Background: In the Current Model of Akt activation, a key event is its recruitment to the plasma membrane, where it is fully activated subsequent to sequential phosphorylation at positions Ser473 and Thr308. The distribution of Akt into various subcellular compartments may contribute to the different signaling pathways which it influences. There is evidence of compartment-specific regulators in plasma membrane (PM) and endosomes. Previous experiment in our laboratory showed that Akt achieved greater specific activity in PM compared to cytosol after insulin treatment. This raised the question whether Akt hyperactivity in PM is exclusively due to the high concentration in PM of activated Akt (theCurrent Model), or due to other factor (s) besides pSer473 and pThr308. Aim of study: The objective of our study was to assess the sequence and extent of the Akt activation state as a consequence of its subcellular localization. Therefore we compared the Akt activation state (Akt kinase activity / phosphorylation level, or Akt kinase activity/content) in two compartments (PM & cytosol) after insulin and EGF (Epidermal Growth Factor) administration. Results and conclusions: We found that Akt pThr308 correlates more closely to Akt kinase activity than pSer473; and concluded that Akt pThr308 is the important phosphorylation site determining Akt activity as stipulated in the Current Model. Second, Akt activity differed in PM vs cytosol with the activity in PM not fully explained by the levels of pSer473 and pThr308. We suggest that other regulator(s) exist in the plasma membrane which contributes to the up-regulation of Akt activity. Third, we found that the potential regulator(s) plays a comparable role to influence Akt activity in PM after both insulin and EGF administration. / Mise en contexte: Dans le modèle actuel d'activation de l'Akt, un événement clé est le recrutement de cette protéine à la membrane plasmique, où elle est complètement activée à la suite de la phosphorylation séquentielle des acides aminés aux positions Ser473 et Thr308. La distribution de l'Akt dans les divers compartiments subcellulaires pourrait contribuer aux différentes voies de signalisations. Il est rapporté que des régulateurs de compartiments spécifique dans la membrane plasmique (PM) et les endosomes contribuent à son recrutement. Des expériences précédentes dans notre laboratoire ont démontré que l'Akt a atteint un niveau d'hyperactivité dans la PM en comparaison avec le cytosol après avoir ajouté l'insuline. Ceci amène à la question de l'hyperactivité de l'Akt dans la PM est exclusivement dûe à la haute concentration d'Akt activés dans la PM (le modèle actuel) ou d'autre(s) facteur(s) additionnel (les) contribue (nt) à son activation. But de l'étude : L'objectif de cette étude est de déterminer la conséquence et l'ampleur du niveau d'activation de l'Akt en fonction de sa localisation subcellulaire. Ainsi, nous avons comparé le niveau d'activation de l'Akt (l'activité Akt kinase / niveau de phosphorylation, ou l'activité Akt kinase / contenu) dans deux compartiments (PM & cytosol) après l'administration d'insuline et d'EGF (Epidermal Growth Factor). Résultats et conclusions : Nous avons observé que l'Akt pThr308 est corrélée plus étroitement à l'activité de l'Akt kinase qu'à pSer473 et avons conclu que l'Akt pThr308 est le site significatif pour déterminer l'activité de l'Akt tel que défini dans le modèle actuel. De plus, l'activité de l'Akt est différente dans la PM versus cytosol. Également, l'activité de l'Akt dans la PM n'est pas complètementexpliquée par les niveaux de pSer473 et pThr308. Nous spéculons que d'autres facteurs régulateurs pourraient jouer un rôle comparable dans l'activité de l'Akt dans la PM après l'administration d'EGF et d'insuline.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.114537 |
| Date | January 2013 |
| Creators | Song, Jingwen |
| Contributors | Barry I Posner (Internal/Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Anatomy and Cell Biology) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
Page generated in 0.0021 seconds