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Previous issue date: 2012-03-23 / Canine visceral leishmaniasis (CVL) is an important parasitic zoonosis endemic in Brazil, caused by the protozoa known as Leishmania infantum. In the urban area, the dogs are considered the main reservoir of this parasite. Thus, the importance of dogs in the urban environment has stimulated numerous studies for the assessment of diagnostic techniques. Among these studies, several have proposed the molecular tools (e.g. Polimerase Chain Reaction (PCR) and Real time PCR (qPCR)) as important methods for diagnosis of infection by L. infantum in dogs. However, little is known about the better biological samples used in these techniques, considering that several samples may be utilized (e.g. bone marrow, lymph node, spleen, skin). Hence, the aims of this study were i) to determine the performance of polymerase chain reaction (PCR) and real-time PCR (qPCR) in the diagnosis of CVL using different biological samples; ii) to quantify the parasite load in the skin, bone marrow, lymph node and spleen of dogs and relate the findings to clinical status. For such, infected dogs by L. infantum from an endemic area were utilized. Samples of bone marrow, lymph node, spleen and skin were collected by assessment of PCR and qPCR, and quantification of parasite load. In the present study, qPCR was able to detect a greater number of positive animals in comparison to PCR. No significant differences between biological samples were found in the detection of L. infantum DNA using PCR or qPCR. Considering the parasite load on different biological sample, it was not observed significative difference, on the other hand, among the clinical group was detected significative difference. The findings of the present study suggests that the parasite load on bone marrow, lymph node, spleen and skin is greater among those dogs with more clinical signs (parasite load on polysymptomatic animals > parasite load on oligosymptomatic animals > parasite load on asymptomatic animals). In addition, considering the easy of acquiring lymph node samples further demonstrates the greater viability of this biological material in the routine diagnosis of infection by L. infantum in dogs. / Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é uma importante zoonose parasitária endêmica no Brasil, causada pelo protozoário denominado Leishmania infantum. Em áreas urbanas, os cães são considerados os principais reservatórios deste parasito. Sendo assim, a importância destes animais no ambiente urbano tem estimulado a realização de numerosos estudos para avaliação de técnicas de diagnóstico. Entre os estudos, vários têm proposto ferramentas moleculares (ex. Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e PCR em tempo real (qPCR)) como importantes métodos para o diagnóstico da infecção por L. infantum em cães. No entanto, pouco se sabe sobre qual amostra biológica é mais viável, considerando que várias podem ser utilizadas (ex. medula óssea, linfonodo, baço, pele). Assim, os objetivos deste estudo foram: i) determinar o desempenho da PCR e qPCR no diagnóstico da LVC utilizando diferentes amostras biológicas; ii) quantificar a carga parasitária na medula óssea, linfonodo, baço e pele de cães relacionando-a com os sinais clínicos apresentados pelos animais. Para tanto, foram utilizados cães naturalmente infectados por L. infantum provenientes de uma área endêmica. Amostras de medula óssea, linfonodo, baço e pele foram coletadas para avaliação da PCR e qPCR, e quantificação da carga parasitária. No presente estudo, qPCR foi capaz de detectar um grande número de animais positivos em comparação da PCR. Não se observou diferença significativa entre as amostras biológicas na comparação da PCR e qPCR. Considerando a carga parasitária em diferentes amostras biológicas, não foi observada diferença significativa, por outro lado, de acordo com os diferentes grupos clínicos foi detectada diferença significativa. Os achados do presente estudo sugerem que a carga parasitária na medula óssea, linfonodo, baço e pele é maior nos animais que apresentam um maior número de sinais clínicos (carga parasitária nos animais polissintomáticos > carga parasitária nos animais oligossintomáticos > carga parasitária nos animais assintomáticos). Além disso, considerando a facilidade de obtenção, sugere-se o linfonodo como a amostra mais viável para a detecção molecular de L. infantum em cães.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2:tede2/4659 |
| Date | 23 March 2012 |
| Creators | RAMOS, Rafael Antônio do Nascimento |
| Contributors | ALVES, Leucio Câmara, SILVA, Gilcia Aparecida de Carvalho, FAUSTINO, Maria Aparecida da Glória, BARBOSA, Marco Antônio Granja |
| Publisher | Universidade Federal Rural de Pernambuco, Programa de Pós-Graduação em Biociência Animal, UFRPE, Brasil, Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE, instname:Universidade Federal Rural de Pernambuco, instacron:UFRPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -1510757014399315592, 600, 600, 600, -8922364187987396204, 453670264235017319 |
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