Orientadora: Profa. Dra. Maria Aparecida Sperança / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biossistemas, 2016. / O arbovírus Mayaro (MAYV), pertence ao gênero Alphavirus, família
Togaviridae e grupo sorológico A. Como parte do projeto de pesquisa sobre
"Arboviroses Emergentes na Amazônia Ocidental", foi isolada uma estirpe de um
alphavirus Mayaro a partir de um indivíduo febril de Acrelândia, Acre. O MAYV
ocorre no ambiente silvestre ou rural em áreas próximas a florestas e seu ciclo de
transmissão envolve a participação de primatas não humanos, aves e mosquito
Haemagogus ssp. As características patogênicas do vírus MAY em humanos são
pouco compreendidas e o potencial de dispersão desses vírus e a possibilidade de
participação de espécies de mosquitos do gênero Aedes em seu ciclo de
transmissão fazem desse vírus um importante organismo para estudos biológicos e
epidemiológicos. Devido à natureza não específica dos sinais e sintomas de
doenças febris agudas causadas por MAYV, o diagnóstico clínico é difícil e pode ser
confundido com outras doenças febris, como: a febre da dengue, febre do
chikungunya, febre amarela e a malária. Já o diagnóstico laboratorial por isolamento
viral é laborioso e depende de infraestrutura e pessoal especializado, disponível em
poucos laboratórios brasileiros. O diagnóstico imunoenzimático possui limitações
quanto à utilização de partículas virais infecciosas e também por produzirem reações
cruzadas com vírus da mesma família. Sendo assim, com o intuito de obter antígeno
recombinante específico para detecção de MAYV, este projeto teve por objetivo
expressar a glicoproteína E2 do vírus em células de insetos utilizando baculovírus
recombinante como vetor. A glicoproteína E2 dos alphavirus tem a função de se ligar
a receptores presentes na membrana plasmática da célula alvo para a entrada do
vírus através de uma vesícula endossomal. Como resultado, foi obtido o baculovírus
recombinante para a glicoproteína E2 de MAYV, e a mesma foi expressa pela
primeira vez em células de inseto High-FiveTM. Apesar de utilizar vetor com sinal de
exportação da proteína recombinante para o meio extracelular, a glicoproteína
recombinante E2 de MAYV não foi exportada, permanecendo na fração celular da
cultura. Análises da estrutura tridimensional da E2 homóloga de alphavirus
indicaram que esta glicoproteína apresenta um domínio transmembrana, o que
justifica sua permanência na bicamada fosfolípidica da célula hospedeira. / The arbovirus Mayaro (MAYV), belongs to the genus Alphavirus, family
Togaviridae and serological group A. As part of the research project on "Emerging
Arboviroses in the Western Amazon", a strain of Mayaro alphavirus was isolated from
a febrile individual of Acrelândia, Acre. MAYV occurs in the wild or rural environment,
in areas near to forests and its life cycle includes the participation of non-human
primates, birds and mosquito Haemagogus ssp. The pathogenic characteristics of
MAYV in humans are poorly understood and the dispersal potential of these viruses
and the possibility of participation of species of Aedes mosquitos in its transmission
cycle make this virus an important organism for biological and epidemiological
studies. Because of the nonspecific nature of the signs and symptoms of acute
febrile illness caused by MAYV, clinical diagnosis is difficult and can be confused
with other infectious diseases, such as dengue fever, chikungunya fever, yellow fever
and malaria. Moreover laboratory diagnosis by viral isolation is laborious and
depends on infrastructure and trained personnel available in a few Brazilian
laboratories. The enzyme immunoassay diagnosis has limitations on the use of
infectious viral particles and also for producing cross-reactions with other virus from
the same group. Thus, in order to obtain recombinant antigen for specific detection of
MAYV, this project aimed to express the MAYV E2 glycoprotein in insect cells using
recombinant baculovirus as vector. The E2 glycoprotein of the alphaviruses has the
function of binding to receptors in the plasma membrane of the target cell for viral
entry through an endosomal vesicle. The recombinant baculovirus was obtained for
the MAYV E2 glycoprotein, and this protein was expressed for the first time in High-
FiveTM insect cells. Despite using a vector with signal to exportation of the
recombinant protein to the extracellular medium, the MAYV E2 glycoprotein was not
exported, remaining in the cell fraction of the culture. Structural analyses of
alphavirus E2 homologous protein indicated that the glycoprotein has a
transmembrane domain, which justifies its permanence in the host cell phospholipid
bilayer.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:BDTD:100851 |
| Date | January 2016 |
| Creators | Vasconcelos, Ligia Marinho Pereira |
| Contributors | Sperança, Marcia Aparecida, Araujo, Daniele Ribeiro, Silva, Carlos Alberto da |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf, 101 f. : il. |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFABC, instname:Universidade Federal do ABC, instacron:UFABC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=100851&midiaext=72199, http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=100851&midiaext=72200, Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.brphp/capa.php?obra=100851 |
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