir a demanda por enxertos de pele aut?logos humanos, fundamentais para tratamento de pacientes sujeitos as situa??es particulares como ?lceras, queimaduras, traumas entre outras. Pol?meros naturais e sint?ticos t?m sido desenvolvidos e empregados como biomaterias. A aplica??o de testes visando avaliar o comportamento celular na presen?a do biomaterial in vitro poder? abreviar as etapas necess?rias para atestar sua biocompatibilidade. A an?lise com as metodologias proposta pelas normas da ISO 10993 permite o estabelecimento de uma escala ordenada e racional para a biocompatibilidade dos materiais em fun??o de sua citotoxicidade. Essa padroniza??o poder? auxiliar na compara??o de diversos biomateriais utilizados em estudos e, na produ??o de novas mat?rias, contribuindo para o desenvolvimento da bioengenharia dos tecidos. Os materiais analisados e utilizados como equivalentes de pele humana podem ter sua citotoxicidade mediada por altera??es da fun??o mitocondrial das c?lulas, determinada pelo teste de MTT. Objetivos: (1) Avaliar a citotoxicidade dos extratos dos Equivalentes de Pele Humana (EPH) Veloderm? e Biopiel? no cultivo de fibroblastos da linhagen celular NIH-3T3, atrav?s do teste colorim?trico de MTT; (2) classifica??o dos extratos puros dos EPH atrav?s de escala de citotoxicidade, de acordo com as normas da ISO 10993. Metodologia: Foram utilizados como subst?ncias-teste extratos de Equivalentes de Pele Humana (EPH) Veloderm? (VL) e Biopiel? (BP). Fibroblastos da linhagem NIH-3T3 foram semeados em tr?s placas de cultural de 96 po?os na concentra??o de 4,5 ? 104 c?lulas por po?o. As c?lulas foram cultivadas na presen?a de concentra??es distintas dos extratos das subst?ncias-teste, obtidos segundo as normas da ISO 10993 por 24, 48, e 72 horas para a determina??o do grau de citotoxicidade das subst?ncias-teste quando comparadas ao controle de positivo (CP) e negativo de citotoxicidade (CN), atrav?s do teste de MTT. Resultados: na compara??o entre os Grupos (CN, CP, BP, VL), os dados mostraram que houve diferen?a significativa na citotoxicidade (p<0,001) no CP contra CN, BP e VL dos extratos puros de cultivo, nos diferentes tempos de exposi??o (24, 48 e 72 horas). N?o houve diferen?a significativa da citotoxicidade do Grupo BP e VL contra CN. Houve diferen?a de citototoxicidade (p=0,01) quando extratos de 10% em cultura celular de 48 horas foram usados nos Grupos VL (17,4?1,4) e BP (14,5?0,6). Uma diferen?a tamb?m foi detectada na citotoxicidade (p=0,014) no Grupo BP em 48 horas de cultura, entre o extrato de 10% (14,5?0,6) contra os extratos de 60% (16,7?1,0) e 100% (17,0?1,3). O Grupo VL em cultura de 72 horas mostrou uma diferen?a na citotoxicidade (p=0,041) quando comparados os extratos de 60% (21,3?1,6) e 100% (17,5?2,1). A viabilidade celular dos extratos do Veloderm? e Biopiel? independente do tempo de exposi??o e concentra??o encontraram-se entre 75% e 100% na compara??o com CN. Segundo a classifica??o baseado na ISO 10993, ambos os extratos puros de EPH foram definidos n?o t?xicos (NT). Conclus?o: O conjunto dos resultados sugere alta biocompatibilidade dos EPHs testados; entretanto, o teste colorim?trico de MTT representa uma avalia??o inicial, sendo importante seu papel na racionaliza??o da experimenta??o in vivo e cl?nica dos biomateriais. Esta hip?tese precisa ser confirmada com testes complementares segundo normas da ISO 10993.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.pucrs.br:tede/1534
Date25 August 2009
CreatorsOliveira, Milton Paulo de
ContributorsSilva, Jefferson Luis Braga da
PublisherPontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de, PUCRS, BR, Faculdade de Medicina
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS, instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, instacron:PUC_RS
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
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