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GFP-based screen for meiotic mutants in «C. elegans»

Meiosis causes the reduction of diploid cells into haploid gametes playing a significant role in all sexually reproducing organisms. The progression of meiosis can be broken down into two stages: meiosis-I and meiosis-II. In meiosis-I, homologous chromosomal segregation results in the formation of a chiasma – a secure connection between homologs. Establishing a chiasma requires three major landmarks between homologous chromosomes: recognition and alignment, synapsis, and recombination. A defect in any one of these key events can cause chromosomal non-disjunction or cell aneuploidy. The nematode Caenorhabditis elegans has many attributes that make it a well-suited model for studying various aspects of meiosis. The germ-line nuclei mature in a spatiotemporal manner, and the nuclei are easily distinguishable, during their progression of meiotic prophase-I, through DAPI staining. Should a mutation impair homologous chromosomal segregation of the X-chromosome the progeny of the animal will bear a visibly higher percentage of males, presenting a 'High Incidence of Males', or a 'Him', phenotype. The goal of this study is to screen, identify, and isolate more Him mutations by building on the screen "Green Eggs and Him". Nineteen Him mutants have been isolated, and 17 studied, in this project. DAPI staining has allowed the categorization of the mutants into: cell cycle, pairing, synapsis, or recombination defective mutants. Measuring autosomal and X-chromosome non-disjunction levels have allowed for an additional severity-level categorization for each of the seventeen mutations found. 4 mutations were found to be severe, 3 as severe/moderate, 2 moderate, 4 as moderate/low, and 4 were categorized as low-severity mutations. 9 of the 17 mutations were determined as having recombination deficiencies; 5 as pairing/synapsis defects – where the deficiency could be in just one of the processes, or compounded in both; / La méiose cause une réduction de chromosomes diploïdes dans les gamètes qui sont haploïde, jouant un rôle significatif dans tous organismes qui se reproduisent sexuellement. La progression de méiose peut être séparée en deux étapes : méiose-I et méiose-II. En méiose-I, la ségrégation chromosomique des homologues a pour résultat la formation d'un chiasma – une connexion assurée entre homologues. Etablir un chiasma exige trois événements majeures entre les chromosomes homologues : la reconnaissance et l'alignement, le synapse, et la recombinaison. Un défaut dans n'importe lequel de ces événements clés peuvent causer la non-disjonction des chromosomes ou l'aneuploïdie de la cellule.Le nématode Caenorhabditis elegans a beaucoup d'attributs qui le favorise comme un modèle pour étudier des aspects divers de la méiose. Les noyaux des cellules germinales mûrissent d'une manière spatiotemporale, et les noyaux sont facilement identifiables pendant la progression de prophase-I avec un traitement DAPI. Si une mutation diminue la ségrégation des homologues du chromosome X, la progéniture de l'animal comptera un pourcentage élevé de mâles, présentant un phénotype « Lui ».L'objectif de cette étude est de trier, identifier, et isoler des mutations « Lui » avec le criblage « Oeufs Verts et Lui ». Dix-neuf mutants « Lui » ont été isolé, et dix-sept étudié, dans ce projet. Le traitement avec DAPI a permis la catégorisation des défauts des mutants dans une des catégories suivantes: le cycle cellulaire, l'union des homologues, le synapse, ou la recombination. La mesure des taux de non-disjonction des autosomes comparé à celui pour le chromosome X a permis une catégorisation supplémentaire des dix-sept mutations par rapport à leur sévérité. Quatre mutations sont sévères, trois sont sévères à modérées, deux sont modérées, quatre sont modérées à fa

Identiferoai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.66851
Date January 2009
CreatorsNolis, Thomas
ContributorsMonique Zetka (Supervisor)
PublisherMcGill University
Source SetsLibrary and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada
LanguageEnglish
Detected LanguageFrench
TypeElectronic Thesis or Dissertation
Formatapplication/pdf
CoverageMaster of Science (Department of Biology)
RightsAll items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated.
RelationElectronically-submitted theses.

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