CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / As algas marinhas sÃo um grupo de seres vivos aquÃticos com capacidade de produzir polissacarÃdeos sulfatados. Esses polissacarÃdeos sÃo encontrados em grandes concentraÃÃes nas algas da espÃcie Gracilaria cornea e possuem diversas finalidades comerciais, sendo utilizados nos principais setores industriais. Possuem tambÃm relevÃncia cientÃfica por apresentarem diversas atividades biolÃgicas. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a citotoxicidade renal dos polissacarÃdeos sulfatados totais (PSTs) da alga marinha Gracilaria cornea. Primeiramente, estudaram-se os efeitos dos PSTs, em trÃs concentraÃÃes (1μg/mL, 3μg/mL e 4,5μg/mL), no sistema de perfusÃo de rim de rato isolado com a finalidade de avaliar as possÃveis alteraÃÃes dos parÃmetros renais. Neste modelo experimental foram utilizados ratos Wistar machos (280-300 g). ApÃs a perfusÃo renal, os rins foram submetidos à anÃlise histolÃgica. Os parÃmetros avaliados foram analisados pela ANOVA e Student t-test, com p<0,05. Investigaram-se os efeitos causados pelos PSTs em cultura de cÃlulas tubulares renais do tipo MDCK (Madin-Darby canine kidney). Essas cÃlulas foram cultivadas em garrafas plÃsticas a 37 ÂC em atmosfera de 5% de CO2, com meio RPMI 1640 suplementado com soro bovino fetal a 10%. Para avaliar o tipo de morte celular causada pelos PSTs em cultura de cÃlulas MDCK, foram realizados ensaios com anexina V-FITC e iodeto de propÃdio, marcadores de apoptose e necrose, respectivamente, no citÃmetro de fluxo com a concentraÃÃo de 50 Âg/mL dos PSTs. Os resultados encontrados demonstraram que os PSTs promoveram aumento significativo na pressÃo de perfusÃo (PP) e na resistÃncia vascular renal (RVR) nas concentraÃÃes de 3,0 e 4,5 Âg/mL. O fluxo urinÃrio (FU) diminuiu com a concentraÃÃo de 1 Âg/mL dos PSTs, porÃm sofreu aumento nas demais concentraÃÃes. O ritmo de filtraÃÃo glomerular (RFG) diminuiu significativamente nas trÃs concentraÃÃes. Foi observada diminuiÃÃo do percentual de transporte dos eletrÃlitos cloreto, sÃdio e potÃssio. O Clearance OsmÃtico (COSM) foi diminuÃdo e aumentado com as concentraÃÃes de 1,0 e 4,5 μg/mL, respectivamente. As alteraÃÃes histolÃgicas nos rins indicaram alteraÃÃes tubular e glomerular. O tratamento de cultura de cÃlulas com os PSTs causou reduÃÃo da viabilidade celular em todas as concentraÃÃes estudadas (200, 100, 50, 25, 12,5, 6,25 e 3,12 Âg/mL) nÃo sendo concentraÃÃo-dependente. Observou-se morte celular significativa, com evidÃncias de um processo apoptÃtico, alÃm de morte celular por apoptose tardia. Esses achados tentam colaborar para um melhor conhecimento acerca dos efeitos citotÃxicos renais dessa alga e pode ainda propiciar a descoberta de novas ferramentas farmacolÃgicas antitumorais. / The red marine algae are a group of sea live beings able to produce sulfated polysaccharides. These polysaccharides are found in great amount in algae of Gracilaria cornea species and they also have several commercial uses, mainly in industrial fields. They are also used for scientific pourposes because of its biologic activities. This work`s goal is to evaluate the effects of sulfated polysaccharides total (SPTs) from the seaweed Gracilaria cornea contributing to a better understanding about its effects. First, we have studied SPTs effects in three concentrations (1μg/mL, 3μg/mL e 4,5μg/mL), in the renal perfusion system aiming to evaluate the possible changes in kidney parameters. In this experimental model we used male Wistar rats (280-300 g). After the perfusion, the kidneys were subjects of histological analysis. The parameters were analised using ANOVA and Student t-test (p<0,005). The results we have found proved that SPTs promoted a significant increase in perfusion pressure (PP) and in renal vascular resistance (RVR) in concentrations 3,0 and 4,5 Âg/mL. The urinary flow (UF) decreased with the 1 Âg/mL SPTs concentration, but increased with the 3,0 and 4,5 Âg/mL concentrations. The glomerular filtration rate (GFR) significantly dicreased with all the three concentrations. We noticed a decrease in sodium, potassium and chloride transport. The Osmotic Clearance (COSM) decreased with 1,0 μg/mL concentration and increased with 4,5 μg/mL concentration. The histological changes were mild and included tubular and glomerular damages. We also investigated the side effects caused by SPTs in cultured renal tubular cells of the type MDCK (Madin-Darby canine kidney). MDCK cells were grown in plastic flasks at 37 ÂC in umidified atmosphere of 5% CO2 â air with RPMI 1640 medium supplemented with 10% fetal calf serum. The SPTs caused decrease in cell viability in all studied concentrations (200, 100, 50, 25, 12,5, 6,25 and 3,12 Âg/mL) and this effect did not depend on concentration. To evaluate the type of cell death caused by SPTs in MDCK cells, we performed anexin V-FITC and propidium iodide assays, respectively apoptosis and necrosis indicators. This analysis was made in a flow cytometry system with a 50 Âg/mL SPTs concentration. We found a significant cell death amount, with apoptotic signs, and also late apoptotic cell death. These findings can improve the understanding about this algae biologic activities and help to find new farmacologic antitumoral weapons.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:9290 |
| Date | 07 February 2014 |
| Creators | Terentia Batista SÃ de NorÃes |
| Contributors | Helena Serra Azul Monteiro, Norma Maria Barros Benevides, ClaÃdio Gleidiston Lima da Silva, Ana Maria Sampaio Assereuy, Ana Durce Oliveira da PaixÃo |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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