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Caracterização de genótipos de Musa com base na reação a Radopholus similis e de genótipos contrastantes para resistência com base em marcadores moleculares RAPD

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, 2007. / Submitted by Érika Rayanne Carvalho (carvalho.erika@ymail.com) on 2009-12-15T22:36:36Z
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Previous issue date: 2007-03-16 / A bananeira é uma ótima hospedeira de vários nematóides importantes, sendo os principais, Radopholus similis e Helicotylenchus multicinctus. Um método eficiente, de baixo custo para o produtor e que tem mostrado grande potencial para o controle de fitonematóides é a resistência genética. Uma etapa importante do melhoramento genético é a avaliação da variabilidade genética da planta hospedeira. Neste trabalho objetivou-se avaliar e caracterizar 26 genótipos de bananeira com relação à resistência ao nematóide cavernícola, Radopholus similis e, caracterizar sete genótipos contrastantes para os fenótipos de resistência e suscetibilidade a R. similis utilizando marcadores moleculares RAPD. As plantas (uma por vaso) foram inoculadas, em de casa de vegetação, com uma suspensão contendo 100 juvenis, machos e fêmeas do nematóide. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com quatro repetições e os genótipos foram avaliados 120 dias após a inoculação. Foram avaliados número de nematóides por grama de raiz, em todo o sistema radicular, no solo e o número total de nematóides. Além destes, o fator de reprodução (FR = população final/população inicial) e seu índice de redução foram calculados para determinação da reação dos genótipos a R. similis. De acordo com essa variável, observou-se que os genótipos Borneo, Grande Naine e 1304-06 se comportaram como suscetíveis e os genótipos 4249-05, 0337-02, 0323-03 e 4279-06, como resistentes a R. similis. Amostras de DNA genômico de cada um destes materiais foram extraídas e amplificadas via PCR utilizando 36 primers decâmeros para a obtenção de marcadores RAPD. Um total de 521 marcadores foram obtidos e convertidos em uma matriz de dados binários, a partir da qual foram estimadas distâncias genéticas entre os genótipos. Análises de agrupamento e dispersão gráfica dos genótipos foram realizadas. Dos 521 marcadores obtidos, 420 (81%) foram polimórficos e 140 (27%) mostraram-se promissores para trabalhos de mapeamento genético da resistência a R. similis, uma vez que estiveram presentes em acessos avaliados como resistentes e ausentes em todos os suscetíveis. As distâncias genéticas entre os genótipos variaram entre 0,106 e 0,455. A maior distância genética (0,455) foi observada entre a cultivar Borneo e o genótipo 4279-06 que se apresentaram como genótipos altamente suscetível e resistente, respectivamente. Os acessos mais contrastantes para a resistência (Borneo e 4249-05) apresentaram uma distância de 0,374 e um total de 114 bandas polimórficas e úteis para o mapeamento genético. Os ¿primers¿ OPE-15, OPH-17 e OPG-09 foram os que apresentaram maior número de bandas promissoras para mapeamento (12, 8 e 8, respectivamente), destacando-se dentre os demais. ________________________________________________________________________________ Abstract / Banana is a suitable host to various important nematodes. Radopholus
similis and Helicotylenchus multicinctus are considered the most destructive ones to
banana root system. Genetic resistance is a potentially efficient and low cost method
of nematode control on bananas. For a breeding program, an important step is the
evaluation of genetic variability of the host. This work had as objectives: to evaluate
and to characterize 26 banana genotypes in relation to resistance and susceptibility
to the burrowing nematode Radopholus similis, and to characterize seven banana
contrasting genotypes for the phenotypes of resistance and susceptibility to R. similis
with molecular markers of RAPD. Plant materials were obtained from a working
collection of bananas maintained by Embrapa Mandioca e Fruticultura Tropical. The
plants (one per pot) were inoculated with a nematode suspension containing 100
juveniles, males and females. The experiment followed a completely randomized
design with four replicates. The genotypes were evaluated 120 days after inoculation.
Nematodes per gram of root, numbers of nematodes per root system, numbers of soil
nematodes and total number o nematodes were also evaluated. Moreover, the
reproduction factor (FR = final population / initial population) and its reduction index
were calculated to determine the reaction of the genotypes to R. similis. According to
this variable, the genotypes Borneo, Grand Naine and 1304-06 behaved as
susceptible and the genotypes 4249-05, 0337-02, 0323-03 and 4279-06, as resistant
to R. similis. Genomic DNA was extracted form each of these genotypes, and tested
with 36 decameric primers to obtain RAPD markers. A total of 521 markers were
converted into a binary data matrix, from which the genetic distances between
genotypes were estimated, and further evaluated by cluster and graphic dispersion
analyses. Among 521 resultant markers, 420 (81%) were polymorphic, and 140
(27%) were considered promising markers to be used in studies for genetic mapping
of resistance to R. similis in banana genotypes, for they were present on the
genotypes evaluated as resistant and absent in all the susceptible ones. The genetic
distances between genotypes were in the range of 0.106 to 0.455. The largest
genetic distance was observed between cv. Borneo and ‘4279-06’, respectively, a
xii
highly susceptible and a resistant genotype to R. similis. The highest contrast, as
resistance is concerned, occurred between ‘Borneo’ and ‘4249-05’, comprising a
genetic distance of 0.374 and a total of 114 polymorphic bands with potential for
genetic mapping of the resistance. The primers OPE-15, OPH-17 and OPG-09 were
the ones allowing more promising bands for genetic mapping of resistance to the
nematode (12.8 and 8, respectively).

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unb.br:10482/2731
Date16 March 2007
CreatorsSantos, Jansen Rodrigo Pereira
ContributorsCares, Juvenil Enrique
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UnB, instname:Universidade de Brasília, instacron:UNB
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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