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Engenharia tecidual: desenvolvimento de um novo scaffold injetável para aplicação na área da saúde

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Dissertacao Laisa Camerini da Rosa.pdf: 1870844 bytes, checksum: 9e13176b49329435bc52cf8b9cfe0db1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-19T11:50:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2017-12-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES# / #2075167498588264571# / #600 / Tissue engineering typically involves three major components, which are termed
tissue engineering pillars: responsive cells (stem cells), scaffolds and signaling
molecules (such as proteins and growth factors). Scaffolds are three-dimensional
structures that provide cell support and serve as a guide for cell colonization,
proliferation and differentiation. In recent years, synthetic and natural polymers have
been investigated as biomaterials for a wide range of applications, including tissue
regeneration and tissue engineering. However, national biomaterials, for the most
varied applications, are not available, leading to dependence on external technology
and causing an expanding market to be discredited on the national scene. In this
sense, the present study aims to develop and characterize a new injectable scaffold
from Gigartina skottsbergii algae found in the Latin American continent, which
together with its bioproducts can be used in tissue engineering and cell therapy, with
initial application in the medical area. To do so, a gel was synthesized and processed
from G. Skottsbergii, which was analyzed and tested as a new scaffold. Thus, the
viability and cell adhesion capacity of the scaffold were evaluated using the WST-1
colorimetric assay, and scanning electron microscopy (SEM), against an
immortalized mouse embryonic fibroblast (NIH/3T3) cell line. Data evaluation was
performed using the two-way ANOVA followed by the Tukey test with a significance
level of p <0.05. In this sense, it is possible to observe the three-dimensional
structure of the G. skottsbergii algae, as well as the NIH/3T3 cells in this structure. It
is observed that the cells are in great quantity and strongly adhered to the algae
structure, maintaining an elongated morphology and with extensions. In relation to
the evaluation of the three-dimensional structure of the hydrogel from the G.
Skottsbergii algae and the morphology of the NIH/3T3 cells seeded on it, large areas
can be observed for the cellular adhesion, and laminar and filamentar structures that
interconnect are seen, adhered to this structure it is possible to observe NIH/3T3
cells with elongated morphology and extensions. Also, it is observed that there was a
greater cell viability in the group containing a 1/4 dilution of the gel from the G.
Skottsbergii algae with 5 hours and culture and also with 48 hours of culture.
Keywords: carrageenan, injectable hydrogel, Gigartina skottsbergii / A engenharia tecidual envolve tipicamente três componentes principais, os quais são
denominados de pilares da engenharia tecidual: células responsivas (ex. células
tronco), scaffolds e moléculas sinalizadoras (tais como proteínas e fatores de
crescimento). Os scaffolds são estruturas tridimensionais que proporcionam um
suporte para as células e servem de guia para a colonização, proliferação e
diferenciação celular. Nos últimos anos, polímeros sintéticos e naturais, vêm sendo
investigados como biomateriais para ampla gama de aplicações, incluindo
regeneração tecidual e engenharia de tecidos. No entanto, biomateriais nacionais,
para as mais variadas aplicações, não são disponíveis, levando à dependência de
tecnologia externa e fazendo com que um mercado em ampla expansão seja
desprestigiado no cenário nacional. Neste sentido, o presente estudo tem por
objetivo desenvolver e caracterizar um novo scaffold injetável proveniente da alga
rodofícea Gigartina skottsbergii encontrada no continente latino americano, o qual
juntamente com os seus bioprodutos possa ser empregado em engenharia tecidual
e terapia celular, com aplicação inicial na área médica. Para tanto, foi sintetizado e
processado um gel a partir da alga G. Skottsbergii, o qual foi analisado e testado
como um novo scaffold. Assim, foi avaliada a viabilidade e capacidade de adesão
celular do scaffold, utilizando-se o ensaio colorimétrico de WST-1 e microscopia
eletrônica de varredura (MEV), frente a uma linhagem celular imortalizada de
fibroblastos embrionários de rato (NIH/3T3). A avaliação dos dados foi realizada
utilizando a Análise de Variância (ANOVA) de duas vias seguido pelo teste de Tukey
com nível de significância de p<0,05. Neste sentindo, foi possível observar a
estrutura tridimensional da alga marinha, assim como o comportamento das células
NIH/3T3 frente a esta estrutura. Observa-se que as células encontram-se em grande
quantidade e fortemente aderidas a estrutura da alga, mantendo uma morfologia
alongada e com prolongamentos. Com relação a avaliação da estrutura
tridimensional do hidrogel proveniente da alga G. Skottsbergii e a morfologia das
células NIH/3T3 semeadas sobre este, foram ser observadas grandes áreas para a
adesão celular, onde são visualizadas estruturas laminares e filamentares que se
interconectam, aderido a esta estrutura é possível observar células NIH/3T3 com
morfologia alongada e prolongamentos. Alem disso, observou-se que houve uma
maior viabilidade celular no grupo que continha uma diluição de 1/4 do gel
proveniente da alga G. Skottsbergii com 5 horas e cultivo e com 48 horas de cultivo.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede.ucpel.edu.br:tede/668
Date08 December 2017
CreatorsROSA, Laísa Camerini da
ContributorsNEDEL, Fernanda, LEON, Priscila Marques Moura de, ZANINI, Luciana Olivares
PublisherUniversidade Catolica de Pelotas, Programa de Pos-Graduacao em Saude Comportamento#, #-1990782970254042025#, #600, UCPel, Brasil, Centro de Ciencias da Saude#, #-7432574962795991241#, #600
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações do UCpel, instname:Universidade Católica de Pelotas, instacron:UCPEL
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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