Orientadora: Prof. Dra. Marcella Pecora Milazzotto. / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biotecnociência, 2015. / A morfologia e as taxas de clivagem e de blastocistos têm sido critérios utilizados para
avaliação da competência embrionária. Entretanto, com o advento de novas
biotecnologias tem-se tornado claro que a competência embrionária pode ser
severamente comprometida sem alterações morfológicas perceptíveis. Estudos em
embriões humanos propuseram avaliações morfológicas adicionais relacionadas ao
momento das primeiras divisões celulares embrionárias (rápida e lenta) que parecem
estar relacionadas com a viabilidade do embrião. No entanto, ainda não existem muitos
dados dessa análise morfocinética em bovinos. A viabilidade embrionária também pode
ser severamente comprometida pelo acúmulo de lipídeos nos embriões PIV, podendo
inclusive prejudicar aplicações comerciais como a criopreservação. Com isso, o objetivo
desse estudo foi caracterizar em embriões bovinos de cinéticas diferentes de
desenvolvimento (rápido e lento) o padrão de metabolismo lipídico. Para tal, embriões
produzidos in vitro foram analisados quanto a quantidade de lipídeos totais e
caracterização de lipídeos de membrana nos estádios iniciais de clivagem (22hpi e
96hpi) e blastocisto. Para o estádio de blastocisto também foi incluído um grupo de
embriões in vivo. Foi possível evidenciar menor quantidade de lipídeos totais pela
coloração SUDAN BLACK B nos grupos lentos. As análises de MALDI-MS
evidenciaram lipídeos de membrana com padrões distintos nos grupos rápidos e lentos
nos estádios de clivagem e mórula. Já nos estádios de blastocistos os dados nos
permitem inferir que o grupo de blastocisto lento parece estar mais próximo do grupo in
vivo, pela semelhança na abundância/intensidade relativa no maior número de íons
revelados pelas análises multivariadas. No entanto, o grupo lento ainda mostra alguma
semelhança com o grupo rápido devido a exposição ao mesmo ambiente in vitro. / Embryo viability and competence have been evaluated by criteria such as morphology
and cleavage and blastocyst rates. However, the advent and application of new
biotechnologies have demonstrated that embryonic competence can be severely
compromised without noticeable morphological changes. Human embryo studies
proposed the use of additional morphological evaluations related to the moment of the
first embryonic cell divisions and its kinetic (fast and slow), which appear to be relevant
to the embryo viability. Nevertheless, there are still not enough data available related to
the morphokinetic analysis of embryos in bovine cattle. Embryo viability can also be
severely compromised by lipid accumulation in IVP (in vitro produced) embryos and
can even harm commercial applications such as cryopreservation. Therefore, the aim of
this study was to evaluate and characterize the pattern of lipid metabolism on bovine
embryos with different developmental kinetics (fast and slow). For this goal, IVP
embryos were analyzed considering the lipids total amount and membrane lipids
characterization during the cleavage early stages (22hpi and 96hpi) and blastocyst stage.
The study also included a group of in vivo embryos at the blastocyst stage. The results,
using SUDAN BLACK B staining technique, showed a smaller amount of total lipids
in the slow groups. The MALDI-MS analysis results showed different patterns of
membrane lipids in the fast and slow groups in the cleavage and morulae stages. The
data obtained at the blastocyst stage allow us to infer that the slow group is more similar
to the in vivo group, since the results showed similarity in relative quantity/intensity in a
greater number of ions revealed by multivariate analysis. However, the slow group still
shows some similarity with the fast group due to the exposure to the same in vitro
environment.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:BDTD:90442 |
| Date | January 2015 |
| Creators | Annes, Kelly |
| Contributors | Centeno, Danilo da Cruz, Milazzotto, Marcella Pecora, Sudano, Mateus Jose |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf, 88 f. : il. |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFABC, instname:Universidade Federal do ABC, instacron:UFABC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=90442&midiaext=71989, http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=90442&midiaext=71990, Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.brphp/capa.php?obra=90442 |
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