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Detecção e caracterização bioquímica e molecular de Bacillus Cereus em grãos

O Bacillus cereus é um microrganismo com ampla distribuição na natureza estando
presente no solo, poeira e água, sendo caracterizado pela formação de esporos, possui
potencial patogênico e deteriorante. Em condições favoráveis, esse microrganismo produz
enzimas que confere características sensoriais indesejáveis e produz toxinas numa grande
variedade de alimentos, principalmente em cereais e derivados. Estas toxinas produzidas
são responsáveis pela ocorrência de intoxicação alimentar. Desta forma, o presente
trabalho tem como objetivo avaliar a presença de B. cereus de cereais destinados a
produção de alimentos farináceos, realizar o isolamento destas bactérias quando presentes
nas amostras testadas e avaliar a presença de genes relacionados aos fatores de virulência
nestes isolados. Para tanto foram avaliadas 130 amostras de cereais obtidos de uma
empresa processadora de grãos, sendo que deste total, 54 isolados apresentaram
positividade para B. cereus. Foram realizados os testes bioquímicos de motilidade,
hemolisina, decomposição da tirosina, redução do nitrato a nitrito, crescimento rizóide e
corpúsculos de inclusão cristalina, para confirmação dos isolados. Dos 54 isolados, 5
foram reclassificados como Bacillus thuringiensis e 2 como Bacillus megaterium. Quanto
a caracterização molecular, todos os isolados foram submetidos a análise de PCR por
BOX, REP e ERIC – PCR, visto que nenhuma das técnicas apresentou diferença
significativa quanto a separação do B. cereus. Os isolados foram avaliados quanto aos
fatores patogênicos para os genes Bcet, Piplc, NheB, EntB, HbA e Sph, onde o grupo do
arroz foi o que apresentou maior número de genes positivos. Do total dos isolados
avaliados, os genes HblA e NheB foram os que apresentaram maiores números de isolados
positivos. Os dados obtidos nesse trabalho evidenciaram que os genes de patogenicidade
de B. cereus estão amplamente distribuídos entre os grupos que contaminam os cereais e
derivados. / The Bacillus cereus is an organism widely distributed in nature and is present in soil, dust
and water. This bacterium is characterized by spores formation and food deteriorating and
pathogenic potential. Under favorable conditions, this microorganism produces enzymes
that confer undesirable sensory characteristics and toxins in a wide variety of foods,
mainly in cereals and derivatives. These toxins produced are responsible for the
occurrence of food poisoning. This study aims to evaluate the presence and isolate of B.
cereus on grains for the production of food starches, as well the evaluate the presence of
genes related to virulence factors on these isolates. Therefore, it was evaluated 130
samples obtained from a cereal grain processing company, 54 isolates were positive for B.
cereus. Biochemical tests were realized for motility, haemolysin, tyrosine decomposition,
reduction of nitrate to nitrite, type of growth and corpuscles crystalline inclusion. Seven
samples of 54 isolates were reclassified as 5 B. thuringiensis and 2 B. megaterium. As the
molecular characterization, all isolates were analyzed by PCR BOX, REP and ERIC -
PCR, whereas none of the techniques presented significant difference separating B. cereus.
The isolates were also evaluated for presence of pathogenic factors genes Bcet, PIPLC,
NheB, EntB, HbA and Sph, where the group from rice isolates showed the highest number
of positive genes. The HblA and NheB genes were the most prevalence on the isolates. The
data obtained in this study showed that genes for pathogenicity of B. cereus are widely
distributed among the groups that contaminate cereals and derivatives.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ucs.br:11338/667
Date14 December 2012
CreatorsReis, Valquíria Boff Martelo
ContributorsCansian, Rogério Luís, Valduga, Eunice, Camassola, Marli, Delamare, Ana Paula Longaray, Laurino, Jomar Pereira
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UCS, instname:Universidade de Caxias do Sul, instacron:UCS
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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