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Previous issue date: 2014-05-26 / A artrite reumatóide (AR), é uma doença crônica inflamatória, em cuja etiologia estão
envolvidos fatores genéticos, ambientais e infecções. Dentre as infecções se
destacam as virais cujas proteínas modificam a função dos sinoviócitos como ocorre
com o Parvovírus B19 (PVB19). Estudos tem mostrado a participação das citocinas
IL-6 e L-10 na fisiopatogenia da AR. O diagnóstico da AR se baseia em critérios
clínicos, radiológicos e laboratoriais.Dentre os auto- anticorpos, o fator reumatóide
(FR) apresenta alta sensibilidade e baixa especificidade. Por lado, o anticorpo
antipeptídeo citrulinado cíclico (ACCP) é um importante marcador para o diagnóstico
e tem valor preditivo de um pior prognóstico. Sua detecção pelo ELISA, têm mostrado
excelente desempenho diagnóstico, embora seja oneroso e mais demorado. Visando
diagnósticos mais rápidos e práticos, os biossensores são ideais para testes tipo
“point-of-care” devido à sua portabilidade. Os objetivos desta tese foram: avaliar a
correlação dos niveis séricos de IL-10, IL-6 e a frequência do anti-IgG PVB19 com
atividade clínica da AR mediante os índices compostos de atividade de doença
(ICADs).em diferentes tratamentos e desenvolver um imunossensor eletroquímico
label free para ACCP.Foi desenvolvido um estudo transversal para estimar a
frequencia de anti-IgG PVB19 e determinar os níveis séricos da IL6 e IL10 pelo
método ELISA.O imunossensor constituído por eletrodos screen printed de ouro,foi
baseado no uso da SAM formada pela deposição do àcido tioglicólico.Oa antígenos
foram imobilizadosde modo orientado via grupos carboxílicos do TGA. Os resultados
mostraram uma frequencia de 73% (60/83) de IgG anti-PVB19 e uma correlação
significativa entre os níveis de IL-6 e as medidas de atividade de AR nos pacientes
com maior atividade inflamatória pelo EULAR. O maior contigente de pacientes IgG
anti-PVB19 positivos estava com moderada e alta atividade pelo EULAR.O
imunossensor eletroquímico apresentou uma resposta linear na curva de calibração,
bom coeficiente de correlação e limite de detecção menor do que o método ELISA. / Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic inflammatory disease, whose etiology is influenced by
genetics, the environment, and infections. Among the various types of infections, the ones that
stand out are the viral infections whose proteins alter the function of synoviocytes as occurs
with Parvovirus B19 (PVB19). Studies have shown the involvement of the IL-6 and IL-10
cytokines in the physiopathogenesis of RA. Diagnosis of RA is based on clinical, radiological,
and laboratory criteria. In the autoantibodies, the rheumatoid factor (RF) has high sensitivity
and low specificity. The Anti-cyclic Citrullinated Peptide (anti-CCP) is an important marker for
the diagnosis and as a predictive value of a worst-case prognosis.Its detection by ELISA has
shown excellent diagnostic performance, but it is expensive and takes longer.Aiming for faster
and more practical diagnostics, biosensors are ideal for point-of-care testing, due to their
portability. The objectives of this thesis were to evaluate the correlation of the serum levels of
IL-10 and IL-6and the frequency of anti-IgG PVB19,with the clinical activity of RA, via
composite indices of disease activity, under different treatments, in order to develop a labelfree
electrochemical immunosensor for anti-CCP. A cross-sectional study was developed to
estimate the frequency of anti-IgGPVB19and to determine the serum levels of IL-6 and IL-10
by the ELISA method. The immunosensor consisting of screen-printed gold electrodes was
based on the use of the self-assembled monolayer (sam) formed by deposition of thioglycolic
acid. The antigens were immobilized, driven via carboxylic groups of the TGA. The results
showed a frequency of 73% (60/83) of IgG anti-PVB19 and a significant correlation between
the levels of IL-6 and the activity measures of AR in the patients with higher inflammatory
activity according to the EULAR. Most of the IgG anti-PVB19 positive patients had moderate
and high activity according to the EULAR. The electrochemical immunosensor showed a linear
response in the calibration curve, a good correlation coefficient, and a detection limit lower
than the ELISA method.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/18298 |
| Date | 26 May 2014 |
| Creators | MARIANO, Maria Helena Q. Araújo |
| Contributors | http://lattes.cnpq.br/3335497739195055, DUTRA, Rosa Amália Fireman, CÔELHO, Maria Rosângela Cunha Duarte |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Biotecnologia Industrial, UFPE, Brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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