CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / The Myelodysplastic Syndrome (MDS) comprises a heterogeneous group of clonal diseases with complex pathogenesis, involving several phases and factors. TP53 gene mutations have been involved in progenitor cell homeostasis alterations with an impact on relevant functions in the development of neoplasms, such as genomic integrity maintenance, cell cycle regulation, apoptosis and inflammatory response. The aim of the study was to investigate the impact of the p53 protein expression, TP53 gene mutations and the R72P polymorphism on patients with low-risk MDS, associating them with clinical markers and prognostic scores and their applicability as an additional criterion to support hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) indication. This is an analytical and prospective study involving 73 patients, of both genders, stratified as low risk, followed at the Outpatient Clinic of Walter CantÃdio University Hospital (HUWC) from February 2012 to August 2016. The p53 protein expression was assessed by immunohistochemistry, whereas the mutations and the R72P polymorphism were analyzed by direct sequencing. The statistical analysis used the GraphPad Prism 5.0 software and the significance level was set at p <0.05. Of the 73 patients who participated in the study, 20 (27.4%) were positive for the p53 protein expression. In the group with p53 expression, there was a significant reduction in hemoglobin and hematocrit levels, with increased frequency of fibrosis, hypercellularity and CD34 positivity in megakaryocytes. Of the 73 patients, 35 were screened for mutations in the TP53 gene and R72P polymorphism. Two mutations were identified in the study population, with a frequency of 5.7%. A nonsense mutation was identified for the first time in MDS in a female patient and a missense mutation, not yet reported in the literature, in a male patient. As for the R72P polymorphism, there was a predominance of the G allele and the GG genotype. All patients with "heterozygous" (CG) genotype were males. There was no association between mutations, polymorphism genotypes and clinical and prognostic parameters. During the study follow-up, two patients had indication for hematopoietic stem cell transplantation. One of them was positive for p53 in 40% of granulocytic precursors and died six months after the diagnosis. The second, who was negative for p53 expression and TP53 mutation, was submitted to HSCT and is in a stable condition. The results showed that p53 expression can influence clinical evolution and is associated with poor prognosis even in low-risk patients, reflecting the complexity of MDS and providing subsidies for further studies aiming to clarify the impact of the TP53 gene and the protein expression on the disease origin, progression and its therapeutic management, including HSCT. / A SÃndrome MielodisplÃsica (SMD) compreende um conjunto heterogÃneo de doenÃas clonais com a patogÃnese complexa, que envolve vÃrias etapas e fatores. As mutaÃÃes no gene TP53 tÃm sido implicadas em alteraÃÃes na homeostase de cÃlulas progenitoras, com impacto em funÃÃes relevantes no desenvolvimento de neoplasias, como manutenÃÃo da integridade genÃmica, regulaÃÃo do ciclo celular, apoptose e resposta inflamatÃria. O objetivo do estudo foi investigar o impacto da expressÃo da proteÃna p53, mutaÃÃes no gene TP53 e do polimorfismo R72P em pacientes com SMD de baixo risco associando-os aos marcadores clÃnicos e com escores prognÃsticos e a sua aplicabilidade como critÃrio adicional para auxiliar a indicaÃÃo do TCTH. Trata-se de um estudo analÃtico e prospectivo envolvendo 73 pacientes, de ambos os sexos estratificados como de baixo risco, em acompanhamento no ambulatÃrio do Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio (HUWC), no perÃodo de fevereiro de 2012 a agosto de 2016. A expressÃo da proteÃna p53 foi avaliada por imunohistoquÃmica, as mutaÃÃes e o polimorfismo R72P foram analisados por sequenciamento direto. A anÃlise estatÃstica utilizou o programa GraphPad Prism 5.0 e considerou o nÃvel de significÃncia do p<0,05. Dos 73 pacientes que participaram do estudo, 20 (27,4%) foram positivos para a expressÃo da proteÃna p53. No grupo com expressÃo de p53 houve significativa reduÃÃo dos nÃveis de hemoglobina e hematÃcrito com aumento da frequÃncia de fibrose, hipercelularidade e positividade CD34 em megacariÃcitos. Dos 73 pacientes, 35 foram analisados quanto a pesquisa da mutaÃÃo do TP53 e do polimorfismo R72P. Foram identificadas duas mutaÃÃes na populaÃÃo em estudo, com uma frequÃncia de 5,7%. Uma mutaÃÃo nonsense foi identificada pela primeira vez na SMD, em um paciente do sexo feminino e uma mutaÃÃo missense, ainda nÃo descrita na literatura, em um paciente do sexo masculino. Quanto ao polimorfismo R72P, houve uma predominÃncia do alelo G e do genÃtipo GG. Todos os pacientes com o genÃtipo âheterozigotoâ (CG) foram do sexo masculino. NÃo houve associaÃÃo entre as mutaÃÃes, os genÃtipos do polimorfismo e as variÃveis clÃnicas e de prognÃstico. Durante o seguimento do estudo, dois pacientes apresentaram indicaÃÃo para o transplante de cÃlulas tronco hematopoiÃticas. Um deles foi positivo para p53 em 40% dos precursores granulocÃticos e foi a Ãbito seis meses apÃs o diagnÃstico. O segundo, negativo para a expressÃo de p53 e mutaÃÃo TP53, foi submetido ao TCTH, e encontra-se estÃvel. Os resultados mostraram que a expressÃo de p53 pode influenciar evoluÃÃo clÃnica e està associada a pior prognÃstico, mesmo em pacientes de baixo risco refletindo a complexidade da SMD e fornecendo subsÃdios para novos estudos, a fim de esclarecer o impacto do gene TP53 e da expressÃo da proteÃna na origem, na progressÃo da doenÃa e na conduta terapÃutica, incluindo o TCTH.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:11630 |
| Date | 11 October 2016 |
| Creators | Fernando Barroso Duarte |
| Contributors | Paulo Roberto LeitÃo de Vasconcelos, Maria da Silva Pitombeira, Francisco DÃrio Rocha Filho, LUCIA MARIANO DA ROCHA SILLA, SÃrgio Botelho GuimarÃes |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Cirurgia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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