Magister en fisiología / Las patologías inflamatorias/infecciosas están frecuentemente asociadas con
cambios dinámicos en la activación de macrófagos en las que se modifica el
equilibrio entre células M1 y M2 en favor del fenotipo pro-inflamatorio con incremento
de la producción de mediadores tales como citoquinas y quimoquinas (11). En los
equinos existen dos grandes patologías asociadas con el aumento excesivo de
citoquinas inflamatorias secundario a la activación de macrófagos que pueden causar
la muerte del ejemplar: Infosura o Laminitis y Síndrome de Abdomen Agudo. Entre
los tratamientos propuestos para estas patologías se incluye el uso de Pentoxifilina
(PTX), fármaco inhibidor no específico de la fosfodiesterasa, que además tiene
propiedades anti-inflamatorias conocidas, pero con mecanismos de acción no bien
aclarados.
En esta investigación, nos propusimos evaluar si los efectos anti-inflamatorios
de PTX están mediados por la inhibición del fenotipo M1 de los macrófagos o con la
capacidad de modificar este fenotipo hacia el fenotipo anti-inflamatorio (M2). Para
ello se utilizó células equinas derivadas de PBMC obtenidos de sangre venosa
periférica de 4 ejemplares fina sangre de carrera (F.S.C.) clínicamente sanos. Las
células equinas fueron estimuladas con LPS (25ng/ml) por y con hIL-4 (20ng/ml) por
18 horas en presencia o no de PTX (250μg/ml por 90 minutos). Posteriormente se
cuantificó el contenido celular del mRNA de citoquinas pro- y anti- inflamatorias
(TNF-α e IL-10). Se demostró que células equinas tratadas con LPS, PTX indujo una
disminución significativa del mRNA de TNF-α. Interesantemente se observó que en
los cultivos de LPS con PTX el contenido del mRNA de IL10 fue significativamente mayor al observado en presencia de LPS solo. Además, en células equinas
cultivadas solo con PTX, se observó un incremento significativo del mRNA de IL10,
efecto similar al inducido por hIL4. Así mismo, los cultivos de PTX + hIL4 mostraron
que el contenido de IL10 en células equinas fue mayor al observado en los cultivos
por separado.
Los resultados aquí obtenidos demuestran por primera vez que PTX inhibe la
actividad de macrófagos del fenotipo M1 a la vez que potencia la diferenciación hacia
el fenotipo M2, resultando en una posibilidad cierta que el tratamiento con PTX en
patologías que cursan con procesos inflamatorios agudos obtiene beneficios tanto
por el control de la inflamación aguda como por el favorecer la reparación de los
tejidos dañados, restableciendo así el equilibrio entre las células pro- inflamatorias y
anti-inflamatorias. / Inflammatory / infectious diseases are often associated with dynamic
changes in macrophage activation in which the balance between M1 and M2
macrophages is modified in favor of the proinflammatory phenotype with increased
production of mediators such as cytokines and chemokines (11) . In horses, there are
two major diseases associated with excessive increase of secondary inflammatory
cytokine macrophage activation that can cause death: Laminitis and Syndrome or
Acute Abdomen. Among the proposed treatments for these conditions the use of
pentoxifylline (PTX) is recommended. This is a non-specific phosphodiesterase
inhibitor drug, which also has known anti-inflammatory properties, but it mechanisms
of action are not well clarified included.
In this research, we decided to evaluate whether the anti-inflammatory
effects of PTX are mediated by inhibition of macrophage phenotype M1 or by ability to
modify the phenotype to the anti-inflammatory phenotype (M2). For this purpose
PBMC equine cells obtained from peripheral venous blood of four healthy
thoroughbred (F.S.C.) was used. Monocytes-derived macrophages were stimulated
with LPS (25ng / ml) for 18 hours in the presence or absence of PTX (250μg / ml for
90 minutes) and with hIL-4 (20ng/ml) in the presence or absence of PTX (250μg / ml
for 90 minutes). Then, the mRNA of pro- and anti-inflammatory cytokines (TNF-α and
IL-10) cell content was quantified.
Our results shown that equine cells cultured with LPS, PTX induced a
significant decrease of TNF-α mRNA content. Interestingly, cells cultured with LPS
and PTX, the IL-10 mRNA content was significantly greater than with LPS alone. Furthermore, we observed in equine cells cultured with PTX a significant
increase IL-10 mRNA content, it was similar to hIL4 induced.
Likewise, cells cultured in presence of PTX and hIL4 together, IL10 mRNA
content was greater than that observed in cultures separately.
Here demonstrated for the first time that PTX inhibits the activity of
macrophages phenotype M1 and differentiation towards the M2 phenotype. We
postulate that, PTX treatments in equine acute inflammatory pathologies is
recommended for it properties to control of acute inflammation and favoring the
repair of damaged tissue, thus restoring the balance between anti-inflammatory and
pro-inflammatory cells.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/151485 |
| Date | January 2016 |
| Creators | Montero Sepúlveda, María Cecilia |
| Contributors | Guerrero Peralta, Julia, Universidad de Chile, Facultad de Medicina, Escuela de Postgrado |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | English |
| Type | Tesis |
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