Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The definitive diagnosis of strongyloidiasis is normally done by detection of larvae
on faecal samples; however, the number of parasites is limited in most cases and
the elimination of larvae is irregular. Thus, developing reliable serological methods
for the diagnosis of strongyloidiasis becomes imperative. The aim of this study
was to establish a coproantigen ,antigen, antibody and immune complex detection
by enzyme-linked immunosorbent assay in serum and bronchoalveolar lavage
fluid (BALF) samples of non immunosuppressed or immunosuppressed rats
experimentally infected with Strongyloides venezuelensis. For kinetics of
coproantigen detection (0 and 5, 8, 13 and 21 days post-infection (d.p.i)), we
used an anti-L3 polyclonal antibody produced in rabbits. For antigen and immune
complex detection in serum and BALF samples (0 and 2, 5, 8, 13 and 21d.p.i),
the microtitre plates were coated with IgG anti-S. venezuelensis and with alkaline
parasite extract for antibody detection. The statistical analysis were analyzed
using Two Way ANOVA, followed by the Bonferroni test. The criterion for
statistical significance was set at p<0,05. The number of eggs/g of faeces
recovered at 8 d.p.i was significantly higher for non immunosuppressed and
immunosuppressed animals (p<0.01). The coproantigen detection was
significantly higher at 13° d.p.i in non immunosuppressed (p<0.05) and in
immunosuppressed it was anticipated to the 5th d.p.i. It was observed that antigen
detection in serum samples was not a good approache for evaluating the infection
however in BALF samples it showed superior results. In immunosuppressed
animals, IgG specific for S. venezuelensis was preferentially detected during the
5° and 13° d.p.i and in immunosuppressed animals, during the entire
experimental kinetics. In BALF samples, antibodies detection was observed from
the 8° to the 21° d.p.i in non immunosuppressed animals and in
immunosuppressed animals it was anticipatedto the 2° d.p.i, with higher reactivity
at 5° d.p.i (p<0.05). The immune complex detection in serum samples of the non
immunosuppressed animals was observed from the 5° to the 13° d.p.i and in
immunosuppressed animals, during the entire kinetics. In BALF samples, immune
complex detection was higher in non immunosuppressed animals. In conclusion,
coproantigen and immune complex detection in serum and BALF samples are
alternatives for early strongyloidiasis diagnosis, mainly in immunocompromised
cases. / O diagnóstico definitivo da estrongiloidíase normalmente é realizado mediante a
detecção de larvas nas fezes; porém a quantidade de parasitos é limitada e a
eliminação de larvas é reduzida e irregular. Sendo assim, o desenvolvimento de
testes sorológicos confiáveis para o diagnóstico da estrongiloidíase torna-se uma
alternativa necessária. O objetivo deste estudo foi demonstrar a cinética de
detecção de coproantígenos e de antígenos, anticorpos e imunocomplexos
circulantes em amostras de soro e de lavado bronco alveolar (LBA) de ratos
imunossuprimidos e experimentalmente infectados por Strongyloides
venezuelensis. Para a cinética (0 e 5, 8, 13 e 21 dias pós-infecção (d.p.i)) de
coproantígenos utilizou-se anticorpo policlonal anti-L3 produzido em coelhos.
Para a detecção de antígenos e de imunocomplexos em amostras de soro e de
LBA (0 e 2, 5, 8, 13 e 21 d.p.i), placas de microtitulação foram sensibilizadas com
IgG anti-S. venezuelensis e com extrato alcalino de larvas para a detecção de
anticorpos. A análise estatística foi realizada por Two Way ANOVA, seguida pela
teste de Bonferroni, considerando p<0,05 significativo. A cinética de eliminação
de ovos/g de fezes mostrou que o pico ocorre no 8° d.p.i sendo significativamente
maior nos animais imunossuprimidos (p<0,01). O pico de detecção de
coproantígenos nos animais não imunossuprimidos foi no 13° d.p.i (p<0,05),
sendo que nos animais imunossuprimidos a detecção foi antecipada para o 5°
d.p.i. A detecção de antígeno em amostras de soro não foi uma boa ferramenta
diagnóstica para avaliar a infecção enquanto que em amostras de LBA mostrou
ser ferramenta auxiliar. A detecção de IgG específica para S. venezuelensis em
amostras de soro de animais não imunossuprimidos foi preferencialmente
durante o 5° e o 8° d.p.i. e em animais imunossuprimidos, durante toda a cinética
experimental. Nas amostras de LBA, a detecção de anticorpos ocorreu do 8° ao
21° d.p.i em animais não imunossuprimidos e em animais imunossuprimidos, foi
antecipada para o 2° d.p.i, como pico de reatividade no 5° d.p.i (p<0,05). A
detecção de imunocomplexos em amostras de soro de animais não
imunossuprimidos foi possível do 5° aos 13° d.p.i e em animais
imunossuprimidos, durante toda a cinética. Em amostras de LBA, a detecção de
imunocomplexo foi maior em animais não imunossuprimidos. Concluiu-se que a
detecção de coproantígeno e de imunocomplexos circulantes em amostra de soro
e em amostras de LBA são uma alternativa para o diagnóstico precoce da
estrongiloidíase principalmente nos casos de imunossupressão. / Doutor em Imunologia e Parasitologia Aplicadas
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/urn:repox.ist.utl.pt:RI_UFU:oai:repositorio.ufu.br:123456789/16570 |
| Date | 19 December 2011 |
| Creators | Gonçalves, Ana Lúcia Ribeiro |
| Contributors | Costa-cruz, Julia Maria |
| Publisher | Universidade Federal de Uberlândia, Programa de Pós-graduação em Imunologia e Parasitologia Aplicadas, UFU, BR, Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFU, instname:Universidade Federal de Uberlândia, instacron:UFU |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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