Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2006. / Submitted by Luana Patrícia de Oliveira Porto (luana_porto_23@hotmail.com) on 2009-12-17T13:14:43Z
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Previous issue date: 2006-04 / Diante da importância da cultura do maracujazeiro, que confere ao Brasil a posição de principal produtor mundial, o presente trabalho teve como objetivos avaliar a reação de progênies de maracujazeiro-azedo (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg.) ao fungo Colletotrichum gloeosporioides (Penzig) Saccardo e avaliar isolados de Trichoderma spp. como agentes de biocontrole da antracnose. Visando a facilitar a produção de inóculo em quantidade suficiente para a realização dos ensaios, foram conduzidos, ainda, experimentos utilizando método de fermentação líquida, com quatro isolados do fungo. O trabalho foi desenvolvido no Setor de Fitopatologia da Estação Biológica da Universidade de Brasília e no Laboratório de Fitopatologia do Núcleo Temático de Controle Biológico (NTCB) da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia - CENARGEN no ano de 2005. Três isolados de C. gloeosporioides utilizados neste estudo (CEN 419, CEN 421 e CEN 433) foram obtidos a partir de amostras de folhas e frutos coletadas em supermercados e pomares do Distrito Federal (DF), enquanto um (CEN 422) foi gentilmente cedido pela UFRPE. Os isolados de Trichoderma são pertencentes à Coleção de Fungos para Controle Biológico de Fitopatógenos do CENARGEN. Os isolados C. gloeosporioides foram previamente avaliados quanto a patogenicidade, utilizando as progênies suscetíveis Yellow Master FB-100 e MAR#20-13, selecionando-se o isolado CEN 419 para uso em todos os experimentos. No primeiro experimento foram avaliadas 72 progênies de maracujazeiro-azedo quanto à resistência à antracnose, em casa-de-vegetação. Utilizou-se o delineamento em blocos casualizados, com quatro repetições e seis plantas por parcelas subdivididas. O patógeno foi cultivado em meio líquido e, os esporos coletados por centrifugação, foram usados no preparo de uma suspensão aquosa à concentração de 5 x 106 esporos/mL, a qual foi aspergida sobre ferimentos pré-estabelecidos com auxílio de escovas de aço de cerdas finas. As plantas, após a inoculação, foram mantidas sob temperatura entre 10 - 30°C e umidade de 60 -100% e avaliadas quanto à severidade (nota) e incidência (%) da doença aos 20 dias e, posteriormente, a intervalos de sete dias. Houve diferenças significativas entre as progênies na incidência de C. gloeosporioides ao longo das sete avaliações realizadas. No segundo experimento, avaliou-se o potencial antagônico de 20 isolados de Trichoderma spp. sobre o fungo C. gloeosporioides in vitro, selecionando-se nove isolados para testes in vivo. Nos testes realizados in vitro, utilizaram-se os métodos de cultivo pareado e de produção de metabólitos difusíveis, todos os isolados inibiram o crescimento do patógeno. Em casa-de-vegetação, o experimento foi disposto em blocos casualizados, com quatro repetições, sendo a repetição constituída de quatro sacos de polietileno (1, 5kg) num total de oito plantas por parcela. Neste ensaio foram usados 10 isolados de Trichoderma, quatro períodos distintos de inoculação, três épocas de avaliações e mais três testemunhas traduzido em arranjo fatorial 10 x 4 x 3 + 3. A eficiência dos isolados de Trichoderma para o controle da antracnose, foi testada nos seguintes períodos de inoculação: P1 = Trichoderma inoculado 24 horas antes do patógeno; P2 = Trichoderma inoculado 24 horas depois; P3 = Trichoderma inoculado simultaneamente com o patógeno; P4 = Trichoderma inoculado sete dias depois do patógeno e como controle, P5 = apenas Trichoderma; P6 = apenas Colletotrichum e P7 = apenas água destilada. Realizaram-se três avaliações, a primeira aos 12 dias após a inoculação e as demais, a intervalos de 12 dias. Avaliou-se, ainda, a ação dos isolados de Trichoderma sobre a massa fresca e seca da parte aérea e das raízes. O Período de aplicação simultânea foi onde se obteve maior índice de controle da antracnose. O isolado CEN 143 quando aplicado 24 horas depois do Colletotrichum e simultaneamente e os isolados CEN 151, CEN 280 e CEN 279 quando aplicados simultaneamente ao patógeno, proporcionaram os menores valores de severidade da antracnose em mudas de maracujazeiro-azedo. Com relação às testemunhas, observou-se que nas parcelas tratadas com o isolado CEN 151, houve um incremento no peso fresco da parte aérea. No terceiro experimento, foram realizados dois ensaios para avaliar o crescimento micelial e a esporulação de isolados C. gloeosporioides em meios líquidos. No primeiro, observou-se o comportamento de quatro isolados do fungo C. gloeosporioides, quanto ao crescimento e esporulação em diferentes meios líquidos. Cada tratamento foi repetido quatro vezes, em delineamento inteiramente casualizado, sendo o primeiro em esquema fatorial 4x3 (4 isolados e 3 meios) e segundo em esquema simples. Houve interação entre os meios e isolados na produção, tanto de conídios quanto de biomassa seca. Os isolados com maior produção de conídios foram CEN 419 e CEN 422, em meio de batata-dextrose (BD). Quanto ao rendimento de biomassa seca, também houve diferenças significativas entre meios, dependendo de isolado. No segundo ensaio, o