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Previous issue date: 2011 / Lectinas são proteínas ou glicoproteínas de origem não imune cuja ligação reversível e específica a
carboidratos resulta em aglutinação celular. Bothrops leucurus, serpente da Família Viperidae,
representa um sério problema médico para a região Nordeste do Brasil. Uma lectina ligante de
galactosídeo (BlL) foi purificada do veneno da serpente Bothrops leucurus através da combinação
de cromatografia de afinidade e gel filtração. BlL aglutinou eritrócitos de coelho e humano, com
preferência para eritrócitos de coelho, sendo especificamente inibida por galactose, rafinose e
lactose, bem como por glicoproteinas. BlL é uma proteína ácida, com massa molecular de 30 kDa e
composta de duas subunidades de 15 kDa, exibiu dependência de cátions divalentes, foi
principalmente ativa em pH 4.0 a 7.0 e termoestável até 70°C. O espectro de emissão de
fluorescência mostrou resíduos de triptófano completamente encobertos na sua estrutura. Dicroísmo
Circular de BlL foi típico de uma proteína toda estrutural. BlL mostrou ser efetivo contra
bactérias gram-positivas (Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis e Bacillus subtilis). A
atividade antitumoral de BlL foi avaliada em relação ao seu potencial citotóxico em linhagem
tumoral (K562, Hep-2 e NCI-H292) e quanto à sua capacidade hemolítica. BlL apresentou uma
significante atividade citotóxica em todas as linhagens tumorais testadas e não exibiu atividade
hemolítica na máxima concentração testada (2000 μg/mL). Além disso, foi realizada em células
K562, a análise da externalização da fosfatidilserina e potencial de membrana mitocondrial,
utilizando microscópio de fluorescência. Tratamento com BlL induziu externalização da
fosfatidilserina e despolarização mitocondrial, indicando morte celular por apoptose. Após
irradiação gamma, BlL apresentou mudanças estruturais e teve sua atividade hemaglutinante
significante alterada. SDS-PAGE indicou que a irradiação causou fragmentação e com posterior
agregação da lectina. A análise em cromatografia de fase reversa revelou fragmentação estrutural. A
atividade citotóxica de BlL em linhagens tumorais (K562, Hep-2 e NCI-H292) foi abolida após
irradiação, indicando que a irradiação de BlL se mostrou uma eficiente estratégia para inativar sua
atividade citotóxica. Esses achados demonstram que o veneno de B.leucurus contem uma lectina
ligante de galactosídeo com potencial promissor para aplicação terapêutica e biotecnológica
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/1625 |
| Date | 31 January 2011 |
| Creators | dos Santos Nunes, Erika |
| Contributors | Tereza dos Santos Correia, Maria |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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