PEREIRA, E. S. Expressão gênica de Streptococcus mutans em biofilmes produzidos in vitro submetidos à terapia fotodinâmica antimicrobiana. 2011. 70f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2011. / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-06-27T14:40:07Z
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Previous issue date: 2011 / The early stages of the formation of caries lesions in humans are directly related to the
presence of Streptococcus mutans in biofilm. The treatment of diseases caused by oral
biofilms basically involves mechanical removal and use of antibiotics and antiseptic
agents which may lead to strains resistant to traditional antimicrobials. Antimicrobial
Photodynamic Therapy (PACT) presents itself as an alternative option to conventional
treatment, promoting bacterial killing by photosensitizing of microbial components. The
objective of this study was to evaluate the antimicrobial potential of PACT and its
ability to alter the pattern of gene expression of S. mutans in oral biofilms produced in
vitro using both a LED light (LED) associated with the photosensitizer ortho-toluidine
blue ( TBO). To this end, S. mutans UA159 biofilms were formed on hydroxyapatite
discs using a model of bathing culture and were subjected to PACT after 5 days. The
collected material has gone through sonication for dispersion and dilution of cells in
decimal series. After that, material was plated in rich medium and incubated under
optimum growth conditions. Additionally, expression of virulence gtfB, and gtfC gbpB
genes of S. mutans were evaluated after extraction of total RNA, cDNA synthesis and
realization of the technique of polymerase chain reaction in real time using specific
primers. The 16S ribosomal gene was used as the reference gene. Significant reductions
(p <0.05) were observed in the viability of colonies of S. mutans when exposed to TBO
and LED at the same time. Gene expression of gtfC in S. mutans biofilm was
significantly reduced after the completion of antimicrobial photodynamic therapy,
whereas expression of gtfB seems to have been less influenced by therapy. No change in
the expression of gbpB a function of antimicrobial photodynamic therapy was observed.
Therefore, further studies are needed to evaluate the action of antimicrobial
photodynamic therapy in conditions more like those found in the clinical environment
and to encourage understanding of their effects on the expression of important virulence
of S. mutans genes. / Os estágios iniciais da formação das lesões de cárie em humanos estão relacionados diretamente com a presença de Streptococcus mutans no biofilme dental. O tratamento das doenças ocasionadas por biofilmes orais envolve basicamente a remoção mecânica e o uso
de antibióticos e agentes anti-sépticos os quais podem originar cepas resistentes aos antimicrobianos tradicionais. A Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFDA) apresenta-se como uma opção alternativa ao tratamento clássico, promovendo a morte bacteriana por meio da fotossenssibilização dos componentes microbianos. O objetivo dessa dissertação foi avaliar o potencial antimicrobiano da TFDA e sua capacidade de alterar o padrão de expressão gênica de Streptococcus mutans em biofilmes orais produzidos in vitro utilizando para tanto um diodo emissor de luz (LED) associado ao fotossenssibilizador azul de orto-toluidina (TBO). Para tanto biofilmes de .S. mutans UA159, foram formados sobre discos de hidroxiapatita utilizando um modelo de banhos de cultura e submetidos a TFDA após 5 dias. O material coletado passou por um processo de disrrupção para a dispersão das células e diluição em série decimal, após o que foi plaqueado em meio de cultura e incubado em condições ideais de crescimento. Adicionalmente, e expressão dos genes de virulência gtfB, gtfC e gbpB
de S. mutans foram avaliados após a extração do RNA total, síntese de cDNA e realização da técnica da reação da polimerase em cadeia em tempo real utilizando primers específicos. O gene ribossomal 16S foi utilizado com gene de referência. Reduções significativas (p<0,05) foram observadas na viabilidade das colônias de S. mutans quanto exposto ao TBO e LED. A expressão gênica de gtfC em biofilme de S. mutans foi significantemente reduzida após a realização da terapia fotodinâmica antimicrobiana enquanto a expressão de gtfB parece ter sido menos influenciada pela terapia. Não houve alterações na expressão de gbpB em função da terapia fotodinâmica antimicrobiana. Assim, outros estudos são necessários para avaliar ação da terapia fotodinâmica antimicrobiana em condições mais semelhantes daquelas encontradas no ambiente clínico, bem como para favorecer o de seus efeitos na expressão de importantes genes de virulência de S. mutans
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.repositorio.ufc.br:riufc/17980 |
| Date | January 2011 |
| Creators | Pereira, Eliane dos Santos |
| Contributors | Zanin, Iriana Carla Junqueira |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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