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Caracterização funcional de homólogos à proteína de ligação a Cauda Poli-A (PABP) de Leishmania major

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Previous issue date: 2007 / A proteína de ligação à cauda poli-A (PABP) se liga a seqüência de poli
adenosinas presente na extremidade 3 do mRNA e possui uma
multiplicidade de funções dentro da célula. Dentre as funções atribuídas
a PABP destaca-se sua participação em eventos da síntese de proteínas,
tais como iniciação e terminação da tradução e reciclagem dos
ribossomos, e seu envolvimento no transporte de alguns mRNAs do
núcleo para o citoplasma. O objetivo deste trabalho é caracterizar
homólogos de proteínas relevantes à iniciação da tradução em
tripanosomatídeos. O estudo da PABP teve início com a busca em bancos
de dados de L. major de possíveis homólogos, onde foi encontrado tanto
o homólogo previamente descrito (LmPABP1) como mais dois homólogos
(LmPABP2 e LmPABP3), sendo que o último não possui ortólogos em
Trypanosoma. Os três genes foram amplificados, clonados, as proteínas
expressas e utilizadas para produção de soro policlonal. Em seguida foi
realizada a quantificação dos níveis intracelulares das três proteínas em
extratos da forma promastigota de L. major sendo a LmPABP2 a mais
abundante, a LmPABP3 em níveis intermediários e a LmPABP1 a menos
abundante. No entanto, as LmPABP2-3 são detectadas com uma única
forma, enquanto que a LmPABP1 está presente em duas isoformas,
provavelmente uma delas devido a fosforilação. Análises da expressão
durante o ciclo evolutivo do parasita mostrou que as três proteínas
encontravam-se presentes em todas as formas evolutivas, porém a
LmPABP3 mostrou um decréscimo na fase estacionária de crescimento e
a LmPABP1 apresenta-se fosforilada apenas nas primeiras horas após o
repique. Experimentos de localização subcelular indicam que a LmPABP1
está presente na fração citoplasmática, enquanto que LmPABP2-3 estão
presentes tanto na fração citoplasmática quanto na nuclear, porém com
predominância da fração nuclear. Estudos adicionais precisam ser feitos
pra entender como estas proteínas diferem funcionalmente e quais seus
papéis na síntese protéica

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/6362
Date January 2007
Creatorsde Carli da Costa Lima, Tamara
ContributorsPompílio de Melo Neto, Osvaldo
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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