Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A exposiÃÃo do cÃrebro a desafios imunes durante perÃodos crÃticos do desenvolvimento leva a alteraÃÃes duradouras. Sabe-se que a exposiÃÃo a patÃgenos durante perÃodos perinatais està relacionada ao desenvolvimento de processos inflamatÃrios que levam ao desenvolvimento de transtornos neurodesenvolvimentais como autismo e esquizofrenia. No momento atual, modelos animais de esquizofrenia por desafio imune, prÃ- ou neonatais, tÃm ganhado muita evidÃncia. Um destes modelos envolve a administraÃÃo perinatal do vÃrus mimÃtico poly I:C. Os mecanismos subjacentes ao desafio imune por poly I:C em animais neonatos nÃo sÃo completamente compreendidos, sendo estes de grande importÃncia para o desenvolvimento de estratÃgias de prevenÃÃo contra transtornos neurodesenvolvimentais em idades precoces. Neste contexto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos neuroprotetores do Ãmega-3, liraglutide, risperidona ou clozapina na prevenÃÃo de alteraÃÃes neuroinflamatÃrias em cultura de cÃlulas neurais hipocampais expostas ao poly I:C. As cÃlulas hipocampais de camundongos Swiss foram obtidas de animais no primeiro dia de nascimento (P0) e submetidas ao poly I:C sozinho bem como tratadas simultaneamente com Ãmega-3, liraglutide, risperidona ou clozapina e incubadas por 72 horas. CÃlulas imersas somente em meio de cultura neurobasal enriquecido com o suplemento B27 foram utilizadas como controle. A viabilidade celular foi determinada pelo teste do MTT. Os seguintes parÃmetros foram avaliados de acordo com as tÃcnicas em parÃnteses: NFkBp50 e Ãxido nÃtrico sintase induzida -iNOS (imunofluorescÃncia), NFkBp65 (imunoblot), nitrito (mÃtodo de Griess), interleucina 6 - IL-6 e fator neurotrÃfico derivado do cÃrebro â BDNF (tÃcnica de ELISA). Os resultados mostraram que as cÃlulas neurais tratadas com Poly I: C apresentaram um aumento significativo de NFKBp65 ,NFKBp50, iNOS , Nitrito e IL-6, parÃmetros estes que diminuiram significativamente em animais tratados de forma concomitante com poly I: C + Ãmega â 3 ou poly I:C + Liraglutide, sendo observado tambÃm que o sobrenadante das culturas de neurÃnios hipocampais expostos ao Ãmega-3 apresentaram um alta quantidade de expressÃo do fator neurotrÃfico derivado do cÃrebro â BDNF. Os antipsicÃticos atÃpicos clozapina e risperidona tambÃm demontraram uma reduÃÃo destes parÃmetros. Os resultados encontrados neste estudo indicam que a exposiÃÃo de cÃlulas hipocampais ao vÃrus mimÃtico poly I: C possivelmente leva ao desenvolvimento da morte celular tanto por necrose como por apoptose e a adiminstraÃÃo concominante com Ãmega -3 ou liraglutide seguindo o protocolo de prevenÃÃo revelou um efeito neuroprotetor, efeito este que envolve a reduÃÃo da expressÃo da enzima iNOS, diminuindo a produÃÃo de oxido nÃtrico, inibindo a ativaÃÃo das subunidades p50 e p65 do fator de transcriÃÃo NFkB. AlÃm disso houve diminuiÃÃo na produÃÃo de IL-6, em adiÃÃo o Ãmega-3 parece ter seu efeito dependente da produÃÃo de BDNF. / Exposing the brain to immune challenges during critical periods of development leads to lasting changes. It is known that exposure to pathogens during perinatal period is related to the development of inflammatory processes which lead to the development of neurodevelopmental disorders such as autism and schizophrenia. Currently, animal models of schizophrenia immune challenge, pre- or neonatal, have gained much evidence. One of these models involves perinatal administration of virus mimetic poly I: C. The mechanisms underlying the immune challenge by poly I: C in newborn animals are not fully understood, which are of great importance to the development of strategies for preventing neurodevelopmental disorders at early ages. In this context, the aim of this study was to evaluate the neuroprotective effects of omega-3, liraglutide, risperidone or clozapine in preventing neuroinflammatory changes in cultured hippocampal neural cells exposed to poly I: C. The hippocampal cells of Swiss mice were obtained from animals on the first day of birth (P0) and subjected to poly I: C alone and simultaneously treated with omega-3, liraglutide, risperidone or clozapine and incubated for 72 hours. Immersed cells only through neurobasal culture enriched with B27 supplement were used as control. Cell viability was determined by MTT test. The following parameters were evaluated according to the techniques in parentheses: NFkBp50 and inducible nitric oxide synthase -iNOS (immunofluorescence), NFkBp65 (immunoblot), nitrite (Griess method), interleukin 6 - IL-6 and brain-derived neurotrophic factor - BDNF (ELISA). The results showed that neural cells treated with Poly I: C had a significant increase NFKBp65, NFKBp50, iNOS, nitrite and IL-6 significantly decreased these parameters in the animals treated concomitantly with poly I: C + omega - 3 or poly I: C + Liraglutide also been observed that the supernatant of cultures of hippocampal neurons exposed to the omega-3 showed an high amount of expression of brain-derived neurotrophic factor - BDNF. Atypical antipsychotics clozapine and risperidone also demonstrated decreased a reduction of these parameters. The results of this study indicate that exposure of hippocampal cells to the virus mimetic poly I: C leads to possible development of cell death either by necrosis and by apoptosis and concomitant adiminstraÃÃo omega -3 or liraglutide following the protocol prevention revealed an effect neuroprotective effect that this involves the reduction in iNOS expression, decreasing production of nitric oxide by inhibiting the activation of p50 and p65 subunits of NFkB transcription factor. In addition there was a decrease in IL-6 production in addition to omega-3 appears to have its dependent effect of BDNF production.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:9789 |
| Date | 17 June 2015 |
| Creators | Bruna Mara Machado Ribeiro |
| Contributors | Danielle MacÃdo Gaspar, Mariana Lima Vale, David Freitas de Lucena, Vivaldo Moura Neto, JanaÃna Serra Azul Monteiro Evangelista, Lia Lira Olivier Sanders |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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