Problématique : Le surfactant pulmonaire est une structure vitale essentielle à l’homéostasie pulmonaire. Étant composé majoritairement de phospholipides, il est particulièrement susceptible à l’oxydation puisqu’il est en constante interaction avec l’environnement extérieur. Par des mécanismes encore inconnus, les macrophages pulmonaires jouent un rôle majeur dans l’élimination du surfactant pulmonaire endommagé. Objectifs : 1) Caractériser la réponse transcriptionnelle et fonctionnelle des macrophages au surfactant pulmonaire sain et traité au peroxynitrite (ONOO⁻) et 2) investiguer le rôle de l’endocytose dans l’initiation de cette réponse. Méthodes : Des macrophages murins isolés par lavages bronchoalvéolaires ou différenciés de la moelle osseuse ont été exposés à du surfactant pulmonaire sain ou traité au ONOO⁻, avec ou sans Latrunculine A, un inhibiteur des mécanismes d’endocytose dépendant de l’actine. L’expression de gènes impliqués dans la capture (marco, msr1, cd36), l’accumulation intracellulaire (plin2) et l’export (abca1, abcg1, srb1) lipidique a été évaluée par qPCR, ainsi que les capacités fonctionnelles d’export lipidique. Résultats : L’addition de surfactant pulmonaire sain ou traité au ONOO⁻ augmente l’expression de marco, msr1, cd36 et plin2 et diminue l’expression d’abca1, abcg1 et scarb1 chez les macrophages. Toutefois, certaines différences transcriptionnelles ont été observées entre les macrophages pulmonaires primaires et ceux dérivés de moelle osseuse. Également, qu’il soit sain ou oxydé, le surfactant engendre une diminution des capacités d’efflux de cholestérol des macrophages différenciés. De plus, ces impacts transcriptionnels et fonctionnels ne semblent pas affectés par un traitement à la Latrunculine A. Conclusion : En présence de surfactant, et ce, indépendamment son niveau d’oxydation, les macrophages pulmonaires semblent favoriser les mécanismes de capture et d’accumulation lipidique. Ainsi, aux dépens de ces mécanismes priorisés, les deux espèces présentent conjointement une diminution à la fois transcriptionnelle et fonctionnelle des mécanismes d’export lipidique. / Problematic: Pulmonary surfactant is a vital structure essential to reduce the surface tension at the liquid-air interface. It is mainly composed of phospholipids and is susceptible to oxidation due to its close interaction with the external environment. Pulmonary macrophages play a major role in degrading damaged surfactant. However, the mechanisms used by pulmonary macrophages to detect and initiate its degradation are still unknown. Objectives: 1) To characterize the transcriptional and functional response of macrophages to native and peroxynitrite (ONOO⁻)-treated pulmonary surfactant and 2) to investigate the role of endocytosis in the initiation of this response. Methods: Primary mouse pulmonary macrophages isolated from bronchoalveolar lavages or differentiated from the bone marrow were exposed to native or ONOO⁻-treated pulmonary surfactant with or without endocytosis inhibitors (Latrunculin A). Expression of key genes implicated in lipid capture (msr1, marco, cd36), intracellular lipid accumulation (plin2), and lipid export (abca1, abcg1, scarb1) was assessed by quantitative PCR, as well as functional lipid export capacities. Results: The addition of native and ONOO⁻-treated pulmonary surfactant increased marco, msr1, cd36 and plin2 expression and decreased abca1, abcg1 and scarb1 expression in macrophages. However, some transcriptional differences were observed between primary and bone marrow macrophages. Also, both native and ONOO--treated pulmonary surfactant generated a decrease in differentiated macrophages cholesterol efflux capacities. Moreover, those transcriptional and functional impacts do not seem to be affected by Latrunculin A treatment. Conclusion: In the presence of pulmonary surfactant and this, independently its oxidation level, lung macrophages seem to promote lipid capture and storage mechanisms. Thus, depending on these prioritized mechanisms, the two species jointly showed a transcriptional and functional decrease in lipid export mechanisms.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LAVAL/oai:corpus.ulaval.ca:20.500.11794/27837 |
| Date | 24 April 2018 |
| Creators | Hamel-Auger, Mélanie |
| Contributors | Morissette, Mathieu |
| Source Sets | Université Laval |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | mémoire de maîtrise, COAR1_1::Texte::Thèse::Mémoire de maîtrise |
| Format | 1 ressource en ligne (xii, 88 pages), application/pdf |
| Rights | http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
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