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Agaricus blazei Murill: isolamento, caracterizaÃÃo estrutural e atividades biolÃgicas dos polissacarÃdeos e/ou glicoconjugados presentes / Isolation,structural characterization and activities biological of the plysaccharides and/or glicoconjugados presente

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A cultura milenar do uso dos cogumelos pelos orientais como alimento funcional e medicinal tem chegado progressivamente ao ocidente, levada pelo anseio da populaÃÃo na busca de uma alimentaÃÃo mais saudÃvel. AlÃm disso, a comunidade
cientÃfica tem revelado por meio de publicaÃÃes, descobertas importantes em relaÃÃo ao valor nutritivo e Ãs atividades terapÃuticas dos cogumelos. Como uma contribuiÃÃo para um melhor conhecimento das propriedades destes fungos, neste trabalho, estÃo sendo abordados os estudos realizados com o
cogumelo Agaricus blazei Murill cultivado no Brasil em duas regiÃes distintas: Piedade, no Estado de SÃo Paulo e Guaramiranga, no Estado do CearÃ. Na primeira etapa, os estudos foram voltados para o cogumelo cultivado no
Cearà (Cog-Ce). Os resultados das anÃlises espectroscÃpicas (FTIR e RMN) mostraram que os polissacarÃdeos purificados e fraÃÃes (F1 a F4) apresentam caracterÃsticas da presenÃa de carboidratos e proteÃnas. Na seqÃÃncia em que o fracionamento foi realizado, atravÃs de precipitaÃÃes sucessivas em etanol, observou-se nos espectros FTIR uma reduÃÃo do teor de carboidratos e aumento no conteÃdo
protÃico. Espectros de absorÃÃo molecular das amostras indicaram a ausÃncia de proteÃna livre nos polissacarÃdeos purificados e suas fraÃÃes, o que aponta para a existÃncia de ligaÃÃo efetiva entre carboidrato e proteÃna, caracterÃstica dos
proteoglucanos. As anÃlises revelaram a presenÃa de glucanas de configuraÃÃes 1Â6) e a(1Â4), sendo a primeira de conteÃdo mais representativo. O monossacarÃdeo glicose foi predominante entre os aÃÃcares presentes e o elemento
mineral fÃsforo foi o maior constituinte entre os elementos analisados. O estudo dos polissacarÃdeos purificados e fraÃÃes isolados do Agaricus blazei Murill cultivado em SÃo Paulo (Cog-SP) foi realizado em uma segunda etapa do trabalho. Os polissacarÃdeos purificados isolados, apÃs anÃlise dos constituintes, foram caracterizados e suas propriedades em soluÃÃo investigadas, considerando-se parÃmetros fÃsico-quÃmicos e propriedades reolÃgicas. AlÃm disso, foram realizados ensaios biolÃgicos para avaliaÃÃo quanto a atividades terapÃuticas. As anÃlises por RMN 1H e 13C evidenciaram a presenÃa de glucanas (1Â6) e a(1Â4), sendo
predominante a glucana (1Â6). A presenÃa de glucanas a(1Â4) foi maior em relaÃÃo ao teor apresentado pelo Cog-Ce. O monossacarÃdeo glicose e o elemento mineral fÃsforo tambÃm foram predominantes no Cog-SP, entre os aÃÃcares e os minerais presentes, espectivamente. Maior teor de proteÃna e menor conteÃdo de carboidratos foram encontrados para os polissacarÃdeos purificados do Cog-SP quando comparados ao Cog-Ce.
Glucanas de configuraÃÃo (1Â6) foram isoladas atravÃs de procedimentos especÃficos de purificaÃÃo com uso de Timol. AnÃlises de FTIR e RMN 1H, 13C e os bidimensionais COSY e HMQC confirmaram a pureza do material na configuraÃÃo
(1Â6) com indÃcios de ligaÃÃo com grupo protÃico (proteoglucano). O estudo dos polissacarÃdeos purificados em soluÃÃo mostrou materiais de elevadas massas molares. Uma conformaÃÃo de novelo aleatÃrio foi fortemente sugerida pelas medidas de Espalhamento de Luz, sendo, provavelmente, devida à presenÃa da proteÃna e elementos minerais. Baixas viscosidades foram observadas nos polissacarÃdeos quando comparadas Ãs das glucanas tradicionalmente usadas na
alimentaÃÃo. Medidas reolÃgicas mostraram o comportamento Newtoniano dos materiais. ParÃmetros fÃsico-quÃmicos, tais como, tensÃo superficial e concentraÃÃo micelar crÃtica (cmc), entre outros, apresentaram-se semelhantes Ãqueles encontrados para polÃmeros com propriedades tensoativas. Em razÃo destas caracterÃsticas, os polissacarÃdeos purificados foram testados em relaÃÃo à capacidade de solubilizar o
fÃrmaco modelo griseofulvina. Os testes preliminares sugerem que esses polissacarÃdeos, na forma de proteoglucanos, em soluÃÃo, sÃo potencialmente Ãteis para atuar como meio solubilizante para drogas aromÃticas.
