The interferon-induced protein kinase RNA-activated (PKR) is activated after virus infection but not during human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) infection of lymphocytes. The TAR RNA binding protein (TRBP) counteracts the inhibitory effects of PKR on HIV-1 expression and replication. In U251MG astrocytes, which are low TRBP producers, PKR is activated upon HIV-1 transfection and viral production is low. Astrocytes overexpressing TRBP express more viral proteins. Expression of adenosine deaminase acting on RNA-1 (ADAR1)-p150 and its binding to PKR are increased during high HIV-1 replication. ADAR1 also reverses PKR inhibition of HIV-1 expression and production in HEK 293T and astrocytes. DNA- and RNA-binding domains of ADAR1 are required for PKR inhibition. Surprisingly, the PKR activator protein (PACT) also reversed PKR inhibition of HIV-1 expression in HEK 293T. These results indicate that three double stranded RNA binding proteins, TRBP, ADAR1 and PACT belong to a multiprotein complex that inhibits PKR function during HIV-1 infection. / La protéine kinase induite par l'interféron activée par l'ARN (PKR) est activée après une infection virale, mais pas durant l'infection des lymphocytes par le Virus de l'Immunodéficience Humaine de type-1 (VIH-1). La protéine de liaison à l'ARN TAR (TRBP) empêche l'effet inhibiteur de PKR sur l'expression et la réplication du VIH-1. Dans les astrocytes U251MG, exprimant faiblement TRBP, PKR est activée par le VIH-1 et la production virale reste basse. Des astrocytes qui surexpriment TRBP produisent plus de protéines virales. L'expression de l'adénosine déaminase agissant sur l'ARN-1 (ADAR1)-p150 et sa liaison à PKR augmentent quand le VIH-1 se réplique activement. ADAR1 inverse l'inhibition de l'expression et de la production du VIH-1 par PKR. L'inhibition de PKR nécessite les domaines de liaison à l'ARN et à l'ADN d'ADAR1. Étonnamment, l'activateur de PKR (PACT) inverse aussi l'inhibition du VIH-1 par PKR dans les HEK 293T. Ces résultats indiquent que trois protéines liant l'ARN double brin, TRBP, ADAR1 et PACT forment un complexe multiprotéique qui inhibe la fonction de PKR pendant l'infection du VIH-1.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.86839 |
| Date | January 2010 |
| Creators | Gélinas, Jean-François |
| Contributors | Anne Gatignol (Internal/Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Microbiology and Immunology) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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