Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / IntroduÃÃo: LesÃes gÃstricas relacionadas ao consumo excessivo de antiinflamatÃrios nÃo esteroidais (AINEs) e etanol possuem um importante papel na gastroenterologia clÃnica. FÃrmacos com aÃÃo anti-secretÃria gÃstrica, como os inibidores da bomba de prÃtons, representam a principal opÃÃo na terapia destas patologias. Objetivo: Avaliar o efeito do doador de NO nitrosil-rutÃnio (Rut-NO) na defesa da mucosa gÃstrica em modelos experimentais de lesÃo gÃstrica em camundongos e a participaÃÃo da guanilato ciclase solÃvel (GCs) e dos canais de KATP neste efeito. MÃtodos: Protocolo1- Camundongos swiss foram prÃ-tratados com Rut-NO (3mg/Kg, v.o), rutÃnio (2.3mg/Kg, v.o) ou nitroprussiato (NPS) na dose de 10mg/kg, v.o, meia hora antes da administraÃÃo por gavagem de etanol 50%. Em outro grupo, os animais foram prÃ-tratados com ODQ (10mg/Kg, v.o) ou glibenclamida (10mg/Kg, i.p) trinta minutos ou 1h antes, respectivamente dos tratamentos citados anteriormente. Depois de 1h, os animais foram sacrificados e os estÃmagos removidos para a avaliaÃÃo das lesÃes gÃstricas por planimetria computadorizada. AlÃm disso, fragmentos de tecido foram removidos para anÃlise microscÃpica e dosagem de glutationa (GSH) e malondialdeÃdo (MDA). Protocolo2- Camundongos foram prÃ-tratados com Rut-NO (3mg/Kg, v.o), rutÃnio (2.3mg/Kg, v.o) ou nitroprussiato (10mg/kg, v.o) trinta minutos antes da administraÃÃo, por gavagem, do naproxeno (NPX-300mg/Kg). Em outro grupo, os animais foram prÃ-tratados com ODQ (10mg/Kg, v.o) ou glibenclamida (10mg/Kg, i.p) trinta minutos ou 1h antes, respectivamente dos tratamentos citados anteriormente. Depois de 6h, os animais foram sacrificados e os estÃmagos removidos para a avaliaÃÃo das lesÃes gÃstricas, utilizando um paquÃmetro digital. Amostras da mucosa gÃstrica desses animais foram retiradas para dosagem de MPO e das citocinas TNF-α e IL-1β e para anÃlise microscÃpica. A adesÃo dos leucÃcitos foi avaliada por microscopia intravital nos grupos Rut-NO e RutÃnio. Para o estudo da atividade anti-secretÃria gÃstrica outros grupos de animais foram tratados com Rut-NO (3mg/Kg); RutÃnio(2.3mg/Kg) ou omeprazol (10mg/Kg) 1 h antes da cirurgia de ligadura do piloro, 4h depois os animais foram sacrificados, os estÃmagos foram removidos e o suco gÃstrico coletado para verificaÃÃo do volume e da acidez, uma aliquota do suco gÃstrico dos grupos Rut-NO e rutÃnio foi retirada para dosagem de nitrito. Resultados: No modelo de gastropatia por etanol a administraÃÃo de Rut-NO ou NPS, mas nÃo o grupo rutÃnio preveniu a lesÃo por etanol. Essa proteÃÃo foi acompanhada do aumento de GSH e diminuiÃÃo dos nÃveis gÃstricos de MDA quando comparado ao grupo tratado apenas com etanol. ODQ (10mg/Kg) e glibenclamida (10mg/Kg) reverteram completamente esse efeito protetor do Rut-NO e do NPS. No modelo de lesÃo gÃstrica por NPX a administraÃÃo de Rut-NO ou NPS, mas nÃo o grupo rutÃnio preveniu a lesÃo por NPX, diminuindo os nÃveis de MPO e das citocinas TNF-α e IL-1β e a adesÃo dos neutrÃfilos induzida pelo NPX. Rut-NO nÃo alterou a secreÃÃo acida gÃstrica. ConclusÃo: O Rut-NO preveniu a lesÃo gÃstrica, o consumo de GSH e aumento da peroxidaÃÃo lipÃdica induzidos pelo etanol, alÃm disso, tambÃm diminuiu os nÃveis de MPO e das citocinas TNF-α e IL-1β, preveniu a lesÃo gÃstrica e diminuiu a adesÃo neutrofÃlica induzidos pelo NPX. O mecanismo de aÃÃo gastroprotetor do nitrosil-rutÃnio parece ser dependente da via NO/GCs/KATP. Nitrosil-rutÃnio apresentou uma atividade gastroprotetora semelhante a do doador de NO padrÃo nitroprussiato. / Introduction: Gastric lesions associated to excessive consumption of nonsteroidal anti- inflammatory drugs (NSAIDs) and ethanol