desenvolvimento do isolado CEN 419 foi avaliado mediante 10 concentrações diferentes de extrato de levedura incorporadas ao meio BD. Houve diferença significativa para produção de biomassa seca, quanto à produção de conídios houve diferença significativa apenas entre os tratamentos 1 (BD) e 5 (0,4% extrato de levedura). _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Given the importance of the passion fruit crop, where Brazil is the leading world producer, the present work had the objective to evaluate the reaction of lineages of Sour Passionfruit (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg.) to the fungus Colletotrichum gloeosporioides (Penzig) Saccardo, and to evaluate isolates of Trichoderma spp. as biocontrol agents of anthracnose. With the aim of producing inoculum in sufficient quantities for the assays, experiments were performed, using liquid fermentation, with four isolates of the fungus. The work was developed in the Phytopathology section of the Biological Station of the University of Brasilia and in the Phytopathology Laboratory of the Biological Control Department of Embrapa Genetic Resources and Biotechnology Center - CENARGEN in 2005. Three isolates of C. gloeosporioides were used in this study (CEN 419, CEN 421 and CEN 433) which were originally obtained from leaves and fruits, collected in supermarkets and orchards in Federal District (DF), while one (CEN 422) was kindly donated by UFRPE. The isolates of Trichoderma were obtained from the Collection of Fungi for Biological Control of Phytopathogens at CENARGEN. The C. gloeosporioides isolates had been previously evaluated in their pathogenicity using the susceptible lineages Yellow Master FB- 100 and MAR#20-13, while the isolate CEN419, was selected for using in all experiments. In the first experiment, 72 lineages of sour passionfruit were evaluated for their resistance to anthracnose, in the greenhouse. A randomized-block design was used, with four replicates and six plants for each replicate. The pathogen was cultivated in liquid medium and the spores later collected by centrifugation. Aqueous suspensions were then prepared at 5 x 106 spores/ml which were applied to wounds previously established by abrasion with fine steel wire brushes. The inoculated plants were kept at 60 -100% humidity and evaluated as to the severity and incidence of disease 20 days and again, at intervals of 7 days. The lineages showed significant differences in their susceptibility to C. gloeosporioides in the seven evaluations. In a second experiment, the antagonistic potential of 20 Trichoderma spp. isolates against C. gloeosporioides was evaluated, in vitro and in vivo. In tests of diffusible metabolites and in plate confrontations, all the Trichoderma isolates inhibited the growth of the pathogen. The in vivo experiment was carried out in the greenhouse using a randomized block design, with 4 repetitions, whe re a repetition cons isted of 4 polyethylene bags (1.5kg) with 2 plants per bag, with a total of 8 plants per block. Four different periods of application of the isolates of Trichoderma for the control of anthracnose were tested: P1 = inoculated with Trichoderma 24 hours before the pathogen; P2 = inoculated with Trichoderma 24 hours after the pathogen; P3 = Trichoderma inoculated simultaneously with the pathogen; P4 = Trichoderma inoculated seven days after the pathogen and as control treatments; P5 = Trichoderma only; P6 = Colletotrichum only and P7 = distilled water only. Three evaluations were made, at intervals of 12 days. The action of the isolates of Trichoderma was expressed in terms of fresh and dry weights of the aerial plant parts and roots. P3 was found to be the period producing greatest of control of anthracnose. In comparison with controls, it was observed that in the plants treated with the Trichoderma isolate, CEN 151 had an increased growth of aerial parts. In the third experiment, two assays were carried out to evaluate the mycelial growth and sporulation of C. gloeosporioides isolates in liquid media. In the first test, the behavior of four isolates of C. gloeosporioides was observed for their growth and sporulation in different liquid media. Each treatment was repeated four times, in a randomized 4x3 block. There was a significant interaction between the particular isolates and different media in terms of quantity of conidia produced and dry biomass. The isolates with greatest production of conidia were CEN 419 and CEN 422, in potato-dextrose medium (BD). In the second assay, the development of isolate CEN 419 was evaluated in BD medium with the addition of ten different concentrations extract of yeast extract, again in relation to the production of conidia and dry biomass. A significant effect on production of dry biomass was observed. There was a significant difference in the production of conidia only between treatments 1 (BD) and 5 (0.4% yeast extract.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unb.br:10482/2789 |
| Date | 04 1900 |
| Creators | Martins, Irene |
| Contributors | Peixoto, José Ricardo, Mello, Sueli Corrêa Marques de |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UnB, instname:Universidade de Brasília, instacron:UNB |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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