Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / IntroduÃÃo/objetivos: O acidente vascular cerebral isquÃmico precipita uma cascata de eventos que envolvem excitotoxicidade, inflamaÃÃo, estresse oxidativo e morte celular. A curcumina tem demonstrado efeitos neuroprotetores, com propriedades antioxidantes e antiinflamatÃrias. Sendo assim, objetivou-se estudar estes efeitos da curcumina em modelo experimental de isquemia cerebral global em ratos em desenvolvimento. MÃtodos: O tratamento de ratas Wistar foi iniciado 24h apÃs o nascimento dos filhotes, durante 21 dias, com curcumina (25, 50 ou 100 mg/kg/dia, v.o.) ou Ãgua+Cremophor 1% (10 ml/kg). No 21 dia de vida os ratos foram anestesiados com Ketamina (75 mg/kg, i.p.) e Xilazina 2% (10 m/kg, i.p.) e submetidos à isquemia cerebral global durante 15 min, reperfusÃo pelo mesmo tempo, seguida de corte da carÃtida esquerda. 24 h apÃs iniciou-se o tratamento dos filhotes com curcumina durante 3 ou 7 dias consecutivos. Animais tratados durante 7 dias realizaram os testes comportamentais, campo aberto e labirinto aquÃtico, para avaliar a atividade locomotora e memÃria espacial, respectivamente. Grupos de animais com 3 ou 7 dias apÃs a isquemia foram eutanasiados e o corpo estriado, cÃrtex e hipocampo foram dissecados. O corpo estriado foi utilizado na preparaÃÃo de homogenatos para dosagem de monoaminas e metabÃlitos (DA, DOPAC, NE) em HPLC. Homogenatos de hipocampo e cÃrtex foram preparados para dosar os nÃveis de nitrito e malondialdeÃdo (MDA). Fatias de hipocampo foram separadas para a coloraÃÃo com o Fluoro-Jade B e imunohistoquÃmica (iNOS, COX-2, TNF-). Resultados: A isquemia cerebral reduziu a atividade locomotora em ratos e o tratamento com curcumina reverteu este efeito; assim como o que ocorreu com a memÃria espacial que foi reduzida pela isquemia. A lesÃo no corpo estriado refletiu em reduÃÃo nos nÃveis de monoaminas e estes valores foram aumentados com uso da curcumina 3 e 7 dias apÃs a cirurgia e de maneira dose-dependente no 3 dia. Os nÃveis de MDA e nitrito foram significativamente aumentados em cÃrtex e hipocampo, 3 e 7 dias apÃs a isquemia cerebral global, quando comparados aos grupos falso operados. O tratamento com curcumina protegeu estas Ãreas de maneira significativa somente no 3 dia pÃs-isquemia, nas doses de 50 e 100 mg/kg. No 7 dia, os melhores resultados foram obtidos com a dose de 25 mg/kg. AlÃm disso, houve uma diminuiÃÃo nas cÃlulas imunocoradas para iNOS, COX-2 e TNF- nos grupos tratados com curcumina em comparaÃÃo com o grupo isquemiado. Assim como reduÃÃo de cÃlulas Fluoro-Jade B positivas. ConclusÃo: O tratamento prÃvio das mÃes durante o perÃodo de lactaÃÃo bem como o tratamento subcrÃnico dos filhotes com a curcumina exerceu propriedades neuroprotetoras contra os danos causados pela isquemia cerebral global mais reperfusÃo. Estes efeitos refletiram na melhora da atividade locomotora e memÃria. Esta atividade foi observada atravÃs de aÃÃes antiinflamatÃrias e antioxidantes da curcumina, principalmente 3 dias apÃs o evento isquÃmico. Estas aÃÃes foram confirmadas com a inibiÃÃo da COX-2, iNOS, reduÃÃo de citocinas prÃ-inflamatÃrias, como TNF-. AlÃm disso, neurÃnios foram preservados no hipocampo, o que pÃde ser visto atravÃs da coloraÃÃo com Fluoro-jade B, visualizada atravÃs de fluorescÃncia verde. / IntroduÃÃo/objetivos: O acidente vascular cerebral isquÃmico precipita uma cascata de eventos que envolvem excitotoxicidade, inflamaÃÃo, estresse oxidativo e morte celular. A curcumina tem demonstrado efeitos neuroprotetores, com propriedades antioxidantes e antiinflamatÃrias. Sendo assim, objetivou-se estudar estes efeitos da curcumina em modelo experimental de isquemia cerebral global em ratos em desenvolvimento. MÃtodos: O tratamento de ratas Wistar foi iniciado 24h apÃs o nascimento dos filhotes, durante 21 dias, com curcumina (25, 50 ou 100 mg/kg/dia, v.o.) ou Ãgua+Cremophor 1% (10 ml/kg). No 21 dia de vida os ratos foram anestesiados com Ketamina (75 mg/kg, i.p.) e Xilazina 2% (10 m/kg, i.p.) e submetidos à isquemia cerebral global durante 15 min, reperfusÃo pelo mesmo tempo, seguida de corte da carÃtida esquerda. 