Os testes biolÃgicos realizados com os polissacarÃdeos e/ou
proteoglucanos purificados mostraram que estes apresentam atividades antiviral in vitro, pela inibiÃÃo da replicaÃÃo do poliovÃrus e antitumoral in vivo contra o Sarcoma 180. / The use of mushrooms as nutritional and medicinal through the milenar culture in oriental has arrived progressively in the Occident, take by the necessity of the population to search of a more healthy nutrition. Further more, the scientific community has revealed through publications, important findings in relation to the nutritional values
and the therapeutic activities of mushrooms. As a contribution for a better knowledge of the properties of this fungus, studies are being tackled with Agaricus blazei Murill cultivated in Brazil in two distinct regions: Piedade, in the state of SÃo Paulo and Guaramiranga, in the state of CearÃ. In the first stage, the studies were devoted to the cultivated mushrooms in Cearà (Cog-Ce). The results of the spectroscopy analysis (FTIR and NMR)
demonstrated that the purified polysaccharides and fractions (F1 and F4) showed characteristics of the presence of carbohydrates and proteins. After the fractionation was completed, through successive precipitations in ethanol, it was observed by the
FTIR spectrum, a reduction of the carbohydrate content and an increase in the protein content. Molecular absorption of the samples indicated the absence of free protein in
the purificated polysaccharides and its fractions, which point to the existence of the effective link between carbohydrate and protein, characteristics of the proteoglucans. The analyses revealed the presence of glucans of configuration b(1Â6) and a(1Â4), with the first having the most representative content. The glucose monosaccharides were predominant between the sugars present and the mineral phosphorus element was the major constituent between the elements analysed. The study of the purified polysaccharides and the isolated fractions of the
Agaricus blazei Murill, cultivated in SÃo Paulo (Cog-SP) were carried out in a second stage of the research. The isolated purified polysaccharides, after analyses of the
constituents, were characterized and its properties in solutions were investigated, taking into consideration physical-chemical parameters and rheological properties.
Furthermore, biological assays were also carried out for evaluation in the case of therapeutic activities. The analyses by 1H and 13C NMR made evident the presence of
b glucans (1Â6) and a(1Â4), which the glucana b(1Â6) was predominant. The presence of glucans a(1Â4) were greater in relation to the presented content by Cog- Ce. The glucose monosaccharides and the mineral phosphorus element were also
predominants in Cog-SP, in relation to the sugars and the minerals present respectively. The greater protein content and the smallest carbohydrate content were found for the purified polysaccharides of Cog-SP when compared to the Cog-Ce. Glucans b(1Â6) were isolated through the specific purification procedure with the use of Timol. FTIR and 1H, 13C NMR and the bidimensional COSY and HMQC, confirmed the purity of the material in the b(1Â6) configuration, with indication of the link to protein group. The study of purified polysaccharides in solutions showed compounds with
high molecular weight. The confirmation of random coils was strongly suggested by light scattering, which was, probably, due to the presence of protein and mineral
elements. Low viscosities were observed in the polysaccharides when compared to those of the glucans traditionally used in foods. Rheological measurements
demonstrated a Newtonian behavior of the materials. Physical-chemical parameters, such as surface tension and critical micelle concentration (cmc), as well as others,
demonstrated similar characteristics to those found for polymers with tensoactive properties. Due to these characteristics, the purified polysaccharides were tested in
relation to the solubilizing capacity using the poorly water soluble drug griseofulvin as a model solubilizate. The preliminary test suggest that these polysaccharides, in the gluco-protein form, in solution, are potentially useful to act as a solubilizer for aromatic drugs.
The biological test carried out with the purified polysaccharides and/or proteoglucans, demonstrated that they present anti-tumoral activities in vitro, through
inhibition of the replication of poliovirus and anti-tumoral in vivo against the Sarcoma 180.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:1279
Date09 November 2006
CreatorsMaria LeÃnia da Costa Gonzaga
ContributorsSandra de Aguiar Soares, Rosa Elisa Carvalho Linhares, LetÃcia Veras Costa-Lotufo, Judith Pessoa de Andrade Feitosa, NÃgila Maria Pontes Silva Ricardo
PublisherUniversidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em QuÃmica InorgÃnica, UFC, BR
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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