Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Luis Felipe Souza (luis_felas@globo.com) on 2009-03-11T18:36:36Z
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2008_Dissertacao_LigiaLima.pdf: 440019 bytes, checksum: 602236ab63e58ec63af04d27d3c518ef (MD5) / O presente estudo avaliou diferentes sistemas de refrigeração do sêmen ovino, através da aferição e comparação das curvas obtidas assim como seus efeitos sobre a qualidade
espermática. Foram avaliados a motilidade, vigor, defeitos morfológicos, viabilidade e estado
acrossomal através da coloração dupla trypan-blue/giemsa, ao final dos 90 min de
refrigeração, e após a descongelação. Para as análises pós-descongelação foram utilizados os
mesmos parâmetros acrescidos da avaliação da integridade da membrana plasmática (IMP)
visualizada através das sondas fluorescentes IP e DIC em microscopia de fluorescência e da
avaliação do teste de exaustão ao final quatro horas de incubação do sêmen a 37ºC. A
refrigeração do sêmen foi realizada em refrigerador doméstico e em balcão, a fim de se
controlar a queda de temperatura dos dois equipamentos, as palhetas foram dispostas entre
bolsas plásticas contendo água aquecida a 32ºC, constituindo quatro sistemas RS (refrigerador
sem bolsa), RC (refrigerador com bolsa), BS (balcão sem bolsa) e BC (balcão com bolsa). Os
diferentes protocolos resultaram quatro taxas médias de refrigeração -1,4ºC/min, -0,4ºC/min, -
2,9ºC/min e -0,45ºC/min, para RS, RC, BS e BC; respectivamente. Após a refrigeração do
sêmen observou-se diferença significativa entre os tratamentos no parâmetro motilidade
espermática (P<0,05), com o tratamento BS apresentado a menor percentagem de células
móveis (58,1%). As percentagens de espermazóides vivos com acrossoma íntegro e mortos
com acrossoma íntegro apresentaram diferença significativa entre os tratamentos (P<0,05), o
tratamento BS obteve a menor média (85,3%) de vivos íntegros e também a maior média de
mortos íntegros (14,1%) diferindo dos demais ao final da refrigeração. Houve diferença
significativa na percentagem de defeitos morfológicos após a refrigeração (P<0,05), sendo
que o tratamento BS foi o que apresentou maior média (15,4%) de defeitos, os sistemas RC
(11,5%) e BC (11,1%) apresentaram as menores médias, o RS (13,6%) não diferiu dos
demais. Para os demais parâmetros espermáticos pós-refrigeração não foram observadas
diferenças significativas. Em relação ao sêmen pós-descongelação, para todos os parâmetros
avaliados não foram observadas diferenças significativas. Ao final do teste de exaustão, após
quatro horas de incubação, também não foram observadas diferenças significativas entre os
tratamentos. Com base nos resultados concluiu-se que a as diferentes taxas de refrigeração,
afetaram o sêmen no final da fase de refrigeração. As avaliações pós-descongelação não
evidenciaram diferenças significativas entre os protocolos de refrigeração
________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This study aimed to evaluate the influence of different types of cooling systems upon the
post-thawing quality of ram semen, through the measurement and comparison of cooling
rates. The parameters were motility, vigor, morphology damages, viability and acrossomal
state through the use of Trypan-blue/giemsa coloration, at the end of the 90 minutes of
cooling and post-thawing. With regard to the analysis of post- thawed semen, the same
parameters were used, in addition to the assessment of the integrity of the plasmatic
membrane using de fluorescent stains propidium iodide (PI) and carboxifluorescein diacetate
(CFDA), and the resistant test through incubation of semen at 37º C during 4 hours. The
semen refrigeration was carried out in a domestic refrigerator and in a horizontal freezer. To
control the fall of temperature of the two equipments, the straws were disposed between
plastic bags containing water at 32ºC, creating four combinations of cooling procedure: RS
(refrigerator without bag), RC (refrigerator with bag), BS (horizontal refrigerator without bag)
and BC (horizontal refrigerator with bag). The different protocols resulted in four cooling
rates: -1.4ºC/min, -0.4ºC/min, -2.9°C/min and -0.45ºC/min, for RS, RC, BS and BC,
respectively. At the end of cooling period, there was a significant difference among the
treatments on the sperm motility (P<0.05), the BS treatment showed the lowest percentage of
sperm motility (58.1%). The percentage of live spermatozoa with intact acrosome was
different (P<0.05) among treatments, the BS treatment had the lower mean (85.3%). The
percentage of dead spermatozoa with intact acrosome was different (P<0.05), the BS
treatment had the highest mean (14.1%). There was a significant difference on the percentage
of morphological defects at the end of cooling (P<0.05); the BS treatment had the highest
mean (15.4%), the systems RC (11.5%) and BC (11.1%) resulted in the lower means and the
RS (13.6%) was identical to others. To the other sperm parameters post-cooling, there were
not differences. Regarding frozen-thawed semen, there were no parameters with differences.
At the end of the resistant test period, there was no significant difference among the
treatments. On basis of these results, it was concluded that the different cooling rates only
affected ram semen at the end of cooling stage. The evaluation of frozen-thawed semen does
not show any effect on the differents cooling protocols
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unb.br:10482/1476 |
| Date | 19 June 2008 |
| Creators | Lima, Ligia Freitas de |
| Contributors | Neves, Jairo Pereira, Rumpf, Rodolfo |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UnB, instname:Universidade de Brasília, instacron:UNB |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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