24 h apÃs iniciou-se o tratamento dos filhotes com curcumina durante 3 ou 7 dias consecutivos. Animais tratados durante 7 dias realizaram os testes comportamentais, campo aberto e labirinto aquÃtico, para avaliar a atividade locomotora e memÃria espacial, respectivamente. Grupos de animais com 3 ou 7 dias apÃs a isquemia foram eutanasiados e o corpo estriado, cÃrtex e hipocampo foram dissecados. O corpo estriado foi utilizado na preparaÃÃo de homogenatos para dosagem de monoaminas e metabÃlitos (DA, DOPAC, NE) em HPLC. Homogenatos de hipocampo e cÃrtex foram preparados para dosar os nÃveis de nitrito e malondialdeÃdo (MDA). Fatias de hipocampo foram separadas para a coloraÃÃo com o Fluoro-Jade B e imunohistoquÃmica (iNOS, COX-2, TNF-). Resultados: A isquemia cerebral reduziu a atividade locomotora em ratos e o tratamento com curcumina reverteu este efeito; assim como o que ocorreu com a memÃria espacial que foi reduzida pela isquemia. A lesÃo no corpo estriado refletiu em reduÃÃo nos nÃveis de monoaminas e estes valores foram aumentados com uso da curcumina 3 e 7 dias apÃs a cirurgia e de maneira dose-dependente no 3 dia. Os nÃveis de MDA e nitrito foram significativamente aumentados em cÃrtex e hipocampo, 3 e 7 dias apÃs a isquemia cerebral global, quando comparados aos grupos falso operados. O tratamento com curcumina protegeu estas Ãreas de maneira significativa somente no 3 dia pÃs-isquemia, nas doses de 50 e 100 mg/kg. No 7 dia, os melhores resultados foram obtidos com a dose de 25 mg/kg. AlÃm disso, houve uma diminuiÃÃo nas cÃlulas imunocoradas para iNOS, COX-2 e TNF- nos grupos tratados com curcumina em comparaÃÃo com o grupo isquemiado. Assim como reduÃÃo de cÃlulas Fluoro-Jade B positivas. ConclusÃo: O tratamento prÃvio das mÃes durante o perÃodo de lactaÃÃo bem como o tratamento subcrÃnico dos filhotes com a curcumina exerceu propriedades neuroprotetoras contra os danos causados pela isquemia cerebral global mais reperfusÃo. Estes efeitos refletiram na melhora da atividade locomotora e memÃria. Esta atividade foi observada atravÃs de aÃÃes antiinflamatÃrias e antioxidantes da curcumina, principalmente 3 dias apÃs o evento isquÃmico. Estas aÃÃes foram confirmadas com a inibiÃÃo da COX-2, iNOS, reduÃÃo de citocinas prÃ-inflamatÃrias, como TNF-. AlÃm disso, neurÃnios foram preservados no hipocampo, o que pÃde ser visto atravÃs da coloraÃÃo com Fluoro-jade B, visualizada atravÃs de fluorescÃncia verde. / Introduction/Objectives: The ischemic stroke precipitates a cascade of events that involve excitotoxicity, inflammation, oxidative stress and cell death. Curcumin has demonstrated neuroprotective effects, with antioxidant and antiinflammatory properties. Therefore, we aimed to study these effects of curcumin on experimental model of global cerebral ischemia in rats under development. Methods: Wistar female rats treatment began 24 hours after the birth of pups, during 21 days, with curcumin (25, 50 or 100 mg/kg/day, p.o.) or water + 1% Cremophor (10 ml/kg). In 21 day old rats were anesthetized with Ketamine (75 mg/kg, i.p.) and xylazine (10 m/kg, i.p.) and subjected to the global cerebral ischemia for 15 min, reperfusion at the same time, followed the left carotid cut. 24 h after surgery, pups started treating for 3 or 7 consecutive days. The animals treated for 7 days underwent behavioral tests, open field and water maze, to assess the locomotor activity and spatial memory, respectively. Groups of animals with 3 or 7 days after ischemia were sacrificed and the striatum, cortex and hippocampus were dissected. The striatum was used in homogenates preparation to monoamine and metabolites (DA, DOPAC, NS) dosing on HPLC. Homogenates from the hippocampus and cortex were prepared to test the antioxidant activity, 3 and 7 days post-ischemia, to nitrite and malondialdehyde (MDA) dosing. Hippocampal slices were separated for staining with Fluoro-Jade B and immunohistochemistry (iNOS, COX-2, TNF-). Results: Cerebral ischemia reduced the locomotor activity in rats and the treatment with curcumin reversed this effect; just like what happened with the special memory that was recovered after curcumin treatment in the three doses used. The striatum lesion reflected in a reduction in the levels of monoamines and these values were increased with the use of curcumin 3 and 7 days after surgery dose-dependent manner on day 3. MDA and nitrite levels were significantly increased in cortex and hippocampus, 3 and 7 days after global cerebral ischemia, when compared to the false-operated groups. The treatment with curcumin significantly protected these areas only at 3 days post-ischemia, in the doses of 50 and 100 mg/kg. On