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Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / No Brasil o controle das formas aladas do vetor de dengue, o mosquito Aedes aegypti, é feito com inseticidas
da classe dos piretróides. Porém, apesar da recente utilização deste composto em escala nacional, várias
populações do vetor já estão resistentes. O canal de sódio regulado por voltagem, no sistema nervoso do
inseto, é a molécula-alvo de piretróides. Investigamos, em populações brasileiras de Ae. aegypti, a
diversidade molecular em uma região deste gene (AaNaV) com o objetivo de identificar potenciais alterações
relacionadas à resistência. Clonagem e sequenciamento da região genômica entre os exons 20 e 21 do
AaNaV de indivíduos de cinco localidades distintas, confirmaram polimorfismo no íntron e em dois sítios do
exon 20 que geram substituições sinônimas. De acordo com estas características, as sequências foram
agrupadas em tipos A ou B. Observamos ainda mutações causando substituições de aminoácidos: Ile
Met no sítio 1011 e Val Ile no sítio 1016, somente em sequências do tipo A. Indivíduos da cepa
Rockefeller, referência de susceptibilidade, apresentaram apenas sequências do tipo B e os alelos selvagens
nas duas posições, 1011 ou 1016. Tipagem molecular por PCR alelo-específica em indivíduos de 15
localidades revelou que a mutação Ile1011Met está disseminada por todo país, diferentemente da
Val1016Ile, concentrada nas regiões mais ao centro. Nas cinco localidades onde os indivíduos avaliados
foram divididos em resistentes e susceptíveis, o alelo mutante 1016Ile esteve significativamente mais
presente nos resistentes, principalmente quando em homozigose, indicando o caráter recessivo da mutação
para a resistência. Surpreendentemente, uma série de observações sugeriu a ocorrência de polimorfismo
envolvendo uma duplicação gênica, de forma que o haplótipo duplicado estaria constituído de uma sequência
do tipo B ligada à outra do tipo A com a mutação 1011Met. Corroborou esta hipótese a tipagem do sítio 1011
na prole de cruzamentos com genótipos determinados. Finalmente, comparação entre linhagens mantidas
na presença ou na ausência de pressão de seleção com piretróide, em laboratório, sugeriu efeitos
pleiotrópicos negativos da resistência em aspectos do desenvolvimento e da reprodução destes mosquitos / In Brazil, control of adults of the dengue vector, the mosquito Aedes aegypti, is performed with pyrethroid
insecticides. However, despite the recent implementation of this compound in national scale, several
populations of this vector are already resistant. The voltage gated sodium channel is the pyrethroid target
site, in the insect nervous system. We investigated the molecular diversity of a particular region of this gene
(AaNaV) in Ae. aegypti Brazilian populations in order to identify potential substitutions implicated with
insecticide resistance. Cloning and sequencing of the genome region between the AaNaV exons 20 and 21 in
individuals from five distinct localities, confirmed polymorphism in the intron and in two positions of exon 20,
these latter related to synonymous substitutions. According to these characteristics sequences were grouped
into types A or B. Two additional predictive substitutions were noted: Ile Met and Val Ile, respectively, in
1011 and 1016 sites, both only in type A sequences. Individuals from the Rockefeller insecticide susceptible
reference strain exhibited only type B sequences and the wild alleles on both 1011 and 1016 positions. Allelespecific PCR molecular typing of individuals from 15 localities showed that the Ile1011Met mutation is
widespread throughout Brazil, whereas Val1016Ile is more proeminent toward the middle of the country. In
five localities typing was performed separately in susceptible or resistant individuals; the mutant 1016Ile allele
was significantly more present in the resistant ones, especially in homozygozity, suggesting the recessive
character of this resistant mutation. Surprisingly, a series of observations suggested the occurrence of a gene
duplication consisting of both type B and A sequences this last one with the 1011Met mutation. Typing of the
1011 site in the offspring of couples with specific genotypes corroborated this hypothesis. Finally,
comparisons among lineages selected or not with pyrethroid suggested negative pleiotropic effects of
resistance on development and reproduction aspects.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/4276 |
| Date | January 2009 |
| Creators | Martins Junior, Ademir de Jesus |
| Contributors | Oliveira, Ricardo Lourenço de, Genta, Fernando Ariel, Rios, Ricardo Iglesias, Sorgine, Marcos Henrique Ferreira, Braga, Ima Aparecida, Valle, Denise, Peixoto, Alexandre Afrânio |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | Ademir de Jesus Martins Junior, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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