Bovine anaplasmosis is caused by Anaplasma marginale and A.
centrale. The most pathogenic and important species for cattle production is A.
marginale, and is widely distributed in tropical, subtropical and temperate
regions of the world. A. marginale is an intra-erythrocyte rickettsia of susceptible
ruminants, biological and mechanically transmitted by ticks and hematophagous
insects. The tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus is the main vector of A.
marginale in Brazil. The congenital form of transmission in cattle may occur,
causing the neonatal anaplasmosis. The outer membrane of A. marginale
includes six well characterized major surface proteins, MSP1a, MSP1b, MSP2,
MSP3, MSP4 and MSP5, which play important role in the development of the
immune response of infected animals. In this study, we have used the Phage
Display technology to identify specific peptides that were immunoreactive to
monoclonal antibodies anti-A. marginale proteins. Peptide selection was
performed using a subtractive selection of a peptide library with 12 random
amino acids, Ph.D.-12, expressed on the surface of the M13 filamentous phage
concurrently against the anti-MSP1a and anti-MSP2. After four rounds of
selection and validation by ELISA, the selected peptides have recognized only
the anti-MSP1. Analysis of bioinformatics identified 45 peptides, which showed
the protein consensus sequence STxS that was represented in 78% of selected
phages. Due to the multiple motif repeats found in MSP1 protein, the STSSxL
motif may become an important biological target, with potential use in diagnostic
tests and vaccine for the control of Anaplasma marginale. / Anaplasmose bovina é uma infecção causada por Anaplasma marginale
e A. centrale. A espécie mais patogênica e de maior importância para bovinos é
a A. marginale e está amplamente distribuída nas regiões tropicais,
subtropicais e temperada do mundo. A. marginale é uma rickettsia intraeritrocitária
de ruminantes susceptíveis, transmitido biológica e mecanicamente
por carrapatos e insetos hematófagos. O carrapato Rhipicephalus (Boophilus)
microplus é o principal transmissor de A. marginale no Brasil. A forma
congênita de transmissão em bovinos pode ocorrer, ocasionando a
anaplasmose neonatal. A membrana externa do A. marginale inclui seis
proteínas principais de superfície (MSPs) bem caracterizadas, designadas de
MSP1a, MSP1b, MSP2, MSP3, MSP4 e MSP5 e desempenham papel
importante no desenvolvimento da resposta imune de animais infectados. Para
o desenvolvimento deste estudo, foi utilizada a técnica de Phage Display para
identificar peptídeos ligantes a anticorpos monoclonais reativos a proteínas de
Anaplasma marginale a partir de bibliotecas de peptídeos recombinantes por
meio da tecnologia Phage Display. Para seleção dos peptídeos foi realizado
uma seleção subtrativa utilizando uma biblioteca de peptídeos com 12
aminoácidos randômicos, Ph.D.-12, expressa na superfície do fago filamentoso
M13 concomitantemente contra os anticorpos anti-MSP1a e anti-MSP2. Após
quatro ciclos de seleção e validação por ELISA, o conjunto de peptídeos
selecionados apresentou ser unicamente reconhecido pelo anticorpo anti-
MSP1. Análises de bioinformática identificaram 45 peptídeos, que
apresentaram o motivo proteico consenso STxS, representado em 78% dos
fagos seqüenciados. Devido aos múltiplos sítios repetidos encontrados na
proteína MSP1, o motivo proteíco STSSxL pode ser um importante alvo
biológico, com potencial utilização em ensaios diagnósticos e vacinais para o
controle de Anaplasma marginale. / Mestre em Genética e Bioquímica
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/urn:repox.ist.utl.pt:RI_UFU:oai:repositorio.ufu.br:123456789/15808 |
| Date | 30 June 2008 |
| Creators | Cunha, Vanessa Rodrigues Borges da |
| Contributors | Goulart Filho, Luiz Ricardo, Brandeburgo, Malcon Antonio Manfredi, Marchiori, Carlos Henrique, Souza, Guilherme Rocha Lino de |
| Publisher | Universidade Federal de Uberlândia, Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica, UFU, BR, Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFU, instname:Universidade Federal de Uberlândia, instacron:UFU |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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