the 7th day, the best results were obtained with the dose of 25 mg/kg. Furthermore, there was a decrease in immunostained cells for iNOS, COX-2 and TNF- in treated groups with curcumin compared with ischemic group. As reduction Fluoro-Jade B positive cells. Conclusion: The previous treatment of the dams during the lactation period and the subchronic treatment of puppies with curcumin exerted neuroprotective properties against damage caused by global cerebral ischemia/reperfusion. These effects reflected improved in locomotor activity and memory. This activity was observed through anti-inflammatory and antioxidant actions of curcumin, especially three days after the ischemic event. These actions were confirmed with inhibition of COX-2, iNOS and TNF-. In addition, neurons were preserved in the hippocampus, which could be seen by staining with Fluoro-Jade B, viewed through green fluorescence. / Introduction/Objectives: The ischemic stroke precipitates a cascade of events that involve excitotoxicity, inflammation, oxidative stress and cell death. Curcumin has demonstrated neuroprotective effects, with antioxidant and antiinflammatory properties. Therefore, we aimed to study these effects of curcumin on experimental model of global cerebral ischemia in rats under development. Methods: Wistar female rats treatment began 24 hours after the birth of pups, during 21 days, with curcumin (25, 50 or 100 mg/kg/day, p.o.) or water + 1% Cremophor (10 ml/kg). In 21 day old rats were anesthetized with Ketamine (75 mg/kg, i.p.) and xylazine (10 m/kg, i.p.) and subjected to the global cerebral ischemia for 15 min, reperfusion at the same time, followed the left carotid cut. 24 h after surgery, pups started treating for 3 or 7 consecutive days. The animals treated for 7 days underwent behavioral tests, open field and water maze, to assess the locomotor activity and spatial memory, respectively. Groups of animals with 3 or 7 days after ischemia were sacrificed and the striatum, cortex and hippocampus were dissected. The striatum was used in homogenates preparation to monoamine and metabolites (DA, DOPAC, NS) dosing on HPLC. Homogenates from the hippocampus and cortex were prepared to test the antioxidant activity, 3 and 7 days post-ischemia, to nitrite and malondialdehyde (MDA) dosing. Hippocampal slices were separated for staining with Fluoro-Jade B and immunohistochemistry (iNOS, COX-2, TNF-). Results: Cerebral ischemia reduced the locomotor activity in rats and the treatment with curcumin reversed this effect; just like what happened with the special memory that was recovered after curcumin treatment in the three doses used. The striatum lesion reflected in a reduction in the levels of monoamines and these values were increased with the use of curcumin 3 and 7 days after surgery dose-dependent manner on day 3. MDA and nitrite levels were significantly increased in cortex and hippocampus, 3 and 7 days after global cerebral ischemia, when compared to the false-operated groups. The treatment with curcumin significantly protected these areas only at 3 days post-ischemia, in the doses of 50 and 100 mg/kg. On the 7th day, the best results were obtained with the dose of 25 mg/kg. Furthermore, there was a decrease in immunostained cells for iNOS, COX-2 and TNF- in treated groups with curcumin compared with ischemic group. As reduction Fluoro-Jade B positive cells. Conclusion: The previous treatment of the dams during the lactation period and the subchronic treatment of puppies with curcumin exerted neuroprotective properties against damage caused by global cerebral ischemia/reperfusion. These effects reflected improved in locomotor activity and memory. This activity was observed through anti-inflammatory and antioxidant actions of curcumin, especially three days after the ischemic event. These actions were confirmed with inhibition of COX-2, iNOS and TNF-. In addition, neurons were preserved in the hippocampus, which could be seen by staining with Fluoro-Jade B, viewed through green fluorescence.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:11705 |
| Date | 17 July 2015 |
| Creators | Elaine Cristina Pereira Lucetti |
| Contributors | Glauce Socorro de Barros Viana, Iri Sandro Pampolha Lima, Elaine Cristina Gavioli, Iana Bantim FelÃcio Calou, Pedro Braga Neto |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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