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Previous issue date: 2015-04-14 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Plaquetas são fragmentos celulares derivados dos megacariócitos, que desempenham papel na hemostasia, coagulação, angiogênese, inflamação e resposta imune. Na infecção humana pelo Vírus Dengue (DENV), plaquetas constituem uma das populações celulares mais afetadas devido à plaquetopenia e disfunção plaquetária. O objetivo deste trabalho foi investigar a influência de citocinas, quimiocina e fatores de crescimento séricos e de proteínas intraplaquetárias relacionadas à angiogênese, coagulação, regulação da matriz extracelular e inflamação na plaquetopenia de pacientes infectados pelo DENV. Para tal, realizamos: (i) estudo populacional de pacientes e obtenção de soro e plaquetas em 2013, (ii) ensaios multiplex de micrarranjo líquido para quantificação dos níveis séricos de citocinas, quimiocina e fatores de crescimento e (iii) ensaio de determinação do perfil de expressão 55 proteínas intraplaquetárias. Quarenta e três pacientes DENV foram confirmados, com predominância do DENV-4. Independente da forma clínica, pacientes DENV apresentaram níveis séricos elevados de IL-10, TNF-\03B1, CXCL8/IL-8, mas não de IL-1\03B2 e IFN-\03B3 quando comparados aos controles sadios. Análises estatísticas demonstraram que níveis de IL-10 e IFN-\03B3 apresentaram correlação, respectivamente inversa e direta com a contagem de plaquetas. Ainda, IL-10 diretamente com leucócitos e linfócitos e TNF-\03B1 com linfócitos
Vinte e cinco proteínas intraplaquetárias foram quantificadas, mas apenas cinco delas, PDGF-AA, TGF-\03B21, HGF, IGFBP-1 e Angiopoetina-1, apresentaram correlação direta com a contagem de plaquetas nos pacientes DENV. A quantificação sérica de PDGF e VEGF demostrou que ambos estavam diminuídos no grupo DENV mais trombocitopênico. Análise entre proteínas intraplaquetárias com funções biológicas antagônicas demonstraram que a razão anti- versus pró-inflamatórios TGF-\03B21/MIP-1\03B1 foi diminuída em pacientes DENV trombocitopênicos e as razões anti versus pró-angiogênica serpina F1/angiopoetina-1 e serpina F1/ PDGF-AB/BB apresentaram níveis aumentados em pacientes DENV trombocipênicos. Concluímos brevemente que a reintrodução do DENV-4 não resultou numa maior ocorrência de gravidade. Contudo esta reintrodução, induziu aumento dos níveis de TNF-\03B1 e CXCL8/IL-8 e da IL-10, influenciando de maneira direta ou indireta contagens de plaquetas e/ou demais células em resposta à infecção. Níveis IX intraplaquetários de PDGF, TGF-\03B21, IGFPB-1, Angiopoetina e HGF em pacientes mais trombocitopênicos poderiam prejudicar a ativação de mecanismos relacionados à angiogênese, coagulação, integridade do endotélio vascular e produção de mediadores inflamatórios. Assim, plaquetas poderiam ser consideradas células atuantes da resposta imunológica anti-DENV e, portanto, plaquetopenia é um fator prognóstico chave da imunopatogênese da dengue / Platelets are cell fragments derived from megakaryo
cytes, which play a role in hemostasis,
coagulation, angiogenesis, inflammation and immune
response. In human infection with dengue
virus (DENV), platelets are one of the most affecte
d cell populations due to thrombocytopenia
and platelet dysfunction. The objective of this stu
dy was to investigate the influence of serum
cytokines, chemokines, intraplatelet growth factors
and proteins related to angiogenesis,
coagulation, regulation of extracellular matrix and
inflammation in thrombocytopenia of patients
infected with DENV. For this purpose, we conducted:
(i) population study of patients and
obtaining their serum and platelets in 2013, (ii) l
iquid microarray multiplex assays for quantitation
of serum levels of cytokines, chemokine, and growth
factors, and (iii) assay for determining
expression profile of 55 intraplapletelet proteins.
Forty-three DENV patients were confirmed,
with a predominance of DENV-4. Regardless of type o
f DENV, levels of IL-10, TNF-
α
, CXCL8 /
IL-8, but not IL-1
β
and IFN-
γ
were higher on serum of patients compared to healt
hy individuals.
Statistical analyses showed that levels of IL-10 an
d IFN-
γ
presented correlation, respectively,
inverse and direct with platelet count. Furthermore
, IL-10 was directly correlated with
leukocytes, lymphocytes, TNF-
α
and with lymphocytes. Twenty-five intraplatelet pr
oteins were
quantified, but only five of them, PDGF-AA, TGF-
β
1, HGF, angiopoietin-1 and IGFBP-1 were
directly correlated with platelet count in DENV pat
ients. Both levels of PDGF and VEGF were
decreased in group of DENV thrombocytopenic. Analys
es between intraplatelet proteins with
antagonic biological functions have shown that rati
os anti- versus pro-inflammatory TGF-
β
1 /
MIP-1
α
were decreased in thrombocytopenic DENV patients a
nd the ratios anti-versus pro-
angiogenic serpin-F1 / angiopoietin-1 and serpin-F1
/ PDGF-AB / BB showed increased levels
in thrombocytopenic DENV patients. Briefly been con
cluded that the reintroduction of the DENV-
4 did not result in a higher incidence of gravity.
However, levels of TNF-
α
and CXCL8 / IL-8 and
IL-10 were increased, influencing directly or indir
ectly platelet counts and/or other cells in
response to infection. Levels of PDGF, TGF-
β
1, IGFPB-1, angiopoietin and HGF intraplatelet of
patients high thrombocytopenic may impair activatio
n of mechanisms related to angiogenesis,
coagulation, vascular endothelial integrity and pro
duction of inflammatory mediators. Thus,
platelets might be considered active anti-DENV immu
ne response cells and hence
thrombocytopenia is a key prognostic fator in the i
mmunopathogenesis of dengue.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/12112 |
| Date | January 2015 |
| Creators | Barros, Tamiris Azamor da Costa |
| Contributors | Bozza, Patricia Torres, Monteiro, Robson de Queiroz, Neves, Patrícia Cristina da Costa, Santos, Flávia Barreto dos, Almeida, Adilson José de, Pinto, Luzia Maria de Oliveira, Matos, Denise Cristina de Souza |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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