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Previous issue date: 2015-04-27 / CAPES / Ovarian cancer (OVCA) is the most lethal gynecological cancer, and its
dissemination and chemoresistance are major factors determining disease
prognosis. Better understanding of mechanisms involved in these processes is
crucial to improve OVCA therapy; therefore being the aim of the present study.
Firstly, the role of NAC1 and BCL6 regulating transcription in OVCA has been
investigated using FOXQ1 as a study model. It has been shown that NAC1 and
BCL6 interact through NAC1’s BEN C-terminus domain, forming a complex which
binds to three BCL6 binding motives on FOXQ1 promoter, activating its transcription.
A positive correlation between NAC1 and BCL6 expression has been shown in
OVCA cell lines and tumor specimens. Moreover, BCL6-depending NAC1 binding to
BCL6 promoter activating its transcription has been shown. Therefore, a novel
mechanism by which a BTB/POZ family member interacts with BCL6 attenuating its
auto-repression has been herein described. Finally, cDNA microarray analyzes
revealed a plethora of putative NAC1/BCL6 target genes. On the second chapter,
the effects of cisplatin on OVCA progression have been analyzed. It has been shown
that a five-day treatment with 10-5M cisplatin of A2780 cell increased
chemoresistance, cell migration and expression of the cancer-stem cell associated
phenotype CD44+CD24-, and a G2/M cell cycle arrest. The secretion of TGF-β1 and
CXCL2, both cytokines involved in migration and resistance in cancer, in response to
cisplatin, doxorubicin, and paclitaxel, by three cell lines originated from serous
(A2780), endometrioid (MDAH-2774), and clear cell (TOV21G) OVCA subtypes has
been measured. In response to cisplatin, TGF-β1 secretion by TOV21G cells has
increased, as has CXCL2 secretion by TOV21G and A2780. When analyzing the
effect of exogenous CXCL2 in drug resistance, this relation could not be
demonstrated. However, it could be explained by CXCR2 overexpression in
response to cisplatin, which has been herein demonstrated. Therefore, several
different mechanisms leading to OVCA progression have been identified / O câncer de ovário (CAOV) é a neoplasia ginecológica mais letal, sendo que a
disseminação da doença e a quimiorresistência podem ser considerados fatores
determinantes no prognóstico da doença. O entendimento dos mecanismos
envolvidos nesses processos é essencial ao aprimoramento da terapêutica do
CAOV, sendo assim o alvo de estudo deste trabalho. Primeiramente, investigou-se o
papel de NAC1 e BCL6 na regulação da transcrição no CAOV, utilizando-se como
modelo FOXQ1. Viu-se que NAC1 e BCL6 interagem através do domínio BEN Cterminal
de NAC1, formando um complexo que se liga a motivos de ligação a BCL6
localizados na região promotora de FOXQ1 que, conforme se mostrou, possui três
desses motivos. Em seguida, mostrou-se que existe uma correlação positiva entre a
expressão de NAC1 e BCL6 em linhagens celulares de CAOV e em tumores.
Mostrou-se ainda, que NAC1 liga-se ao promotor de BCL6 de forma dependente da
proteína BCL6, ativando a sua transcrição. Dessa forma, descreveu-se de forma
inédita um mecanismo através do qual um membro da família BTB/POZ interage
com BCL6 atenuando a sua autorregulação negativa. Por fim, através de análise de
microarranjo de cDNA identificaram-se possíveis novos alvos de regulação do
complexo NAC1/BCL6. Na segunda parte deste trabalho, analisaram-se os efeitos
da cisplatina na progressão do CAOV. Mostrou-se que, em resposta ao tratamento
por cinco dias com cisplatina 10-5M, células da linhagem A2780 apresentaram
aumento de migração, resistência e expressão do fenótipo de células-tronco
tumorais CD44+CD24-; além da droga induzir uma parada do ciclo celular em fase
G2/M. Também se analisou a secreção de TGF-β1 e CXCL2, citocinas envolvidas
com a resistência e metástase no câncer, em resposta à cisplatina, à doxorrubicina
e ao paclitaxel, em três linhagens de CAOV derivadas de tumores dos tipos seroso
(A2780), endometrioide (MDAH-2774) e de células claras (TOV21G). Mostrou-se
que, em resposta à cisplatina, apenas, havia o aumento da secreção de TGF-β1 por
células TOV21G e de CXCL2 por células A2780 e TOV21G. Em seguida, buscou-se
identificar se CXCL2 exógeno seria capaz de induzir a resistência nas células
A2780. Esse efeito não foi observado. Contudo, pode ser explicado pela regulação
positiva da expressão de CXCR2 induzida pela cisplatina aqui mostrada. Dessa
forma, identificaram-se diferentes mecanismos que podem contribuir para a
progressão do CAOV
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:dspace2.ufes.br:10/4524 |
| Date | 27 April 2015 |
| Creators | Herlinger, Alice Laschuk |
| Contributors | Pacheco, Marcos da Silva, Pires, Rita Gomes Wanderley, Silva, Ian Victor, Rangel, Letícia Batista Azevedo |
| Publisher | Universidade Federal do Espírito Santo, Doutorado em Biotecnologia, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFES, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | text |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFES, instname:Universidade Federal do Espírito Santo, instacron:UFES |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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