Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In this work, the aim of this study is to evaluate sample preparation procedures and
liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry (LC-ICP-MS) and LC
coupled to chemical vapor generation (CVG) and ICP-MS (LC-CVG-ICP-MS) for
identification and quantification of As species in mollusks collected in BTS. Conditions
related to As species extraction were assessed with the use of microwave assisted extraction
(MAE) and ultrasound-assisted extraction (UAE). The influence of the main parameters
involved in extraction of As species such as the type and concentration of extraction solution,
sample mass, temperature and extraction time were evaluated. The extraction was possible
by using water at 80 °C (0.2 g sample and 6 mL of w ater) for 6 min using MAE. For the
chromatographic separation the type of mobile phase [(NH4)2CO3 and (NH4)2HPO4]
concentration (1 to 20 mmol L-1), pH (5.0 to 9.0), flow rate (1.05 to 1.45 mL min-1) and elution
mode (isocratic and gradient) were evaluated. The volume of sample injected into the
chromatograph was fixed to 200 μL. For the separation of As species an anion exchange
column (Hamilton PRP-X100, 250 x 4.1 mm) was used. Six As species were detected in the
mollusks being identified arsenobetaine (AsB), As(III), dimethylarsenic acid (DMA) and ρ-
arsanilic acid (ρ-ASA). The best separation of the As species was obtained by gradient
elution mode and using the following program: 0 to 1.4 min using 6 mmol L-1 (NH4)2HPO4 to
1.4 to 2.7 min using 20 mmol L-1 (NH4)2CO3 and 2.7 to 15 min using 6 mmol L-1 (NH4)2HPO4).
The mobile phase flow rate was set at 1.25 mL min-1. CVG parameters were evaluated and
the concentrations of NaBH4 and HCl, and carrier gas flow rate were set to 1.0% (m/v) 1.0
mol L-1 and 1.15 L min-1, respectively. The extraction procedures and determination of total
As were evaluated using certified reference materials BCR 627 (Tuna Fish Tissue), DORM-2
(Dogfish Muscle) and NIST 1566b (Oyster tissue). The agreement of the results obtained
was 95 ± 3 to 101 ± 5%, respectively. The sum of the concentrations of As species
determined by LC-ICP-MS and the total As concentration in digested samples and extracts
measured, determined by ICP OES were also in good agreement on a confidence level of
95% (Student t-Test). The developed methods by employing the LC-ICP-MS and LC-CVGICP-
MS for As speciation analyses in bivalves mollusks are considered suitable. / Neste trabalho foi avaliado o preparo da amostra e o uso da cromatografia a líquido
acoplada à espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (LC-ICP-MS) e
LC acoplado ao sistema de geração química de vapor (CVG) e ICP-MS para a identificação
e quantificação das espécies de As presentes em tecidos de moluscos bivalves. Condições
relacionadas à extração das espécies de As foram avaliadas com o emprego de extração
assistida por micro-ondas (MAE) e ultrassom (UAE). A influência dos principais parâmetros
envolvidos na extração das espécies de As, como o tipo e concentração da solução
extratora, massa de amostra, temperatura e o tempo de extração por MAE e o tempo de
sonicação por US foram avaliados. Extração de As foi possível usando água a 80 °C (0,2 g
de amostra e 6 mL de água) durante 6 min com MAE. Para a separação cromatográfica
foram avaliados o tipo de fase móvel [(NH4)2CO3 e (NH4)2HPO4], a concentração (1 a 20
mmol L-1), o pH (5,0 a 9,0), a vazão (1,05 a 1,45 mL min-1) e o modo de eluição (isocrático e
gradiente). O volume de amostra injetada no cromatógrafo foi fixado em 200 μL. Para a
separação das espécies de As foi utilizada uma coluna de troca aniônica (Hamilton PRPX100,
250 x 4,1 mm). Foram detectadas seis espécies de As nos moluscos, sendo
identificadas somente a arsenobetaína (AsB), o As(III), o dimetilarsênio (DMA) e o ácido ρ-
arsanílico (ρ-ASA). A melhor separação das espécies de As foi obtida por eluição gradiente
utilizando as seguintes condições: 0 a 1,4 min empregando 6 mmol L-1 de (NH4)2HPO4, 1,4 a
2,7 min empregando 20 mmol L-1 de (NH4)2CO3 e 2,7 a 15 min utilizando 6 mmol L-1 de
(NH4)2HPO4. A vazão da fase móvel foi fixada em 1,25 mL min-1. Os parâmetros de CVG
avaliados foram a concentração de NaBH4 e HCl e a vazão do gás de arraste, as quais
foram fixadas em 1,0 % (m/v), 1,0 mol L-1 e 1,15 L min-1, respectivamente. Os procedimentos
de extração e determinação de As total foram avaliados utilizando os materiais de referência
certificados BCR 627 (Tuna Fish Tissue), DORM-2 (Dogfish Muscle) e NIST 1566b (Oyster
tissue). A concordância entre os resultados obtidos foi de 95 ± 3 a 101 ± 5%,
respectivamente. Os valores entre a soma das concentrações das espécies de As obtidos
por LC-ICP-MS e As total nos digeridos e extratos obtidos, determinado por ICP OES
também foram concordantes em um nível de confiança de 95% (Teste t-Student). Desta
forma, o método desenvolvido empregando LC-ICP-MS e LC-CVG-ICP-MS foi considerado
adequado para determinação de espécies de As em moluscos bivalves.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/4249 |
| Date | 05 March 2013 |
| Creators | Santos, Clarissa Marques Moreira dos |
| Contributors | Dressler, Valderi Luiz, Borges, Daniel Lázaro Gallindo, Moraes, Diogo Pompéu de, Silva, Fabiana Ernestina Barcellos da, Mesko, Márcia Foster |
| Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Química, UFSM, BR, Química |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 100600000000, 400, 300, 300, 300, 300, 300, 300, 29c59cfe-a489-425c-88a5-18fdf7cbf258, 5fe92bdc-d607-4a67-8a82-36abc5ff2101, e05e117f-9066-40a8-96e6-7780e2db74f8, f14a305a-1edb-4607-8511-83ac44280348, b2f50313-d9c3-4715-a5b5-cdaeb9a99f20, f4f59694-8614-4813-b490-f750c0e68be1 |
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