have an important role in clinical gastroenterology. The drugs with gastric antisecretory action, such as proton pump inhibitors, represent the main option in the treatment of these pathologies. Aim: To evaluate the effect of NO donor nitrosyl-ruthenium (Rut-NO) in gastric mucosal defense in experimental models of gastric damage in mice, as wellthe involvement of soluble guanylate cyclase (sGC) and KATP channels in this effect. Methods: Protocol 1-mice were pre-treated with Rut-NO (3mg/Kg, vo), ruthenium (2.3mg/Kg, p.o) or nitroprusside (SNP) at a dose of 10mg/kg, p.o, half an hour before administration by gavage of 50% ethanol. In another group, the animals were pre- treated with ODQ (10mg/kg, po) or glibenclamide (10mg/kg, ip) thirty minutes or 1 hour prior, respectively, the treatments mentioned above. After 1h, the animals were sacrificed and the stomachs removed for evaluation of gastric lesions by computerized planimetry. In addition, fragments of tissue were removed for microscopic analysis and measurement of glutathione (GSH) and malondialdehyde (MDA) levels. Protocol 2-mice were pretreated with Rut-NO (3mg/kg, po), ruthenium (2.3mg/Kg, po) or nitroprusside (10mg/kg, po) thirty minutes before administration by gavage of naproxen (NPX -300mg/Kg). In another group, the animals were pretreated with ODQ (10mg/kg, po) or glibenclamide (10mg/kg, ip) thirty minutes or 1 hour prior, respectively, the treatments mentioned above. After 6h, the animals were sacrificed and the stomachs removed for evaluation of gastric lesions using a digital caliper. Samples of gastric mucosa of these animals were removed for measurement of MPO and cytokines TNF-α and IL-1β and microscopic analysis. The adhesion of leukocytes of Rut- NO and Ruthenium groups was assessed by intravital microscopy.To study the gastric anti- secretory activity other groups of animals were treated with Rut-NO (3mg/Kg), Ruthenium (2.3mg/Kg) or omeprazole (10mg/Kg) 1 h before the pylorus ligation surgery, 4h later the animals were sacrificed, the stomachs were removed and gastric juice collected in order to verify the volume and acidity, an aliquot of gastric juice of Rut-NO and ruthenium groups were colected for nitrite determination. Results: In the model of gastropathy induced by ethanol administration Rut-NO or SNP, but not the ruthenium group, prevented the gastric injury. This protection was accompanied by an increase of GSH and decreased levels of gastric MDA when compared to the group treated only with ethanol. ODQ (10mg/Kg) and glibenclamide (10mg/Kg) completely reversed this protective effect of Rut-NO and SNP. In the model of gastric injury induced by NPX, Rut-NO or SNP, but not the group ruthenium, prevented NPX injury by lowering the levels of MPO, TNF-α, IL-1β and neutrophil adhesion. Rut-NO did not alter the acid gastric secretion. Conclusion: Rut-NO prevented the gastric lesion, the consume of GSH and the increased lipid peroxidation induced by ethanol. Rut-NO also decreased the MPO and cytokines levels, prevented the gastric lesions and decreased neutrophil adhesion induced by NPX. The gastroprotective mechanism of action of nitros ruthenium is dependent of the NO/sGC/KATP pathway. Nitrosyl-ruthenium showed a gastroprotective activity similar to the standard NO donor sodium nitroprusside.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:11107 |
| Date | 28 February 2013 |
| Creators | Ana Paula MacÃdo Santana |
| Contributors | Marcellus Henrique Loiola Ponte de Souza, Ronaldo de Albuquerque Ribeiro, Nylane Maria Nunes de Alencar, Nilberto Robson FalcÃo do Nascimento, Jand-Venes Rolim Medeiros |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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