Heart failure is the leading cause of death in both men and women of Western countries. The pathophysiology of heart failure is associated with abnormalities in intracellular calcium control. Calsequestrin (CSQ2), a calcium storage protein in cardiomyocytes, is negatively regulated by the transcription factor Egr-1 thus altering calcium availability for cardiac contraction/relaxation. Here, we tested the hypothesis that the proteins complexed to Egr-1 and/or their post-translational modifications would affect regulation of CSQ2 expression. Egr-1 and Sp1 compete for binding at the CSQ2 promoter, but also bind one another. In fact, together they form a complex with another ubiquitous transcription factor YBX-1. This complex was identified in vivo and in vitro by a series of co-immunoprecipitations. To test the idea that complex formation and CSQ2 expression could be affected by acetylation, histone acetyltransferase (HAT) inhibitors and histone deacetylase (HDAC) inhibitors were used to respectively decrease or increase acetylation within cells. We found that acetylation did not impact the formation of the Egr-1: Sp1: YBX-1 complex thought to regulate CSQ2 expression. However, changes in CSQ2 expression were observed when acetylation was modified by HAT and HDAC inhibitors. We conclude that acetylation modifies CSQ2 expression although not by means of the Egr-1: Sp1: YBX-1 complex even though Egr-1 is known to be acetylated. / La maladie du coeur est la cause principale de mortalité chez les femmes et les hommes en Occident. L'arrêt cardiac est souvent associé à des anomalies en control de calcium intracellulaire. Le facteur de transcription Egr-1 est connu pour son contrôle négatif de l'expression de calsequestrine (CSQ2), une protéine réservoir de calcium. Un manque de CSQ2 impacte les quantités de calcium disponible pour un bon fonctionnement cardiaque. Ici nous avons examiné l'hypothèse que les protéines liées à Egr-1 et que ses modifications post-translationelles. Egr-1 et Sp1 sont en compétition pour le promoteur de CSQ2 mais sont aussi liés l'un à l'autre. En fait, ensemble ils forment un complexe avec le facteur de transcription universel YBX-1. Ce complexe a été identifié en vivo et en vitro par co-immunoprécipitations. Considérant que la formation de ce complexe ainsi que l'expression de CSQ2 peuvent être affectés par l'acétylation, des inhibiteurs d'acétyltransferase d'histone (ATH) et de déacétylase d'histone (DACH) ont été respectivement utilisés pour réduire et augmenter l'acétylation en cellules. Nous avons trouvés que la formation du complexe Egr-1: Sp1: YBX-1 qui est possiblement responsable de l'expression de CSQ2 n'est pas affecté par les changements en acétylation. Par contre, des changements ont été aperçus dans l'expression de CSQ2 quand l'acétylation a été modifiée par ATH ou par DACH. Nous croyons que l'acétylation impacte l'expression de CSQ2 mais pas par entremise du complexe Egr-1 : Sp1 : YBX-1 malgré l'acétylation de la protéine Egr-1 elle-même.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.107782 |
| Date | January 2012 |
| Creators | Kane, Émilie |
| Contributors | Lorraine E Chalifour (Internal/Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Medicine) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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