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Stratégies innovantes d'inactivation des norovirus : optimisation des paramètres opérationnels et compréhension des mécanismes d'action

La majorité des gastroentérites non-bactériennes sont causées par les norovirus, qui se transmettent principalement par les surfaces, les aliments et l’eau. La plupart des désinfectants domestiques sont inefficaces contre ces virus à l’exception de l’acide hypochloreux qui, cependant, perd une partie de son activité et génère des sous-produits toxiques en présence de matières organiques. Des méthodes de désinfection alternatives, efficaces et plus sécuritaires sont aujourd’hui nécessaires pour lutter contre la propagation des norovirus. Ce projet de recherche a porté sur deux approches prometteuses, les acides peroxycarboxyliques et les lumières pulsées. Dans un premier temps, quatre acides peroxycarboxyliques ont été évalués en fonction de leur concentration et du temps de contact. Les acides monoperoxycarboxyliques, à savoir les acides peracétique et perpropionique, ont été les plus efficaces en réduisant la charge virale d’environ 4 log10 après un traitement de 50 mg L-1 pendant 5 minutes. Ces molécules ont conservé cette activité contre des norovirus déposés sur de l’acier inoxydable et du PVC, propres ou sales, ainsi qu’immobilisés dans un biofilm artificiel. Dans le cas de l’acide peracétique, les expérimentations ont démontré que cette inactivation résultait principalement de dommages causés sur l’ARN viral, probablement par l’intermédiaire de radicaux libres. À forte concentration, les protéines de la capside étaient aussi altérées. Dans un deuxième temps, les norovirus ont été traités par une lumière pulsée (200 à 1000 nm ; 0,69 J cm-2 par impulsion). Trois impulsions (1,6 seconde) ont diminué la charge virale d’environ 4 log10 dans tous les milieux testés (tampon salin, eaux dures, minérale et usées) à l’exception des eaux turbides. A la turbidité maximum (1000 NTU), la réduction était de 2.4 log10. Cette technologie est aussi efficace pour la désinfection de surfaces propres, même en présence d’un biofilm artificiel (4 log10 après 7 impulsions), mais est affectée par la présence de matières protéiques. Nous avons démontré que les lumières pulsées inactivaient les norovirus en induisant des dommages à la fois sur l’ARN viral et l’intégrité des particules. En conclusion, ces résultats attestent l’efficacité de ces techniques et contribuent à une meilleure compréhension de leur principe d'action. / The majority of non-bacterial gastroenteritis is caused by norovirus, which is transmitted primarily through surfaces, food and water. Most household disinfectants are ineffective against these viruses with the exception of the bleach which, however, loses partially its activity and generates toxic residues in the presence of organic matter. Alternative, effective and safer methods of disinfection are necessary to hamper the spread of norovirus. This research project focused on two promising approaches, namely peroxycarboxylic acids and pulsed light. On the one hand, four peroxycarboxylic acids were evaluated based on their concentration and contact time. Monoperoxycarboxylic acids, namely peracetic and perpropionic acids, were the most effective by reducing the viral load of about 4 log10 after a treatment with 50 mg L-1 for 5 minutes. These molecules maintained their activity against noroviruses attached on stainless steel and PVC, clean or dirty, and entrapped in an artificial biofilm. In the case of peracetic acid, we showed that this inactivation was mainly due to damages on the RNA, probably through free radicals. At high concentrations, the capsid was also altered. On the other hand, noroviruses were treated with pulsed light (200-1000 nm; 0.69 J cm 2 per pulse). Three pulses (1.6 seconds) decreased viral load of approximately 4 log10 in all media tested (buffered saline, hard water, mineral water and sewage treatment effluent) with the exception of turbid water. At the maximum turbidity (1000 NTU), the reduction was 2.4 log10. This technology is also effective to disinfect clean surfaces even in the presence of an artificial biofilm (4 log10 after 7 pulses), but is affected by the presence of proteinaceous material. We demonstrated that the pulsed light inactivated norovirus by inducing damage to both the RNA and the integrity of the particles. In conclusion, these results demonstrate the effectiveness of these approaches and contribute to a better understanding of their mechanism of action.

Identiferoai:union.ndltd.org:LAVAL/oai:corpus.ulaval.ca:20.500.11794/25857
Date January 2015
CreatorsVimont, Allison
ContributorsJean, Julie, Fliss, Ismaïl
PublisherUniversité Laval
Source SetsUniversité Laval
LanguageFrench
Detected LanguageFrench
Typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Format1 ressource en ligne (xxx, 196 pages), application/pdf
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess, https://corpus.ulaval.ca/jspui/conditions.jsp

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