The formation and maintenance of boundaries between embryonic regions are crucial to preserve the organization of the embryo during development. One important parameter that needs to be regulated at the interface between cells of two different tissues is cell-cell adhesion. In the present study, we attempted to understand and characterize the dynamics of cadherin-mediated cell-cell adhesion at the ectoderm-mesoderm boundary of the Xenopus gastrula. At this boundary, it has been recently shown that cells undergo cycles of attachments and detachments as the result of ephrin/Eph signaling (Rohani, Canty, Luu, Fagotto, & Winklbauer, 2011). Using three-dimensional live confocal microscopy, we found that the total levels of cadherin at the membrane do not change reproducibly during local repulsive events between ectodermal and mesodermal cells. Cadherin clusters, however, appear during contact establishment and often begin to fade away prior to the start of cell detachments. While the role of acto-myosin contraction in this process is still not fully elucidated, we found that cortical actin was upregulated during cell detachments, and that phospho-myosin was enriched at the endogenous ectoderm-mesoderm boundary. Furthermore, our data suggest that there may be two pools of activated myosin, and that the one that is most prominent at the boundary is the one involved in global cortical tension. / La formation et le maintien de frontières entre les différentes régions embryonnaires jouent un role primordial pour préserver l'organisation de l'embryon au cours du développement. L'adhérence intercellulaire est l'un des paramètres qui doivent être régulés aux interfaces entre les cellules de différents tissus. Dans la présente étude, nous avons tenté de comprendre et de caractériser la dynamique des cadhérines à la frontière entre l'ectoderme et le mésoderme dans la gastrula de Xénope. A cette frontière, il a été démontré que les cellules effectuent des cycles d'attachements puis de détachements, dictés par la voie de signalisation éphrine/Eph (Rohani et al., 2011). Par le biais de microscopie confocale tridimensionnelle, nous avons constaté que la quantité de cadhérines à la membrane ne variait pas au cours des instances de répulsions locales entre les cellules de l'ectoderme et du mésoderme. Les "clusters" de cadhérines, en revanche, apparaissent dès l'initiation du contact intercellulaire et semblent diminuer d'intensité progressivement, avant que les cellules ne se détachent complètement. Bien que le rôle de la contraction d'actine-myosine ne soit pas encore totalement élucidé, nous montrons que l'actine corticale augmente pendant et après les détachements cellulaires, et que la phospho-myosine est régulée à la hausse à la frontière ectoderme-mésoderme endogène. De plus, nos données suggèrent qu'il pourrait y avoir deux "pools" de myosine, et que celle qui se démarque à la frontière est celle qui est responsable de la tension corticale globale des cellules.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.119568 |
| Date | January 2013 |
| Creators | Touret, Anne-Sophie |
| Contributors | Francesco Fagotto (Internal/Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Biology) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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