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Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Toxoplasma gondii causa uma infecção comumente assintomática, porém pode se apresentar de forma grave durante a gravidez e em pacientes imunocomprometidos. A terapia atual para a toxoplasmose é restrita contra taquizoítos, e possuem pouco ou nenhum efeito sobre bradizoítos, que são mantidos em cistos teciduais como fonte recrudescente da infecção. Com isso, novas alternativas terapêuticas vêm sendo propostas, como o uso da Atovaquona, que apresentou alguma eficácia sobre taquizoítos e bradizoítos em cistos teciduais. Neste trabalho, foi estudado o efeito de 3-BrPA, um composto utilizado em testes sobre células cancerígenas, durante a interação de células LLC-MK2 infectadas com taquizoítos da cepa RH de T. gondii. Quanto à célula hospedeira não se observou efeito do composto sobre a proliferação e viabilidade celular. A avaliação da interferência de 3-BrPA sobre o crescimento in vitro do T. gondii evidenciou uma redução na proliferação intracelular do parasito de cerca de 55% após 24 h de tratamento e 61% após 48 h
O desenvolvimento intracelular do parasito, analisado por MEV, apresentou características morfológicas comumente encontradas em cistos teciduais. A incubação das culturas com lectina DBA confirmou o desenvolvimento de cistos e por MET se evidenciou a presença de bradizoítos. Além disso, foram revelados parasitos degradados e a influência do composto sobre a endodiogenia. Outra abordagem adotada foi o tratamento de culturas infectadas com a combinação de 3-BrPA e Atovaquona, que resultou em uma redução de parasitos intracelulares de 73% após 24 h de tratamento e 71% após 48 h, em comparação ao controle, além da ausência da formação de parede cística nessas culturas. Conclui-se, portanto, que a utilização de 3-BrPA pode se apresentar como uma importante ferramenta para o estudo:(i) da cistogênese in vitro;(ii)do metabolismo do parasito, necessitando de maior aprofundamento do alvo de ação do composto em T. gondii;(iii) das vias metabólicas alternativas do parasito, e (iv) dos mecanismos moleculares/celulares desencadeados que levaram a morte dos parasitos / Toxoplasma gondii
usually causes an asymptomatic infection, but it can present severity
during pregnancy and in immunocompromised
patients
.
Current therapies for
toxoplasmosis are restricted
only against tachyzoites, and have
little or no effect on
bradyzoites, which are kept in tissue cysts like source of the infection recrudescent.
Consequently, new therapeutic alternatives have been proposed, as the use of
Atovaquone that showed some effica
cy against tachyzoites and bradyzoites in tissue
cysts. In this work, we propose to study the effect of 3
-
BrPA,
a
compound
that is being
tested
against
cancer cells, on
the infection of
LLC
-
MK
2
cells with tachyzoites of
T.
gondii
(RH strain)
.
N
o effect of
3
-
BrPA
on
host
cell proliferation and viability was
observed. Evaluation of 3
-
BrPA interference on
in vitro
growth of
T. gondii
showed a
reduction in intracellular parasite proliferation about 55% after 24 h of treatment, and
61% after 48 h. Intracellular d
evelopment of parasite, analyzed by SEM, showed
morphological characteristics commonly found in tissue cysts. Incubation of cultures
with DBA lectin confirmed the development of cysts and TEM showed the presence of
bradyzoites. Moreover, we revealed the pr
esence of degraded parasites and the
influence of compound on endodyogeny. Another approach used was the treatment of
infected cultures with combination of 3
-
BrPA and Atovaquone.
This r
esulted in
the
reduction of intracellular parasites of 73% after 24 h o
f treatment and 71% after 48 h,
compared to control, besides the absence of cyst wall formation in these cultures.
The
refore, it is concluded that
use of 3
-
BrPA may pres
ent as an important tool for
study
of: (i)
in vitro
c
ystogenesis
, (ii) the metabolism o
f the parasite, requiring deeper
understanding of the target of action of the compound in
T. gondii
, (iii) the alternatives
metabolic pathways of the parasite, and (iv) the molecular / cellular triggered that led to
death of the parasites mechanisms.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/13486 |
| Date | January 2014 |
| Creators | Lima, Loyze Paola Oliveira de |
| Contributors | Castro, Solange Lisboa de, Stumbo, Ana Carolina, Vommaro, Rossiane Claudia, Carvalho, Laís de, Adesse, Daniel, Barbosa, Helene Santos |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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